《生物制药实验ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生物制药实验ppt（29页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、生物制药实验任课教师：纠敏单位：食品与生物工程学院生物工程系4-317Email：手机：13849920176实验一 胰岛素的制备 100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素 2000L培养液产生100g胰岛素 内 容n 实验目的 n 实验所用试剂n 实验仪器n 工艺路线n 实验步骤n 作业一、实验目的 n本实验的目的是熟悉并掌握以猪胰脏为原料制备胰岛素的工艺过程。二、实验所用试剂n5草酸溶液； 87乙醇溶液； 冷丙酮；n氨水； 20、6.5的醋酸锌溶液n2、10的柠檬酸溶液； 硫酸； NaCl三、实验仪器n离心机、旋转蒸发仪、电子天平、组织捣碎机、pH计、烧杯、锥形瓶、玻棒、量筒等。四、工艺路线
2、五、实验步骤n提取：猪胰脏绞碎，再加2.3-2.6倍的86%-88%乙醇和5%的草酸，提取3小时。n碱化：提取液用氨水调pH至8.0-8.4。n酸化：在5下，将碱化液用硫酸调pH至3.6-3.8。n浓缩：将上述提取液过滤取上清液，在30减压浓缩至比重为1.04-1.06为止。n去脂：将浓缩液快速加热再快速降温，过滤得去脂液。五、实验步骤n盐析：向去脂溶液中加入氯化钠调pH至2-2.5，过滤 得盐析物。n除酸性蛋白：盐析物中加入7倍量的蒸馏水溶解，再 加3倍量冷丙酮，用氨水调pH4.2-4.3，补加丙酮，使 水和丙酮的比例为7：3，搅拌后过夜，离心去除酸性蛋白沉淀。n锌沉淀：滤液用氨水调pH6.
3、2-6.4，加入3.6%醋酸锌 溶液（20%浓度），再用氨水调pH6.0，4放置过夜，收集沉淀，冷丙酮洗涤、干燥。五、实验步骤n除碱性蛋白、结晶：按干品重量计每克加冰冷的2%柠檬 酸溶液50毫升、6.5%的醋酸锌溶液2毫升、丙酮16毫升 ，用冷水稀释至100毫升，使充分溶解，冷至5以下， 用氨水调pH8.0，过滤，滤液用10%柠檬酸溶液调pH6.0 ，补加丙酮，使溶液含丙酮达16%，慢速搅拌3到5小时 ，使结晶析出，再转入5左右放置3到4天，使结晶完全，收集结晶。n洗涤、干燥：用水洗涤结晶，再用丙酮、乙醚将结晶脱 水，真空干燥后得到成品。六、作业n实验过程中有哪些关键步骤需要小心操作？n观测所
4、得产品的质与量（收率）。实验二 甲壳质的制备 内 容n 实验目的 n 实验所用试剂n 实验仪器n 工艺路线n 实验步骤n 作业一、实验目的n甲壳质（Chitin），又称甲壳素、几丁质、壳多糖等 。其在自然界中分布极广，以甲壳类、昆虫类含量较 高。近年来，甲壳质的应用越来越广泛，大量用于工 业、农业、医学、环保、生物工程等领域。其在医疗 上的主要用途：可作为缓释药物的载体、人工透析膜 、止血剂、手术缝合线等。其衍生物具有促进伤口愈 合、抗血栓等功能。目前，用于制备甲壳质的原料多 为虾、蟹壳，另外还有一些真菌（黑曲霉、猴头菇、 平菇），新疆的卤虫卵壳；更经济的来源可能是利用 霉菌发酵的残留物。n本
5、实验的目的是熟悉并掌握以蟹壳为原料制备甲壳质 的工艺方法。二、实验所用试剂n 5HCl的盐酸溶液n 3NaOH溶液n 0.5 KMnO4溶液n 1 HNO3溶液三、实验仪器n粉碎机、电炉、水浴锅、恒温箱、1000ml烧杯（耐酸、耐碱、耐腐蚀的器皿）、玻棒、500ml量筒、天平。四、工艺路线五、实验步骤n材料的准备将蟹壳洗净、烘干，并研磨至d 2 mm的粉末状n浸泡，除钙质称取干净的蟹壳25g，放置于1000ml的烧杯中，将375ml的5%的盐酸溶液缓缓地加入到烧杯中，并不断地搅拌，后室温（20）浸泡24 h，以充分除去蟹壳中的钙质。后去上清，水洗沉淀3次至中性；五、实验步骤n去蛋白加3的NaO
6、H溶液375ml于上述沉淀中，煮沸46 h或室温放置10 h，并不断搅拌，以除去蛋白质。后 去上清，并水洗沉淀3次，以除去残留的碱及蛋白质；n 氧化脱色用0.5的KMnO4溶液10ml，搅拌浸泡沉淀1 h，再 用1的HNO3溶液10 ml于6070水浴3040 min至脱色；n去上清，得白色产品，水洗，干燥即可。六、作业n实验过程中的注意事项有哪些？n观测所得产品的质（色泽）与量（收率）。实验三 人血浆白蛋白制剂 的制备 内 容n 实验目的 n 实验所用试剂n 实验仪器n 工艺路线n 实验步骤n 作业一、实验目的 n白蛋白（albumin）又称为清蛋白，约占血浆总蛋 白的65%。其主要功能为：
7、结合并传输脂肪酸、各种色素、阳离子、维生素C、各种药物（如抗生素、磺胺类等）。另外还是维持血浆胶体渗透压的主 要物质。血浆白蛋白在临床上用于失血性休克以及 脑水肿或大脑损伤所致的脑颅压增高，严重烧伤，低蛋白血症等的治疗。n本实验的目的是了解并掌握以人血浆为原料制备人 血浆白蛋白的工艺流程及方法。二、实验所用试剂n人血浆； NaHCO3溶液； n 2%的利凡诺溶液； 0.5M HCl溶液； n NaCl溶液； 灭菌水； pH试纸三、实验仪器n冷冻干燥机、水浴锅、锥形瓶、玻棒、量筒、电子天平，离心机。四、工艺路线五、实验步骤n络合（利凡诺沉淀）：量取人血浆20ml，在搅拌下加入NaHCO3调节pH
8、至8.6，加入等体积的2%的利凡诺溶液，充分搅拌后静置2-4小时，分离上清液与络和物沉淀。n解离：向络和物沉淀中加入无菌水，用0.5M HCl溶液调节pH至弱酸性，加氯化钠至0.15%-0.2%，搅拌下进行解离。n 加热去杂蛋白：充分解离后，65恒温1小时，离心分离出上清液。五、实验步骤n热处理：60，10小时，灭活病毒。n除菌、干燥：将热的处理液除菌过滤，收集滤液，即白蛋白溶液，将溶液进行冷冻干燥得到白色疏松物质。n 检验方法：外观为白色疏松物质，白蛋白含量达95%以上，水分小于1%，水溶后pH为6.6-7.2，硫酸铵残量小于0.01%，细菌学和热源检测合格。六、作业n在制备血浆白蛋白制剂的过程中，为什么要用利凡诺来沉淀蛋白而不用(NH4)2SO4来沉淀？n观测所得产品的质（色泽）与量（收率）。
