《定量检查法标准操作规范2006.12.12》由会员分享，可在线阅读，更多相关《定量检查法标准操作规范2006.12.12（44页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 细菌内毒素定量检查法细菌内毒素定量检查法天津大学药品生物制品检测技术研究开发中心 易泰实验室第一部分 细菌内毒素定量 检查法基础知识 一.细菌内毒素标准品 二.鲎试剂（TAL） 三.细菌内毒素检查用水一.细菌内毒素标准品 细菌内毒素国家标准品（RSE ）： 批号： 981 效价：9000 单位： EU 细菌内毒素工作标准品（CSE ）： 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准 品为基准标定其效价。革兰氏阴性菌细胞壁结构 细菌内毒素化学结构(脂多糖LPS)： 1.O-特异性多糖链(亲水端) 2.核心多糖 3.类脂A（生理活性中心）(疏水端)细菌内毒素在水溶液中的状态：！2000版和2005
2、版中国 药典在“细菌内毒素”检查法中 都注明：细菌内毒素溶液要 混旋15min和30s。革兰氏阴性菌、某些球 菌、病毒、螺旋体、立 克次体、支原体内毒素单核巨噬细胞、 多形核白细胞产生特异性与非 特异性结合肿瘤坏死因子白介素-1白介素-6白介素-8等细胞因子单核巨噬细胞瀑布样反应前列腺素血小板 激活因子一氧化 氮等炎症介质全身炎性反应综合征 脓毒症 脓毒性 休克 多器官功能衰竭 死亡内毒素致病机理： 二.鲎试剂（TAL）鲎试剂定义(部颁标准):鲎 科动物东方鲎的血液变形细胞溶 解物的无菌冷冻干燥品.细菌内毒素和鲎试剂生化反应原理：细菌内毒素（脂多糖LPS） 1,3-(d,)-葡聚糖C因子 C+
3、B因子 B+ G+ G凝固酶原 凝固酶凝固蛋白原 凝固蛋白（凝胶） 三.细菌内毒素检查用水1.药典规定：凝胶法： L 则供试品为不合格产品 2.Ct L 则供试品为合格产品或边缘产 品 回收率实验更改的条件： 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生 产工艺改变或试验环境中发生了任何 有可能影响试验结果的变化时,需重新 进行干扰试验。 1.样品的工艺流程改变的时候 2.样品的原料来源改变的时候第三部分 细菌内毒素定量检查 法原理-动态浊度法0.2mlCSE溶液10Eu/ml0.1ml鲎试剂OD值=-lg (It/Ie) 名称：光密度 含义：浊度10Eu/mlOD值t0OD值t0 10Eu/ml 1Eu/ml 0.1Eu/ml 0.01Eu/mlOD值t0 10Eu/ml 1Eu/ml 0.1Eu/ml 0.01Eu/ml0.02OD值t0 10Eu/ml 1Eu/ml 0.1Eu/ml 0.01Eu/ml0.02T1T3T2T4tClgtlgC lg10lg1lg0.1lg0.01lgT4lgT3lgT2lgT10OD值t0 10Eu/ml 1Eu/ml 0.1Eu/ml 0.01Eu/ml0.02T1T3T2T4TslgtlgC lg10lg1lg0.1lg0.01lgT4 lgT3lgT2 lgT1lgTslgCs赵惠明谢谢大家！
