牛结核防控技术及研究进展

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1、牛结核防控技术及研究进展内容提要 结核病流行现状 牛结核病诊断方法及研究进展 牛结核病预防与治疗 牛尾静脉采血介绍 记录一、结核病流行现状结核病概述 结核分枝杆菌引起 慢性消耗性 人畜共患病 OIE:强制报告疫病 结核性肉芽肿(结节) 干酪样坏死或钙化牛结核病危害 奶牛 牛奶-人结核病传染源 产奶量下降、牛奶品质降低 肉牛-时间短 饲料报酬低 役牛 劳动力减弱人型菌牛型菌禽型菌人 犬 猫 牛 马 羊 猪 鸡病原-致病性结核分枝杆菌属人型菌 l 左手捏起皮肤,右 手持针管; l 将针头与皮肤成30- 45角刺入表皮与真 皮之间,缓慢注入 药液; l 以局部形成丘疹状 隆起为准。 皮试工具判定标准

2、中国GB/T18645- 2002OIE皮内注射0.1ml(2000IU) 牛结核菌素,72h后观察皮 厚,96与120h再观察一次牛结核菌素单用,或牛与禽结核菌 素联用,不少于2000 IU,72h后观察阳性:皮厚差大于4mm 阴性:皮厚差小于2mm 可疑:皮厚差2-4mm 疑似牛立即在另一侧用 同一批PPD第二次皮试 ,72h后观察阳性:皮厚差大于4mm 阴性:皮厚差小于2mm 可疑牛42天后重作皮试 牛与禽结核菌素联用时,牛结核菌 素皮厚差大于禽结核菌素皮厚差 4mm为阳性,1-4mm为可疑,小于 或等于禽结核菌素皮厚差为阴性结核菌素皮内变态反应的特点 世界动物卫生组织OIE迄今为止唯一

3、推荐的牛结核病的诊断方法非特异性反应重症牛敏感性低操作复杂烦琐结果判断主观性大IFN-检测方法检测OD值并确定IFN- 水平抽取全血 ESAT-6CFP-10有丝分裂原对照将全血转移至培养孔中, 加入抗原培养过夜吸取上层血浆 进行夹心ELISA检测, 温育 60分钟洗涤, 加底物, 作用30分钟后终止反应 TMBTMB显色IFN- IU/mlOD 450nm标准曲线步骤 1 全血培养步骤 2 IFN-gamma ELISA阴性对照IFN-释放检测特点 诊断潜伏感染及活动性结核病 高特异性,高敏感性 外周血,24h出结果 比TST更贵,采血后在12小时内检测 BoviTB IFN-gamma k

4、it 目前发达国家均以该方法辅助进行结核 病根除计划牛结核病特异抗体检测方法 ELISA方法 胶体金方法 Rv3872 CFP10 ESAT6 MPB70 MPB83牛结核特异抗体检测 检测针对特异抗原(单个或多个)的抗体 抗体消长规律复杂! 总体而言抗体水平与病程发展成正比 抗体针对的抗原,抗体类型,抗体水平因个体 而异,因时而异 方法敏感性低 多抗原联合使用及与TST联合使用可显著提高 检出率三、牛结核病预防和治疗预防 检疫 分群隔离 培育健康牛犊 消毒 5%来苏儿或3%氢氧化钠或0.1%-0.5%过氧 乙酸消毒畜舍、饲养用具和运动场 牛奶消毒后出场治疗 早期 氨基水杨酸钠、异烟肼 难以根

5、除 价值不大控制根除计划扑杀四、牛尾静脉采血介绍尾静脉采血优点l方便快速l 一般不需要保定l减小应激尾静脉采血方法l 牛尾静脉位于尾椎腹侧正中的 脉管沟内l 左手抓住尾巴垂直上举,右手 用镊子取5%碘酒棉球在尾根1 /21 /3处(离尾根处7-15cm)进行消毒l 手持9号采血器,顺血管斜角刺 入,见有血液回流,即可外拉针芯使血液流入采血器l 采血完毕,局部消毒适当按压采血工具血液处理l 抗凝血l真空采血管或其它容器内抗凝剂。采集的血液立即与抗 凝剂充分混合,防止凝固 l肝素:1%肝素0.1毫升可抗凝5-10毫升血lEDTA:每毫升血加入20mgl枸缘酸钠:每毫升血加入3-5mgl 血清l标记,室温静置l凝固后吸取自然析出的血清或经离心分离l分装,再贴上标签冷藏保存备检五、记录畜主时间皮厚增 加(mm)牛号皮皱厚 (mm)操作者 皮皱厚 (mm)备注记录卡健康养殖 奶业腾达

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