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1、-arrestin1对BV2小胶质细胞系中NLRP3炎症小体的作用答辩学生：指导老师：答辩时间：2017.06.13CONTENTS目录研究背景1研究目的2研究内容3研究结果41 1研究背景1.1 小胶质细胞背景介绍生理功能1.2 小胶质细胞与炎症小胶质细胞活化表型1.3 炎症小体背景介绍组成和激活1.4 NLRP3激活与神经退行性疾病1.5 -arrestin1背景介绍生理功能1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果1.1 小胶质细胞背景介绍生理功能神经发育免疫监测吞噬死亡神经元、凋亡细胞和髓鞘碎片促进血管再生和血管构建重构突触：修剪、剥离和重塑神经再生和轴突再生Mol Ne
2、urobiol. 2016 Nov 91. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果1.2 小胶质细胞与神经炎症小胶质细胞活化表型Prog Neurobiol. 2015 Aug;131:65-861. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果1.3 炎症小体背景介绍组成和激活炎症小体的感受器可通过自身蛋白水解作 用参与炎症小体的激活活化并募集 caspase-1核苷酸结合区域 ，调节炎症小体 寡聚化Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 20121. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果1.3 炎症小体背景介绍组成和激活nature revie
3、w, 20141. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果1.4 炎症小体与神经退行性疾病nature review, 20141. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果1.5 -arrestins背景介绍生理功能Innate Immun. 2014 Jul;20(5):451-60Genes Immun. 2015 Dec;16(8):5762 2研究目的应用BV2细胞制备LPS炎症损伤模型，研究、阐明-arrestin1对NLRP3炎症小体激活过程中的作用。3 3研究内容1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果3.1 LPS模型中-arr1的表达情
4、况CON组LPS（100 ng/ml ,6h） ATP（5mM,30min）LPS+ATP组BV2 cells吸弃上清，收集细胞蛋白 Western blotting 检测-arrestin1表达情况六孔板1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果3.2 干扰-arr1后，炎症因子分泌情况LPSLPSATPATPNC组Si-arr1组NC（LA）组Si-arr1（LA）组收集上清 qPCR检测干扰效率收集细胞蛋白 Western blotting 检测炎症相关因子： Caspase-1、IL-1、Pro-Caspase-1、Pro-IL-1 以及-arrestin1六孔板1. 研
5、究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果3.3 LDH释放法检测细胞活性LPSLPSATPATPNC组Si-arr1组NC（LA）组Si-arr1（LA）组96孔板收集上清 LDH释放法检测细胞死亡率4 4研究结果1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果4.1 BV2细胞给予LPS+ATP刺激，-arrestin1表达上调。CON LPS+ATPA-arrestin1-actin43 kD53KDBn=3，与CON组相比：*P0.05。1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果4.2 BV2细胞转染siRNA 48h，-arrestin1的干扰效率为77%
6、。n=3，与NC组相比：*P0.001 。1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果4.3 干扰BV2细胞-arrestin1，给予LPSATP 刺激后， 上清中 caspase-1和IL-1 表达显著下调。LPS+ATP 34 kD45 kD43 kD17 kD20 kDCaspase-1-actinPro-IL-1IL-1Pro-caspase-1SiRNA NC NC SiRNAAn=3，pro-IL-1的统计图，与 NC组相比，无统计学差异；与 NC（LPS+ATP）组相比无统计学 差异。BCn=3，pro-caspase-1的统计图， 与NC组相比，无统计学差异；与 NC（LPS+ATP）组相比无统计学 差异。1. 研究背景2. 研究目的3. 研究内容4. 研究结果4.4 干扰BV2细胞-arrestin1，给予LPSATP 刺激后，LDH释放减少。n=3，与CON组相比：*P0.05。 与NC（LPS+ATP）组相比：#P0.01 。-arrestin1 促进BV2小胶质细胞系中NLRP3炎症小体的激活。结果THANKS 谢谢聆听神经炎症介导了神经退行性疾病
