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1、实验五 网织红细胞计数一、试管法 【目的】 掌握网织红细胞试管法的原理及 操作方法。【原理】 网织红细胞胞质内残存少量核蛋 白体和核糖核酸(RNA)等嗜碱性物质，经煌 焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后呈蓝 色网织状或点粒状，可与完全成熟的红细 胞区别。【操作】 1加染液 2加血染色 3制备涂片 4观察 5计数 6计算 7报告方式 【注意事项】1染液质量直接影响网织红细胞计数的准确性。 煌焦油蓝染液长期普遍应用，但溶解度低，易形 成沉渣吸附于红细胞表面；新亚甲蓝对Ret染色力 强且稳定，是WHO推荐使用的染液。试剂应定期配 制，以免变质沉淀。瑞氏染液复染可使网织红细 胞数值偏低。2染色时间不能过
2、短，室温低时，可放置37 温箱或适当延长染色时间。染液与血液的比例以 11为宜。3因网织红细胞在体外仍继续成熟，其数量随 着保存时间的延长而递减，所以标本采集后应及 时处理；标本染色后也应及时测定，因染料吸附 可人为增高网织红细胞计数值。 4选择红细胞分布均匀、网织红细胞着色好的部 位计数。由于网织红细胞体积较大，故应兼顾血 片边缘和尾部。二、玻片法【目的】 掌握网织红细胞玻片法的原理及 操作方法。【原理】 网织红细胞胞质内残存少量核蛋 白体和核糖核酸(RNA)等嗜碱性物质，经煌 焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后呈蓝 色网织状或点粒状，可与完全成熟的红细 胞区别。【操作】1加染液 2加血液3制备涂片4观察5计数6计算7报告方式【注意事项】 同试管法。
