心肌酶和心肌蛋白的检测

《心肌酶和心肌蛋白的检测》由会员分享，可在线阅读，更多相关《心肌酶和心肌蛋白的检测（42页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、心肌酶和心肌蛋白检测检验科 :刘矿歌概 述 心脏是人体最重要的器官之一，它与血管组 成人体的血液循环系统。担负着氧、二氧化碳 、营养物质、中间代谢产物、激素等物质的运 输。 心血管疾病是发达国家的第一位死因。 心肌损伤是指伴心肌细胞坏死的疾病，包括急 性心肌梗死（心内膜下心肌梗死，穿透性心肌 梗死，非Q波性坏死）、不稳定性心绞痛，心 肌炎。 急性心肌梗死（AMI）是最常见的疾病之一， 且发病率呈逐年增加的趋势。因此急性心肌梗 死的早期诊断对于治疗是非常重要的。 有着1000万常住人口的武汉市急性心梗死亡率在 十万分之五点三左右，意味着平均每天就有14人 死于急性心梗 。 U.S.A.U.S.A

2、.RussiaRussiaEast EuropeEast EuropeWest EuropeWest EuropeChinaChinaIndiaIndiaAustraliaAustraliaSoutheast Asia Southeast AsiaAfricaAfrica505040403030202010100 0% of all deaths% of all deaths心血管疾病的死亡率心血管疾病的死亡率AHA Supplement 19942004美国人死亡原因分析图美国人死亡原因分析图Leading Causes of Death for All Males and Females

3、United States: 2000A Total CVDBCancer CAccidentsD Chronic Lower Respiratory Diseases EDiabetes MellitusFInfluenza and PneumoniaAHA资料动脉粥样硬化动脉粥样硬化暂时性脑缺血 (TIA)缺血性中风 严重腿部缺血不稳定心绞痛 (UA)血栓急性心肌梗死 (AMI)急性冠脉综合征 (ACS)脑血管疾病外周血管疾病 (PAD)斑块形成斑块形成稳定性心绞痛 间歇性跛行心血管疾病 : 一个连续渐进的过程一个连续渐进的过程Adapted from: Stary H.C. Circul

4、ation. 1995;92:1355-1374 Fuster V. Vasc Med. 1998;3:231-239Ross R. NEJM. 1999;340:115-126心力衰竭心肌损伤斑块心肌损伤标志物心肌损伤标志物CK/CK-MB集中在胞核、线粒体；cTn在肌浆中是细丝的一部分；Mb散在分 布肌浆中。心肌细胞心肌细胞10 理想的心肌损伤标志物条件 高敏感性和高特异性；主要或仅存在于心肌组织（ 特异），在心肌中有较高的含量，在正常血液中不 存在，可反映小范围的损伤（敏感） 能检测早期心肌损伤，且窗口期长； 能估计梗死范围大小，判断预后； 能评估溶栓效果； 检测方法简便快速； 其应用价

5、值已由临床所证实急性心肌损伤生物化学标志物一、传统的心肌酶谱二、心肌蛋白11一、传统的心肌酶谱 1、乳酸脱氢酶（LD） 及其同工酶（1） 分布 细胞的胞浆和线粒体中 H4(LD1)，MH3(LD2)， M2H2(LD3)， M3H(LD4)， M4(LD5)； 肝脏和骨骼肌所含LD以LD4和LD5为主 心脏、肾脏和红细胞所含的LD同工酶以LD1和 LD2为主 ； LD的半寿期为57 170h， 13（2）参考值总LD活性 104-245U/L同工酶 LD1 (32.74.60)%LD2 (45.13.53)%LD3 (18.52.96)% LD4 (2.900.89)%LD5 (0.850.5

6、5)%LD1 /LD2 0.450.7；（3）临床意义LDH增高主要见于AMI、充血性心衰和心肌炎；还见于病毒性肝炎、肝硬化、原发性 肝癌、梗阻性黄疸、肌肉损伤、肌萎缩、 某些恶性肿瘤（白血病，结肠癌）等 。AMI在常测酶中，LDH升高最慢（810h ），但升高时间最长（510d），峰值可 达10倍正常上限。在LDH同工酶 中LDH1 LDH2，并可持续到两周（部分病例总LDH正常）。2、肌酸激酶（CK）及其同工酶 细胞胞质 由 M和B两种亚单位组成的二聚体 CKBB(CK1)存在于脑组织中， CKMB(CK2) 和 CKMM(CK3)存在各种肌肉组织中 ； CKMB可分为MB1和MB2（为主

7、）两种异型 CK-MB占心肌总CK的l5%25%（骨骼肌中为 12%）。 CK半寿期：1012h 16（1） 分布 17 CKMB的质量检测：1985年，单克隆抗体法 ，其诊断AMI较酶法更敏感、更稳定、更快 （10 40min），且可以自动化。 CK同工酶亚型：常用高压电泳分离（快速 、敏感）（2）检测 （3）临床意义（CK及其同工酶）18较早期诊断AMI、估计梗死范围大小或再梗死 。 （1）CK-MB：CK-MB/总CK（测酶活性） 总CK100UL，CK-MB15ULCKMB6，多考虑肌肉疾病；CKMB在625%，AMI诊断可成立；CKMB25，有CKBB或巨型CK存在 。 （2）观察再

8、灌注的效果：溶栓后几小时内，CK-MB继续升高，然后下降（冲洗现象）。 19u CK-MB21.0U/L且CK-MB2/CK-MB11.5。u CK-MM3/CK-MM10.5也可作为AMI的诊断标 准之一。（3）MB2/MB1和MM3/MM2的比值升高(正常人 1)均可作为诊断AMI的标准之一。急性心肌梗死后心肌酶的时相变化对单纯性急性 心肌梗死病人 心肌酶的生理变异在应用心肌酶对AMI进行诊断时， 需考虑生理因素对检测结果的影响。 1性别：LDH在出生时为成人两倍，随着年龄增长逐渐下降， 到14岁时达成人水平。2年龄：3运动：血清CK在男性明显高于女性。 升高程度和运动量及持续时间有关，也

9、与运动者是 否经常锻炼有关，训练有素的运动员，其心肌酶升 高幅度小。 血清心肌酶的测定对急性心肌梗死的 诊断存在的不足之处： 特异性较差酶活性升高出现较晚持续时间短二 、 心肌蛋白检测肌红蛋白 心肌肌钙蛋白 脂肪酸结合蛋白23（一）肌红蛋白（myoglobin，Mb ） 生物化学特性 Mb是一种氧结合蛋白，广泛存在于各种肌肉 中（特异性不高） ，约占肌肉中所有蛋白的2 。 Mb分子量小，仅17.8kD，位于胞质中，故 AMI发生后出现较早释放入血。 CK-MB（ 84kD） LD（134kD） 当AMI病人发作后 0.5 2h即升高。512h 达高峰，18 30h恢复至正常水平。2425临床应

10、用与评价 在急性心肌梗死发作12h内诊断敏感性很高，有 利于早期诊断，是至今出现最早的急性心肌梗死 标志物。 能用于判断再灌注是否成功。 是判断再梗死的良好指标：Mb消除很快 在胸痛发作212h内，Mb阴性可排除急性心肌 梗死（ Mb的阴性预测价值为100）。Mb与碳酸酐酶联用可提高早期诊断AMI的特 异性。26（二） 心肌肌钙蛋白检测27肌钙蛋白TnC：与钙离子结合部分TnI：含抑制(ATP酶)因子部分TnT：与原肌球蛋白结合部分Tn (troponin)cTn(cardiac troponin)：为心肌细胞所特有。1. 肌钙蛋白(Tn)的特性 Troponin T (39.7 kD) 连接

11、肌钙蛋白复合物至原肌球蛋白细丝 Troponin C (18 kD) 结合钙离子使肌肉收缩 Troponin I (22.5 kD) 在静止状态抑制收缩肌钙蛋白 (Troponin，Tn) 2. 检测方法 通过cTn的特异性单克隆抗体利用化学发光及电 化学发光的方法进行定量检测 利用单克隆抗体制备的免疫层析法进行定性检测293.cTnT的临床意义 30 用于AMI的诊断，发生6h后，敏感性达90以上（ 可达5天以上）； 应用cTnT对不稳定心绞痛病人监测可以发现一些轻 度和小范围心肌损伤； cTnT还可用于评估溶栓疗法的成功与否，观察冠状 动脉是否复通； （双峰的出现） cTnT与CK-MB均

12、常用于判断急性心肌梗死大小； 对于心肌炎、不稳定性心绞痛诊断，cTnT是比CK- MB敏感。 评估肾功能衰竭透析者的预后 升高者预后差4.cTnI的临床意义 cTnI是一个十分敏感和特异的AMI标志物，心 肌损伤后46h释放入血； 和cTnT一样，cTnI可用于溶栓后再灌注的判断 ， cTnI可敏感地测出小灶性可逆性心肌损伤存在： 不稳定心绞痛和非Q 波MI。 31目前检测的cTnI多以复合物形式存在 ：在AMI中90是 cTnIcTnC复合物，5的 cTnIcTnT。 比cTnT具有更高的心肌特异性32心梗发作后cTn、CK、Mb的诊断敏感度 敏 感 性cTnCKMb症状发作后时间(小时)3

13、3心梗后灌注成功与未再灌注病例cTnT的变化 未再灌注灌注成功5.心肌肌钙蛋白的评价（优点） cTn的敏感度及检测特异性均高于CK，而且能检测 微小损伤（如UA、心肌炎）； 有较长的窗口期，有利于诊断迟到的AMI、UA和心 肌炎的一过性损伤（ cTnT长达7天，cTnI长达10天 ，甚至14天）； 双峰的出现，易于判断再灌注成功与否； 与心肌损伤范围大小相关，可用于判断病情轻重， 指导正确治疗； 胸痛发作6h后，血cTn浓度正常可排除AMI。 34符合理想的心肌损伤的标志物条件35（三）脂肪酸结合蛋白（FABP） FABP是小分子量(14 l5kD)胞浆蛋白，心肌 内FABP含量（0.46mg

14、/g心肌,）比骨骼肌组 织内丰富许多。 FABP诊断早期AMI的敏感性和特异性和Mb 相近，比CK-MB高。 36糖原磷酸化酶 （GP） 三种同工酶：脑和心脏的GPBB，骨骼肌的GPMM和 肝脏的GPLL。 心肌缺氧、缺血时，处于糖原糖酵解状态，GPBB随糖 原降解加速进入胞浆，透过胞膜进入循环。 GPBB被认为是诊断心肌缺血的最为敏感指标之一。 在急性心肌梗死时，GPBB在胸痛24h开始升高，它 的特异性与CK-MB相似。 小 结心肌损伤标志物心肌损伤标志物 早期标志物：即急性心肌梗死发生6h内 血中即相对增加如：Mb MB2/MB1。 确诊标志物：即在急性心肌梗死发生后6 12h血中浓度增加，对心肌损伤有高的 敏感性和特异性，在发作后数天仍异常。 心肌钙蛋白（指CTNT或CTNL）是当前最 好的确诊急性心肌梗死的标志物。 排除标志物: 可作为排除标志物 的有Mb CTNT和CTNI Mb在症状出现早期 为阴性一般可排除AMI，但症状出现晚期 Mb阴性不能排除AMI，同样，中晚期CTNT 和CTNI不升高也不能完全排除AMI。*42