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1、利用大肠杆菌生产胰岛素胰岛素作用机理 胰岛素是机体内 唯一降低血糖的 激素,也是唯一 同时促进糖原、 脂肪、蛋白质合 成的激素。作用 机理属于受体酪 氨酸激酶机制。胰岛素生理功能 调节糖代谢:胰岛素能促进全身组织对葡萄糖的摄取和利 用,并抑制糖原分解和糖原异生。 调节脂肪代谢:胰岛素能促进脂肪的合成与贮存,使血中 游离脂肪酸减少,同时抑制脂肪的分解氧化。胰岛素缺乏 会造成脂肪代谢紊乱。 调节蛋白质代谢:胰岛素一方面促进细胞对氨基酸的摄取 和蛋白质的合成,一方面抑制蛋白质的分解。生产步骤1.提取目的基因 2.提取质粒 3.基因重组 4.将质粒送回大肠杆菌 5.胰岛素的产生 1.提取目的基因从人的
2、DNA中提取胰岛素基因,可使用限制 性内切酶将目的基因从原DNA中分离。 主要方法:a.人工合成法b.从基因文库中提取c.鸟枪法d.PCR扩增技术2.提取质粒 从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环 状。此质粒将作为胰岛素基因的载体。 主要方法:a.碱裂解法b.煮沸法3.基因重组 取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内 切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的 基因与质粒“缝合”,形成一个能表达出胰 岛素的DNA质粒。 4.将质粒送回大肠杆菌 在大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质, 如CaCl2,这使细胞会吸收外源基因.此时将重 组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将 重组质粒吸收. 5.胰岛素的产生 在大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后, 便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大 量繁衍,便可大量生产出胰岛素! The end