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1、临床尿液、粪便检验及 微生物标本处理泰州市人民医院韩俊岭尿液常规检验一、标本的采集尿常规标本可采集晨尿、二次晨尿、随机尿；容器、尿量，病人留尿前的准备；采集后2小时内完成常规检验。二、尿液的干化学检测（二）、尿液分析仪试剂带多联试带是将多种检测项目的试剂块，按一定间隔、顺序固定在 同一条带上的试带。使用多联试带，进入一次尿液可同时测定多个 项目。 采用多层膜结构： 第一层：尼龙膜保护作用，防止大分子物质对反应的污染；尿液常规检验4支持层吸水层碘酸盐层过滤层透明膜试剂层试带的多层膜结构2、尿液的干化学检测反应层尿液常规检验5尿试带的多层膜结构 过滤层：尼龙膜，起保护作用，防止大分子物质对反应的
2、影响 反应层：绒制品，包括过碘酸盐区（有的无此区）和试剂 区，过碘酸盐区可破坏VitC的干扰；试剂区含有试剂成分主 要与所测物质发生反应，产生颜色反应。 吸水层：可使尿液均匀快速深入，并能抑制尿液流到相 邻反应区。 支持层：不被尿液浸润的塑料片做支持层。空白块：用于消除尿自身颜色在试剂块上产生颜色的干扰。尿液常规检验1检测项目 尿液的酸碱度（pH）、比密（SG）、蛋白质（PRO）、葡萄糖 （GLU）、酮体（KET）、胆红素（BIL）、尿胆原（URO）、 亚硝酸盐（NIT）、白细胞（LEU）、隐血（BLD）、维生素C（ Vit C），一个或多个检测内容可组成不同的组合。2试带反应原理酸碱度（pH
3、）：采用pH指示剂法。用甲基红（pH4.66.2 ）和溴麝香草酚蓝（pH6.07.8）两种指示剂适量组合成为复 合pH试剂模块，其呈色范围为pH4.59.0，颜色发生橙红、黄 绿及蓝色变化。尿液常规检验比密（SG）：采用离子交换pH指示剂法。尿液中电解 质释放出的阳离子与试带中的离子交换体中的H交换，释 放出的H与酸碱指示剂反应，根据指示剂显示的颜色（蓝 、绿、黄）可换算尿液中的电解质浓度，以电解质浓度来 代表密度，从而得出比密值。尿蛋白（PRO）：采用 pH指示剂蛋白误差法。试剂模 块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和表面 活性剂。在Ph3.2时，溴酚蓝电离、带负电荷并释放H,带
4、负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质（白蛋白）生成 复合物，导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H，当超过缓 冲范围时，指示剂发生颜色改变（黄、绿、蓝），变色程 度与蛋白质含量成正比。尿液常规检验尿葡萄糖（GLU）：采用葡萄糖氧化酶法。尿液中葡萄 糖在试带中葡萄糖氧化酶的催化下，生成葡萄糖酸内酯和 过氧化氢。在有过氧化物酶的情况下，以过氧化氢为电子 受体使色素原（邻甲联苯胺、碘化钾等）氧化而呈色。色 素原不同，呈色可为蓝色、红褐色或红色。尿酮体（KET）：采用亚硝基铁氰化钠法。检测尿酮体 的模块中主要含有亚硝基铁氰化钠，可与尿液中的乙酰乙 酸、丙酮产生紫色反应。其对乙酰乙酸的敏感性为50 100mg
5、/L，对丙酮为400700mg/L，不与-羟丁酸起反应 。尿液常规检验尿亚硝酸盐（NIT）：采用偶氮法。尿液中含有来自 食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，如尿液中含有大肠埃希 菌等具硝酸盐还原酶的细菌时，可将硝酸盐还原为亚硝酸 盐，亚硝酸盐与芳香胺的重氮反应形成重氮盐，随后发生 偶联反应，形成红色重氮色素。尿白细胞（LEU）：采用中性粒细胞酯酶法。中性粒细胞 的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和有机酸，吲哚酚可进 一步氧化形成靛蓝，或吲哚酚和重氮盐反应生成紫色重氮 色素。尿液常规检验尿胆原（URO）：采用醛化反应法：在强酸条件下尿胆原和对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应，生成樱红色缩合 物。偶氮法：在强酸
6、条件下尿胆原和对-四氧基苯重氮 四氟化硼发生重氮盐偶联反应，生成胭脂红色化合物。尿胆红素（BIL）：采用偶氮法。在强酸性介质中，胆红 素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作用，生成红色偶氮 化合物。尿液常规检验 尿隐血（BLD）：采用过氧化物酶法。血红蛋白中亚铁血红素具有弱的过氧化物酶样作用，以催化H2O2作为电子 受体使色原（常用的有邻联甲苯胺、氨基比林、联苯胺等 ）氧化呈蓝绿色，其颜色的深浅与血红蛋白成正比。 尿维生素C（VitC）：采用还原法。试剂模块中含有2 ，6-二氯酚靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢钠和磷酸 氢二钠，维生素C能还原氧化型染料，而使指示剂发生由 绿或深蓝至粉红色的颜色变化
7、，颜色的深浅与VitC含量成 正比。也有采用VitC和作为色素原的磷钼酸反应，形成钼 蓝的原理。尿液常规检验12尿试纸法的项目和反应原理项 目 代号 反应原理 试剂主要成分酸碱度 pH pH指示剂 甲基红、溴麝香草酚蓝蛋白质 PRO 指示剂的蛋白质误差法 溴酚蓝、枸橼酸钠、表面活性剂葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶 葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原受体隐血 BLD Hb类过氧化酶法 过氧化氢茴香素或过氧化氢枯烯、色原受体胆红素 BIL 偶氮反应法 2, 4-二氯苯胺重氮盐尿胆原 URO 醛反应法 对二甲氨基苯甲醛或对甲氧基苯重四氟化硼酮体 KET 亚硝基铁氰化钠法 亚硝基铁氰化钠亚硝酸盐 NIT 亚
8、硝酸盐还原法 氨基苯砷酸、1,2,3,4-四氢并喹啉-3酚白细胞 LEU 酯酶法 吲哚酚酯、重氮盐比密 SG 多聚电解质离子解离法 甲氧乙烯顺丁烯二酸、溴麝香草酚蓝抗坏血酸 VitC 吲哚酚法 2,6-二氯酚靛酚钠 尿液常规检验【操作】1混匀尿液 2浸湿试带 3沥去多余尿液4比色与分析5报告方式 尿液常规检验【注意事项】1熟悉试带特性 必须了解所用试带各膜块反应原理、药物干扰以及参考范围等，掌握试带检测每一成分的 敏感度和特异性。很多中间环节和干扰因素都可影响颜色变 化而导致假阳性或假阴性。同一检测项目，不同厂家所用的 色素原可能不同，因此存在显色差别2注意试带保存条件 尿试带应根据厂家推荐的
9、条件（如 温度、暗处等）保存，在有效期内使用。不应将试带放在直 射光下照射或暴露在潮湿环境中，应保存在厂商提供的容器 中，不可更换保存容器。尿液常规检验3规范操作 （1）试带从冷藏冰箱中拿出后，待平衡至室温再 打开盛装的筒盖。一次只取所需要量的试带，并 应立即将瓶盖盖好。多余试带不得放回原容器中 ，更不应该合并各瓶的试带。（2）试带与尿液的反应时间需严格遵循产品说明 书的规定，操作中注意切勿触摸试带上的反应检 测模块。（3）试带浸入尿液标本的时间应在12s，所有试 剂模块，包括空白和参比模块，要全部渗入尿液 中，试带上过多的尿液标本应去除干净。尿液常规检验4、室内质控 试带法检测应至少使用阴性
10、和阳性质控品 进行室内质控，每工作日至少检测1次。 结果偏差不超过1个等级，且阴性不可为阳 性，阳性不可为阴性。 应制定程序对失控进行分析并采取相应的 措施，应检查失控对之前患者样品检测结 果的影响。尿液常规检验尿液常规检验尿液常规检验尿液常规检验镜检标准: 1、泌尿道疾病、肾病、糖尿病、应用免疫抑制剂和 妊娠者尿标本必须镜检。 2、尿标本外观、浊度不正常必须镜检。 3、同时满足以下5项条件：尿标本外观、浊度正 常；白细胞酯酶结果为阴性；亚硝酸盐结果 为阴性；尿蛋白结果为阴性；隐血（血红蛋 白或红细胞）结果为阴性，可不镜检。否则必须 进行镜检复核。三、尿沉渣显微镜检查尿液常规检验尿沉渣的检测方
11、法： 1、直接镜检法：又称混匀一滴尿法 2、自然沉降法：尿液置室温下一定时间(15-30min)， 移去上层尿液，余0.2mL左右，混匀镜检。 3、离心镜检法：尿液经一定转速一定时间离心后， 移去上层尿液，余0.2ml，混匀镜检。 4、染色法：常用结晶紫沙黄法（Sternheimer- Malbin，S-M）对尿沉渣中的有形成份进行染色后 镜检，提高尿沉渣的识别率和检出率。 5、尿沉渣计数板法：取10ml尿液于离心管内，在规 定时间和转速下离心，移去上层尿液，取尿沉渣混尿液常规检验匀后滴入计数板内，显微镜下计数，换算成一定体 积内尿有形成份的含量。 6、尿沉渣分析仪法：综合应用电阻抗法和流式细
12、胞 术，定量检测非离心尿中的有形成份。尿液常规检验 方法学评价： 1、尿沉渣显微镜检查 直接镜检法：简便易行费用低，但阳性率低， 重复性差，易漏诊。一般用于门诊筛查、健康体 检或有明显血尿脓尿患者。 离心法：相对于直接镜检法敏感、阳性率高， 为我国临床常用的尿沉渣检查方法，并已制定了 相关标准化操作规程。缺点是操作繁琐耗时，对 门诊量大的医院做为常规项目检查劳动强度大。 尿沉渣计数板法：由于使用了标准化的定量计 数板，使尿沉渣检查更符合标准化要求，更为定 量和有比较性。尿液常规检验粪便检查the examination of feces/stool粪 便 组 成是水 是固体未消化的 食物消化道
13、分泌物 和有形成分食物分解 产物细菌 占干 重1/3固体 成分检查的主要目的1.了解消化道以及消化器官是否有炎症、出血和 寄生虫感染等情况; 2.OB试验作为消化道肿瘤的过筛试验; 3.根据粪便的性状和组成，了解消化状况，借以 粗略判断胰腺外分泌功能; 4.检查粪便中有无致病菌以防治肠道传染病。第一节 标本采集一、标本的采集 采用自然排出的粪便 无粪便排出而又必须检查肛门指诊或采便管采集标本。标本采集注意事项 1标本容器 带盖、干净、干燥、无渗漏、无吸水性 细菌学检查：灭菌容器 2标本的采集量 常规性检查：约5g粪便 集卵检查和血吸虫毛蚴孵化：约30g粪便 3标本的采集部位 含粘液、脓血等异常
14、成分 从粪便的表面不同部位，深处及粪端多处取材4标本的送检时间 随送随检，1h内检查完毕 阿米巴滋养体：立即检查，标本保温 5检查蛲虫卵 透明薄膜拭子/棉拭子:晚12时或清晨 排便前自肛门周围皱裂处拭取，立即 镜检。 6检查寄生虫虫体及虫卵计数 采集24小时粪便7粪胆原定量检查 连续采集3天粪便，每天约取20g送检 8脂肪定量检查 脂肪膳食 50150g/日，连服6天，第3天 开始收集72h内的粪便，混合称重，取约 60g送检 9隐血试验化学法 素食三天，禁服VitC及铁剂等干扰试验的 药品 10灌肠或服油类泻剂的粪便 不适合作检查标本 第二节 粪便理学检验一、量 二、性状 三、颜色 四、气味
15、 五、寄生虫一、量 粪便量的多少与人体的进食量、食物的种 类及消化器官的功能状态有直接的关系。 进食粗粮及含纤维素较多的食物：粪便量相对 较多；反之，则相对较少。 健康成人每日排便一次，粪便量约100300g。 病理情况：粪便的量、排便次数和性状等可不 同程度改变。二、性状 正常成人粪便： 黄色或棕黄色，质软，成形便 婴儿粪便： 黄色或金黄色糊状便。粪便异常性状及可能原因1粪便性状可能机制常见原因 球状硬块便粪便在肠内停留过久 ，水分吸收过多便秘患者、老年人、经产妇排便无 力者和儿童巨结肠症粘液便 肠道受刺激、炎症或 过敏反应各种肠炎、细菌性痢疾、阿米巴痢 疾和急性血吸虫病等鲜血便下消化道出血肛裂、痔疮、直肠息肉、直肠癌及 结肠癌等脓便及
