实验动物设施与管理饲料与营养

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1、 实验动物设施与管理 实验动物的饲料与营养第一节第一节 实验动物设施实验动物设施四要素：建筑物、设备、运行、管理。 实验动物设施及环境硬件条件是影响实验动物 质量和动物实验结果的重要因素。 实验动物设施及环境运行管理是实验动物工作 者的重要工作内容。 简要介绍实验动物设施及环境相关基础知识、 建设标准和运行管理概要。一、实验动物设施分类 （一）根据功能、使用目的分类： 1.实验动物繁育、生产设施：用于动物生产的建筑 物、设备、运行管理的总称。包括：动物生产区 、辅助生产区、辅助区。 2.动物实验设施：进行动物实验的建筑物、设备、 运行管理的总称。包括：动物实验区、辅助实验 区、辅助区。（二）按

2、照空气净化的控制程度，实验动物环境 及设施国家标准（GB149252001），分三类： 1、普通环境：传染因子不完全控制，普通级动物。 2、屏障环境：严格控制传染因子，SPF级动物。 3、隔离环境：绝对隔离传染因子，悉生及无菌动物 。附：实验动物环境设施分类（国标GB50447-2008）环境设施分类使用功能适用动物等级普通环境实验动物生产、动物实验、 检疫基础动物（普通级）屏障环境 正压负压实验动物生产、动物实验、 检疫 清洁动物，SPF动物 动物实验，检疫 清洁动物，SPF动物 隔离环境 正压 负压实验动物生产、动物实验、 检疫 无菌动物，悉生动物，SPF动物 动物实验，检疫 无菌动物，悉

3、生动物，SPF动物 二、环境和实验动物的关系 1. 温度：环境温度高，动物食欲减退，摄食量减少，雄 性动物精子生成能力下降，甚至出现睾丸萎缩，繁殖功能 下；环境温度低导致动物冻伤、感冒、支气管炎和肺炎等 疾病。 2.湿度：高温、高湿表现闷热；低温、高湿动物的感觉是 阴冷（兔的腹泻等） ；低湿时空气过分干燥，动物表现为 躁动不安及反常现象（哺乳母鼠不让仔鼠哺乳，甚至吃鼠 ；大小鼠表现有环尾病特征性症）；北方加湿南方减湿。 3. 噪声：噪声可妨碍动物的怀孕、受精卵的着床，或者导 致流产，甚至出现食仔现象，泌乳量减少，离乳率下降， 动物间的咬杀率升高；强噪声可100引起DBA/2小鼠的听 源性癫痫，

4、ICR小鼠也有6880的发作率，SD大鼠肾小 球毛细血管充血 ，KM小鼠胸腺重量明显减轻，脾脏重量明 显增加，抗体形成细胞分泌抗体的能力均显著降低。4.氨：和环境中的微生物相互作用后会诱发动物呼吸器官疾病 如肺水肿、肺炎等（250mg/L下豚鼠49d，死亡率达80%， 25250mg/L的氨环境中4周6周时，可发生严重鼻炎、中 耳炎、支气管炎和支原体性肺炎）； 5.照度：影响动物的发情、繁殖以及视网膜障碍等。大鼠在15Lx 条件下，不发情个体增加。产仔数在250Lx条件下最多，白 化大鼠在20000Lx下12h后就出现视网膜障碍；在200Lx时,雌 鼠阴道开口比30Lx时要早3d。小鼠的发情周

5、期在20Lx的光照 下有规律地呈4d周期，比在5Lx或200Lx条件下稳定）。 6.动物在IVC环境:生长发育优于开放环境,昆明种小鼠、近交系BALB/c小 鼠、SD大鼠体重有显著差异(P20g1002.5kg2大鼠150g4010-20kg1豚鼠350g154kg1地鼠100g83兔2.5kg22kg6屏障级设施和普通级设施生科院中药与海洋药物实验室SPF级设施 2004年取得使用许可证SPF级饲养员 罗秀兰（8年）普通级设施 2004年取得使用许可证SPF级饲养员 宗国巧（18年）人员一更室淋浴室二更室缓冲一洁净走廊检疫间饲养室次洁净走廊缓冲二走廊贮物间实验室饲养室次洁净走廊缓冲二洗消间生

6、科院中药与海洋药物实验室SPF动物设施人员流动路线生科院中药与海洋药物实验室SPF级动物设施物品流动路线生科院中药与海洋药物实验室SPF级设施动物流动路线接收走廊缓冲间消毒剂擦拭外包装检疫间紫外照射30min饲养室检疫3-5天第二节 实验动物设施的运行管理动物设施正常运行离不开管理管理的核心内容是：管人、管物、管设备管理的方式是：规章制度和操作规程（SOP）管理效果验证：环境检测结果（动物质量检测）管理的理想模式：员工道德价值观的建立一、人员配置及管理 设施负责人：负责、协调、跟踪、落实 后勤保障人：设施、设备运行、记录、维护。一般由设施内、外辅助人员担任。 质量监督人：设施内外操作、记录监督

7、。罗秀兰实验动物技术培训资格证二、屏障设施、设备运行维护重点新设施运行前准备：调试、检测、入设备、卫生、消毒、再检测配电系统：备用电源，电管家空调系统：温湿度。专业公司，定期维护。备用空调风机、风管：风量。报警，检漏。备用风机过滤器：定期更换灭菌器：安检，持证上岗。净化水设备：设施内外：环境卫生，维持性消毒。渡槽液更换环境监测：定期三. 规章制度和操作规程1.设施设备运行、使用、维护方面。如：空调、电、水、风机、灭菌炉、传递窗、渡槽等。2.过滤器安装、使用、清洁、更换。3.设施内外卫生、维持性消毒。4.人员、物品、动物的管理及进出设施的管理。5.设施内饲养人员和实验人员操作及管理。6.安全值班

8、检查7.环境检测举例实验动物编号标记标准操作规程 （SG-016 ） 1目的：为了规范实验动物编号标记方法，对分组后的实验动物进行标记编 号，制定本程序。 2范围：适用于实验动物编号标记的活动。 3职责：所有实验人员应遵守本规程，动物实验室负责人负责监督和管理。 4工作程序： 4.1良好的标记方法应满足标号清晰、耐久，简便、适用、无明显损伤、无毒 和易辨认等要求。常用的标记方法有染色法、耳缘剪孔法、烙印法、挂号 牌法、挂环法等。 4.2染色法：染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂 染，或用不同颜色等代表一定的编号，来区别各组动物，是实验室最常用 、最容易掌握的方法。 4.2

9、.1常用染色剂：黄色：35苦味酸溶液红色：0.5中性红或碱性品红溶液咖啡色：2硝酸银溶液（涂后需光照10分钟）黑色：煤焦油的酒精溶液4.2.2 编号的原则：如动物数在10只以下， 在左前腿上为 1，左腰部为2， 左后腿为3，头部为4，背部为5， 尾基部为6，右前腿为7，右腰部为8， 右后腿为9。如果动物编号超过10， 需要编10100号码时， 可采用在上述动物的不同部位， 再涂染另一种涂染剂 (如0.5中性红或品红溶液)斑点， 即表示相应的十位数， 即左前腿上为10，左腰部为20。 如在左前腿上标记红色和黄色斑点， 表示为11，如果红色标记在左前腿上， 而黄色标记在左腰部，是12， 以此类推。

10、如图。 本设施大小鼠采用染色法编号标记。4.3 烙印法：用刺数钳在动物耳上刺上号码，然后用棉签蘸着溶在酒精中的 墨黑在刺号上加以涂抹，烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。 4.4 号牌法：用金属制号牌固定于实验动物的耳上或系颈上。本设施狗采用 此法编号标记。4.5鼠尾标记编号用苦味酸溶液涂擦在鼠尾部(图)。 4.6 孔法或剪口法：耳孔法是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号，根据打在动 物耳朵上的部位和孔的多少，来区分实验动物的方法。用打孔机在耳朵 打孔后，必须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部，以免伤口愈合过程中将 耳孔闭合。耳孔法可标记三位数之内的号码。另一种耳孔法是用剪刀在 实验动物的耳边上

11、剪缺口的方法，作为区分实验动物的标记。本设施内裸鼠采用剪耳法进行编号标记。 四.近年来中山大学和生科院的新规定等 1.中山大学：生物安全管理实施细则的颁布突发事件的紧急预案实验动物管理委员会2.生命科学学院：伦理委员会动物福利与伦理审查表动物尸体无害化处理3.生科院中药与海洋药物实验室动物实验流程图2007年12月12日通过中山大学实验室生物安全管理实施细则2008年12月中山大学生命科学学院成立实验动物伦理委员会 。广东生活环境无害处理中心集中上门收集动物尸体和其他废 弃物。操作是实验处死的动物先低温冷冻保存，待冰箱填满 后通知中心前来收取。动动 物物 实实 验验 流流 程程 图图实验动物质

12、量合格证明（生产许可证单位提供）动物实验设施使用证明（使用许可证单位提供）第三节 特殊要求的动物实验室 一. 生物危险因素设施（Bio-hazard)1.实验动物所产生的危害：抓伤/咬伤；吸入气溶胶；动物尸体污染。2.以脊椎动物为媒介和宿主的微生物病等病原体危害：微生物的致病性 ；微生物的生态变异和免疫学特征；疾病的临床症状和预后；预防治 疗和诊断的难度；疾病的生态分布。 3.转基因、克隆、重组基因等的危害：由DNA载体的不同，特别应重视 因致病性、产生毒素的能力、寄生性、定着性、致癌性、耐药性、产 生变态反应、产生扰乱物质代谢和扰乱生态体系等，造成生物危害。 二. 放（辐）射污染设施（Rad

13、io-hazard)1.GB4792-84放射卫生防护基本标准和GB8703-88辐射防护规定 2.GB11928低、中水平放射性固体废物暂时贮存规定3.GB14925-2001实验动物环境及设施三. 生物危害程度分级级:不会致病的危害（枯草杆菌、丝状虫类）级:个体危害不严重、群体传播风险及危害有限(流行性感冒等）级：个体危害严重、群体传播风险及危害低等（霍乱、结核等）级：个体危害严重、群体传播风险及危害高等(出血热等）四. 生物危害程度分级生物安全水平分级：对应相应的生物危害程度分为4级；实验室：BSL-1 BSL-2 BSL-3 BSL-4动物实验室：ABSL-1 ABSL-2 ABSL-

14、3 ABSL-4BSL-1 实验室可从事一般具有活性但对健康成人不致病、对人员和环境可能有微弱伤 害的微生物； 建筑防护：无需特殊选址；防止节肢和啮齿动物进入；每个实验室应设洗手池；台面防水、耐磨蚀；应有适当的消毒设备等； 人员防护：穿实验室外衣；手皮肤破损需要戴乳胶手套操作；必要时佩戴眼睛或防护面罩；培养物、菌种管等抛弃前进行适当消毒； BSL-2 实验室适合从事某些带有传染性或潜在传染性，但在标准操作时对工作人员不 构成伤害的微生物工作； 建筑防护：满足BSL-1的要求；建筑内应配备有高压蒸气灭菌器；配备 生 物安全柜；配备应急喷淋及洗眼设备；可以使用自然通风等； 人员防护：感染危险（免疫

15、力下降、使用免疫抑制剂或措施）人员不准进入；在生物安全柜中进行操作（易产生气溶胶等的实验）；高度警惕锐器伤及动物咬伤；穿防护衣、佩戴目镜、口罩等；处理感染动物戴双层手套等；BSL-3 实验室 适用于或类危害，使之对人或环境不产生危害； 建筑防护：满足BSL-2的要求；独立建筑物或单元；要有淋浴；进出实验室要有气锁门；负压通风，保证气流从外进入，不倒流不能在实验室内部循环；至少经一道HEPE过滤方可排放；安全柜必须一年检定一次；实验室出口处设置脚动、肘动或自动洗手池；8级抗震设计；设立压力报警装置； 人员防护：满足BSL-2的要求；实验室里必须穿背开衣或连裤衣；不能在安全柜操作时严格佩戴防护面具

16、；有感染动物实验时戴防毒面具更安全； BSL-4 实验室 从事对工作人员有极大危害和产生烈性传染病流行的微生物工作；不同于 BSL-3的特点是次级防护性能更加严密；防止传染因子外溢环境更加可靠 ； 建筑防护：满足BSL-3的要求；独立建筑或完全隔离区域；设置双屝高压灭菌器；两级污水排放消毒池；2次以上高压过滤排出；配备3级生物安全柜、正压服；设置观察室； 人员防护：满足BSL-3的要求；进入离开均需淋浴；所有进入器材均经双屝高压灭菌器或熏蒸消毒柜或气锁传入，传入时两门不能同时开启；传出的活体或材料经2级包装、表面消毒，能高压 的均需高压灭菌传出；每次实验完成后均彻底消毒、检察和维护 ；第二部分实验动物饲料与营养主