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1、利用大肠杆菌生产胰岛素胰岛素作用机理 胰岛素是机体内 唯一降低血糖的 激素，也是唯一 同时促进糖原、 脂肪、蛋白质合 成的激素。作用 机理属于受体酪 氨酸激酶机制。胰岛素生理功能 调节糖代谢：胰岛素能促进全身组织对葡萄糖的摄取和利 用，并抑制糖原分解和糖原异生。 调节脂肪代谢：胰岛素能促进脂肪的合成与贮存，使血中 游离脂肪酸减少，同时抑制脂肪的分解氧化。胰岛素缺乏 会造成脂肪代谢紊乱。 调节蛋白质代谢：胰岛素一方面促进细胞对氨基酸的摄取 和蛋白质的合成，一方面抑制蛋白质的分解。生产步骤1.提取目的基因 2.提取质粒 3.基因重组 4.将质粒送回大肠杆菌 5.胰岛素的产生 1.提取目的基因从人的
2、DNA中提取胰岛素基因,可使用限制 性内切酶将目的基因从原DNA中分离。 主要方法：a.人工合成法b.从基因文库中提取c.鸟枪法d.PCR扩增技术2.提取质粒 从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环 状。此质粒将作为胰岛素基因的载体。 主要方法：a.碱裂解法b.煮沸法3.基因重组 取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内 切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的 基因与质粒“缝合”,形成一个能表达出胰 岛素的DNA质粒。 4.将质粒送回大肠杆菌 在大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质, 如CaCl2,这使细胞会吸收外源基因.此时将重 组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将 重组质粒吸收. 5.胰岛素的产生 在大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后, 便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大 量繁衍,便可大量生产出胰岛素! The end
