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1、急性肾功能衰竭及药物的影响Effect of drugs on acute renal failure model (acute renal failure, ARF) (acute renal insufficiency, ARI)1. 皮下注射氯化汞(HgCl2),复制兔急性中毒性 肾功能衰竭模型。2. 观测肾衰时,兔一般状态、尿常规、肾功能 的指标及肾脏形态的变化,分析急性肾衰的发 病机制。3. 通过药物对尿量的影响,观察对急性肾衰兔 的治疗效果,分析其可能的作用机制。【实验目的】n各种原因在短时间内(几小时至几周)引起肾脏泌尿功能急剧降低,以致机体内环境发生严重紊乱的综合症。n表现:
2、少尿, 无尿,高钾血症,水中毒,代谢性酸中毒,氮质血症(肌酐、尿素、尿酸)n广义的ARF包括肾前、肾性和肾后性三类;狭义ARF指急性肾小管坏死(acute tubular necrosis,ATN)一. 概念:急 性 肾 功 能 衰 竭(ARF)急性 肾中毒血红蛋白 肌红蛋白 对肾小管 的阻塞持续 肾缺血肾性(器质性)急性肾衰竭肾实质病变肾小管坏死n临床特点: 少尿或无尿, 尿钠浓度 ,血液尿素氮和血浆肌肝进行性升 高,尿肌酐/血肌酐比1015:1HgCL2损伤肾小管ATN,肾小管上皮脱落堵塞肾小管,而导致的少尿或无尿;细胞碎片、细胞自溶、脱落,在尿中形成管型。RBC、WBC、蛋白尿。尿常规检
3、查、血/尿肌酐、PSP排泄率、血尿素氮等评价肾功能。肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,所以能反映肾小球的滤过率(GFR)。【实验原理】1. 造模,提前24hr,给兔皮下注射0.3-0.4% HgCL2 1ml/kg,造成ARF模型。2. 称重、麻醉、膀胱插管(插管前,先取膀胱尿液 2ml,供尿常规、肌酐测定用)。3. 尿常规检查(1) 镜检细胞和管型(2) 尿蛋白测定: 取少量尿液于载玻片,加4%磺柳酸一滴,观察溶液浑浊程度。4. 颈动脉插管,采血3ml,离心,分离血清。 【实验方法和步骤】5. 尿液、血液肌酐浓度测定 取实验前留存的尿液上清液0.1ml和血清0.1ml,按肌酐试剂盒测定吸光
4、值(A) 6. 实验治疗对尿量的影响(1) 记录尿量。(2) 快速iv注射 NS 20ml(3) 缓慢iv 20%葡萄糖5ml(4) iv多巴胺20g/Kg(5) iv速尿5mg/kg7. 肾形态学观察耳静脉注射10ml空气处死家兔,取出肾脏称重,计算肾/体重比。观察肾脏外形,色泽。纵向剖开,观察皮髓质条纹,色泽。称重、麻醉 膀胱插管 颈动脉插管留膀胱尿液 取血约1ml生理盐水肌酐测定 记录尿量 治疗 葡萄糖多巴胺速尿 7. 管型尿肾上皮细胞管型(renal epithelial cast): 典型的上皮细胞呈瓦片状排列,充满管型,细 胞大小不等,核形模糊,有时呈浅黄色。 颗粒管型(granu
5、lar cast) 典型的上皮细胞呈瓦片状排列,充满管型,细 胞大小不等,核形模糊,有时呈浅黄色。 红细胞管型(red cell cast)管型中以红细胞为主体,外观略带黄褐色,可见到完整清晰、形态正常或异常的红细胞个体,易 于识别 白细胞管型(white cell cast)管型内容物以白细胞为主,有时含有退化变性坏死的白细胞(或脓细胞),一般多为中性粒 细胞。 透明管型(hyaline cast) 由TH蛋白和少量清蛋白共同构成,也是各种管型的基本结构。 血肌酐 尿肌酐 尿蛋白 尿镜检 肾/体重比mol/L (mg/dl) RBC WBC 管型尿 急性肾功能衰竭各项指标的变化正常ARF急性肾衰实验性对尿量的影响治疗前 NS 20ml 20%葡萄糖 多巴胺 速尿 正常ARF思考题(1) HgCl2引起急性肾衰的机制?(2) 肾功能的各指标有哪些?(3) 判断ARF的主要指标是什么?(4) 实验治疗项目的作用机制及意义?