医院感染微生物学监测

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1、*省人民医院省人民医院 感染管理科感染管理科 感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义 监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险 病原体已被成功清除病原体已被成功清除 当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪器设备或系统启用时进行监测器设备或系统启用时进行监测 询证医学证据支持询证医学证据支持采样后应尽快对样品进行相应指标的检测采样后应尽快对样品进行相应指标的检测送检送检时间时间不得超过不得超过4h4h若

2、样品若样品保存保存于于0044时时送检时间送检时间不得超过不得超过24h24h采样和检查原则采样和检查原则医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准(2011)(2011)不推荐不推荐医院常规开展医院常规开展灭菌物品灭菌物品的的无菌检查无菌检查当流行病学调查怀疑医院感染事件当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查常规监督检查可不进行致病性微生物检测常规监督检查可不进行致病性微生物检测涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时或工作中怀疑微生物污染时应进行应进行目标微生物的检测目

3、标微生物的检测采样和检查原则采样和检查原则医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准(2011)(2011)采样和检查原则采样和检查原则医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准(2011)(2011)可使用经验证的可使用经验证的现场快速检测仪器现场快速检测仪器进行环境、物体表面进行环境、物体表面等等微生物污染情况微生物污染情况和和医疗器材清洁度医疗器材清洁度的监督筛查的监督筛查也可用于也可用于医院清洗效果医院清洗效果检查和检查和清洗程序的评价和验证清洗程序的评价和验证ATPATP荧光检测仪荧光检测仪医院消毒技术规范医院消毒技术规范(2011) (2011) 医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准(2011)(2011

4、)医院感染管理规范医院感染管理规范监监 测测 内内 容容 医院空气微生物学监测医院空气微生物学监测 物体表面微生物学监测物体表面微生物学监测 使用中消毒剂微生物学监测使用中消毒剂微生物学监测 医务人员手微生物学监测医务人员手微生物学监测 压力蒸汽灭菌效果生物监测压力蒸汽灭菌效果生物监测 环氧乙烷灭菌效果生物监测环氧乙烷灭菌效果生物监测 医疗器械消毒效果监测医疗器械消毒效果监测 医院治疗用水的细菌学检测医院治疗用水的细菌学检测 血液透析液内毒素监测血液透析液内毒素监测医院空气微生物学医院空气微生物学监测监测监测监测采样时间采样时间2 2、未采用洁净技术净化空气的房间（、未采用洁净技术净化空气的房

5、间（、）消毒、通风换气后消毒、通风换气后 操作前操作前1 1、采用洁净技术净化空气的房间（、采用洁净技术净化空气的房间（）洁净系统自净后洁净系统自净后 操作前操作前3 3、怀疑空气与医院感染暴发有关时怀疑空气与医院感染暴发有关时消毒后消毒后 操作前操作前监测方法监测方法沉降法沉降法重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法） 静电沉降静电沉降 热沉降热沉降浮游菌测定法浮游菌测定法撞击式空气微生物采样法撞击式空气微生物采样法 离心式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法 洗刷式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法 过滤空气微生物采样法过滤空气微生物采样法 温差空气微生物采样法温差空气微生物采样

6、法 静电或冲击空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法未采用洁净技术净化空气的房间：未采用洁净技术净化空气的房间： 平板暴露法平板暴露法室内面积室内面积30m30m2 2设内、外、中设内、外、中 对角线对角线3 3点点内、外点距离墙壁内、外点距离墙壁1m1m处处室内面积室内面积30m30m2 2设四角及中央共设四角及中央共5 5点点四角距离墙壁四角距离墙壁1m1m处处1 1、平板暴露法、平板暴露法2 2、空气采样器法、空气采样器法参照参照GB50333-2002GB50333-2002（医院洁净手术部建筑技术规范）（医院洁净手术部建筑技术规范）采用洁净技术净化空气的房间：采用洁净技术净化空气

7、的房间：手术区：手术台及其周围的区域手术区：手术台及其周围的区域级手术室级手术室 ( (手术区百级，周围千级）：手术区百级，周围千级）：手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少各外推0.9m0.9m两端至少各外推两端至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域级手术室级手术室 ( (手术区千级，周围万级）：手术区千级，周围万级）：手术台两侧边至少各外推手术台两侧边至少各外推0.6m0.6m两端至少各外推两端至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域级手术室（手术区域万级，周围十万级）：级手术室（手术区域万级，周围十万级）：手术台四边至少各外推

8、手术台四边至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域后（包括手术台）的区域级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区周围区：除去手术区以外的其他区域周围区：除去手术区以外的其他区域平板暴露法平板暴露法 局部百级局部百级 周围千级设置周围千级设置1313点点局部千级局部千级 周围万级设置周围万级设置9 9点点 局部万级局部万级 周围十万级设置周围十万级设置7 7点点局部十万级局部十万级 周围三十万级设置周围三十万级设置5 5点点? ?医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范 GB50333-2002GB50333-2002当用沉降法测定沉降

9、菌浓度时当用沉降法测定沉降菌浓度时细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数又应满足沉降菌最少培养皿数又应满足沉降菌最少培养皿数被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级别 最少培养皿数（最少培养皿数（9090，30min30min计）计）100100级级 13131000 1000级级 5 510000 10000级级 3 3100000 100000级级 2 2300000 300000级级 2 2 局部千级设置局部千级设置5 5点点 周围万级设置周围万级设置4 4点点 局部百级设置局部百级设置1313点点 周围千级设置周围千级设置6 6点点

10、局部万级设置局部万级设置3 3点点 周围十万级设置周围十万级设置2 2点点 局部十万级设置局部十万级设置2 2点点 周围三十万级设置周围三十万级设置2 2点点操作方法操作方法将平皿（直径将平皿（直径9cm9cm）放置在采样点处）放置在采样点处采样高度距离地面采样高度距离地面80-100cm80-100cm采样时将平皿盖打开、采样时将平皿盖打开、扣放扣放于平板旁于平板旁采样时，必须有采样时，必须有2 2次次空白对照空白对照 第第1 1次次对用于检测的对用于检测的培养皿或培养基条培养皿或培养基条做对比试验做对比试验 每一批做一个对照皿每一批做一个对照皿 第第2 2次次是在检测时，每区或每室是在检测

11、时，每区或每室1 1个对照皿个对照皿 对对操作试验操作试验做对照试验做对照试验 模拟操作过程模拟操作过程 但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖 两次对照试验都必须为阴性两次对照试验都必须为阴性 整个操作过程都必须无菌操作整个操作过程都必须无菌操作未采用未采用洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露5 5minmin 采用采用洁净技术净化空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露3030minmin未采用未采用洁净技术净化空气的房间洁净技术净化空气的房间 类环境类环境暴露暴露15min15min 、类类环境暴露环境暴露5min5min采用采用洁净技术净化

12、空气的房间暴露洁净技术净化空气的房间暴露3030minmin采样后盖好平皿盖子采样后盖好平皿盖子 记录采样时间记录采样时间采样平皿采样平皿6h6h内送实验室培养内送实验室培养置置361361恒温培养箱培养恒温培养箱培养48h48h计数每个平板的菌落总数计数每个平板的菌落总数若怀疑与医院感染有关时若怀疑与医院感染有关时进行目标微生物检测进行目标微生物检测平板暴露法采样平板暴露法采样注意事项注意事项：布点应尽量布点应尽量避开高效送风口正下方避开高效送风口正下方放置培养皿时放置培养皿时 应从应从最里面的房间最里面的房间或或房间的房间的最里面开始布点最里面开始布点 依次向外依次向外 最后人员撤出最后人

13、员撤出收集培养皿时收集培养皿时 从从最外面的房间最外面的房间或或房间的最外面房间的最外面开始开始 最先布的点最后收最先布的点最后收采样前采样前关闭门窗关闭门窗 无人走动无人走动的情况下的情况下 静止静止1010分钟分钟后采样后采样对检测人员的要求：对检测人员的要求：着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子 操作前洗手或手卫生操作前洗手或手卫生手臂及头部不可越过打开的培养皿上方手臂及头部不可越过打开的培养皿上方行动及放置动作要轻行动及放置动作要轻 尽量减少对空气流动状态的影响尽量减少对空气流动状态的影响每次采样人员不得超过每次采样人员不得超过2 2人人所带物品徐清洁后方可带入所带

14、物品徐清洁后方可带入结果计算结果计算奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）： 5 5分钟在分钟在100cm100cm2 2的面积上降落的细菌数的面积上降落的细菌数相当于相当于10L10L空气中所含的细菌数空气中所含的细菌数细菌数（细菌数（cfu/mcfu/m3 3)=)=50000N50000N AtAtt-t-平皿暴露于空气中的时间（分钟）平皿暴露于空气中的时间（分钟） N-N-培养后，平皿上的细菌总数培养后，平皿上的细菌总数 A-A-所用平皿的面积所用平皿的面积（20022002版消毒技术规范）版消毒技术规范）20112011年年消毒技术规范消毒技术规范平板暴露法平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：按平均每皿的菌落数报告：cfu/cfu/皿皿 暴露时间暴露时间例如：例如： 产房产房30m30m2 2放置平皿放置平皿5 5个个放置放置15min15min培养后培养后5 5个平皿共长菌落个平皿共长菌落151