染色体实验室质量控制

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1、染色体实验室质量控制一、室内质控：主要是培养基，常用试剂的 室内质控。 二、室间质控：定期与开展染色体检查的实 验室合作，对同一血液标本进行实验对比， 对 实验中的不足之处进行改进。一、室内质控 1、外周血培养基质控程序 目的：新购买的培养基需要做预实验以检 测培养基的质量，避免因试剂的质量而影 响实验结果。操作程序： 1）取新购买的培养基，接种新鲜的外周血标本 ，每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基中接 种.。 2）将接种好的培养基放入， 培养箱中，培养。 3）培养结束前小时，加秋水仙素处理。 4）收获细胞。 5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片， 滴好的片放入烘箱中，烘烤。6）胰酶消化，

2、吉姆萨染色。7）将玻片烘干后镜检观察。注意事项： 接种过程中注意无菌操作，以免细菌污染 导致实验结果异常，影响对培养基质量的 判断。 2、秋水仙素质控程序 目的：新购买的秋水仙素需要做预实 验以检测秋水仙素的质量，避免因试 剂的质量而影响实验结果。操作程序： 1）取培养基，接种新鲜的外周血标本， 每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基 中接种. 2）将接种好的培养基放入， 培养箱中，培养。 3）培养结束前小时，加新购买的秋水 仙素处理。 4）收获细胞。5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行 滴片，滴好的片放入烘箱中，烘 烤。 6）胰酶消化，吉姆萨染色。 7）将玻片烘干后镜检观察。注意事项： 秋水仙素

3、处理时要注意加入秋水仙素的 量和作用时间。 3、固定液质控程序 目的：新购买的甲醇和乙酸需要做预实验 以检测试剂的质量，避免因试剂的质量而 影响实验结果。 操作程序：在收获细胞的实验过程中使用 新的固定液，制片后分析固定液的效果。 1）按甲醇：乙酸=3:1比例配置固定液。 2）预固定：加入1.5ml固定液，固定5min。 3）第一次固定：加入8ml固定液，固定 30min。 4)第二次固定：加入8ml固定液，固定30min 。 5)配置细胞悬液滴片，80烘烤3h。 6)胰酶消化，吉姆萨染色。 7)将玻片烘干后镜检观察。 8)镜下观察细胞核型较多，染色体形态规则 ，分布均匀，条带清晰，则固定液效

4、果良 好，可以进行正常实验。 4、胰酶质控程序 目的：新配置的胰酶需要做预实验以检测 胰酶的质量，避免因试剂的质量而影响实 验结果。 操作程序： 1）配置胰酶工作液（工作液浓度：42ml生 理盐水+8ml0.25%胰酶储存液） 2）配置吉姆萨染液（储存液用蒸馏水1： 10稀释） 3）将烘烤好的玻片用胰酶消化，吉姆萨染 色。 4）将玻片烘干后镜下观察 5）镜下观察染色体形态规则，条带清晰， 则胰酶效果良好，可以进行正常实验。 吉姆萨染液质控程序 目的：新配置的吉姆萨染液需要做预实验 以检测吉姆萨染液的效果，避免因试剂的 质量而影响实验结果。 操作程序： 1）配置吉姆萨工作液:将吉姆萨染液储存液

5、用蒸馏水1：10稀释。 2）将经胰酶消化的玻片放入染缸中染色， 一般染色3-5分钟。 3）自来水冲洗干净后放入烤箱中烘干。 4）镜下观察：细胞着色均匀，染色体的条 带清晰，则染液的效果良好，可以进行正 常实验。 4、室内质控的失控处理 在试剂的质控中，若发现试剂的使用效果 不好，应重新配制，如果使用的是成品， 应立即联系厂家更换产品，严重的要考虑 更换厂家。 对每一批新到的、新配制的试剂，都必须 先做预实验，检测效果可以后才可以使用 。二、室间质控 为了检测本科室实验方法的准确性，可重 复性，实验室必须定期与其它实验室进行 室间质控。 操作程序： 1、随即选取本实验室的几份新鲜血液标本 送检其

6、它实验室，进行细胞培养，制片，G 显带分析。 2、本实验室同样对这几份标本进行细胞培 养，制片，G显带分析。 3、对每一份标本分析两个实验室的结果， 从细胞的形态，染色体的形态，条带等各 方面进行分析。 4、通过室间质控定期检验本实验室的准确 性。三、常见差错处理 1、染色体检测的血液标本，都需肝素钠抗 凝，如用其它抗凝剂抗凝，需通知相关人 员予以重新采集标本，并在标本接收和 报告单发放记录本及不合格标本登记 本上记录存档； 2、凡是待测定的血液标本有凝血的情况， 应通知相关人员予以重新采集标本，并在 标本接收和报告单发放记录本及不 合格标本登记本上记录存档； 3、凡是待测定的血液标本有血渗出

7、的情况 ，应通知相关人员予以重新采集标本，并 在标本接收和报告单发放记录本及 不合格标本登记本上记录存档； 4、染色体标本需严格无菌操作，采用经高 温高压消毒的容器盛装，如标本送检不规 范，应通知相关人予以重新采集标本，并 在标本接收和报告单发放记录本及 不合格标本登记本上记录存档； 5、经查对标本的病人姓名、年龄、性别、 住院号、床号、及检验号等不相符者，应 通知相关人员予以重新采集标本，并在 标本接收和报告单发放记录本及不合 格标本登记本上记录存档。 6、有的标本片，分裂相很多，但染色体“瘦 小”，是不是培养液营养不良引起？ 淋巴细胞一定要在良好的营养环境中才能 生长增殖，分裂相多，说明了

8、淋巴细胞生 长旺盛，染色体“瘦小”，是因为在制片过程 中，染色体的蛋白结构发生异固缩造成的 ，起因可考虑为以下几个原因： 秋水仙素浓度是否过高，或处理时间是 否过长？ 加固定液的速度不要过快，有时瞬间的 固定，会使蛋白结构产生固缩现象。 固定液中的甲醇、冰醋酸是否有质量上 的改变。 可以适当加大固定液中的冰醋酸的比例 ，如甲醇冰醋酸=31.5 7、为什么外周血培养过程中有时会出现凝 血现象？ 在实验过程中下列原因可能会导致培养后 的血液出现凝血现象： 培养液中的PHA含量过高。 培养液中的肝素使用量不足或效价下 降。 接种后，没有立即将外周血与培养液 充分摇匀。 8、为什么外周血培养有时会出现溶血情况 ？ 在实验过程中下列原因可能会导致培养后 的外周血溶血： 、细菌污染。 、PHA和肝素过量。 、外周血样品不新鲜。 9、为什么有个别样品出现不明原因的无分 裂相的现象？ 由于有个别病人可能服用过抑制白细胞分 裂增殖的药品（如白血病病人），这类病 人的样品往往经培养后，白细胞仍受到药 物抑制而不进行分裂增殖，因此标本片很 难找到分裂相，建议停药一个月以上再作 染色体检查。