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1、医学实验动物学 实验课实验一 大、小鼠的给药、采血、麻醉和解剖实验目的n1.掌握大小鼠常用给药方法和采血技术n2.掌握大小鼠的麻醉方法和解剖步骤n3.熟悉大小鼠的解剖 结构 小鼠的抓取和固定n注意点n抓取小鼠时动作要迅速，要轻n防止被小鼠转过头咬，抓其颈后皮肤要多n如果被咬，应立即挤出血液，清水冲洗大鼠的抓取与固定小鼠灌胃（给药方法之一）n将实验小鼠徒手固定n灌胃针从嘴角处插入口腔内，紧贴咽 后壁插入食道（1ml注射器，深度大 约为3cm）n推动针管给药（生理盐水）n注意不要插入气管，不要抓的太紧以 致小鼠窒息死亡小鼠尾静脉注射（给药方法之二）n固定器固定小鼠n消毒尾部，扩张血管，左右两侧的静
2、脉n将尾巴成一个适宜注射的角度，1ml注射器 平行向心方向刺入静脉血管n干棉球压迫止血n注意排除气泡n注射点由尾部远端尾静脉小鼠眼底静脉丛采血n一人徒手固定小鼠于桌面上，使眼球充 分向外突出n将注射器针头从内眼角位置插入眼球和 眼眶之间，进针约0.5cm（1ml注射器）n另一人慢慢抽动针管采血n注意要将小鼠固定好，防止其头动小鼠麻醉方法n腹腔麻醉：进针点为右下腹腔，进针角 度为与身体成45度，深度约1cm。n麻药：麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量按 小鼠体重0.1ml/10g，20g的小鼠为0.2ml小鼠心脏采血n右下腹腔麻醉（麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量 按0.1ml/10g)n待其麻醉后，
3、仰卧位固定在解剖板上n胸骨左侧，腋窝平行线下2-3肋骨间，小鼠心 搏动最强处斜行刺入（1ml注射器）n缓慢抽动针管采血n取血量多时采用（同样适用于大鼠）大鼠心脏采血n麻醉：右下腹腔，麻醉药为3 3.5%水合氯醛， 剂量按大鼠体重0.1ml/10g，n心脏采血方法同小鼠大鼠心脏采血大体解剖观察及绘图1. 将SD大鼠用3 3.5%水合氯醛腹腔麻醉，按 0.1ml/10g体重。 2 . 待大鼠麻醉后，腹部朝上固定于解剖板。 3. 用10cm剪刀从下腹部向上剪开皮肤，打开 腹腔，观察腹腔内脏器，观察大鼠肝脏时特别 注意大鼠无胆囊。 4. 用14cm剪刀打开胸腔，观察胸腔脏器。 5. 根据大体解剖所见，
4、绘图。解剖观察操作项目n小鼠：灌胃、尾静脉注射、眼底静 脉丛采血n大鼠：心脏采血*、麻醉后解剖观察实验二1.模拟肿瘤（组织块）移植2.裸鼠与正常小鼠免疫器官的比较实验目的n了解实验裸小鼠和KM鼠的胸腔结构n了解正常的胸腺结构与不增殖胸腺基的形态n掌握正确的胸腺摘除方式n掌握组织块皮下移植的基本技术实验原理哺乳动物的胸腺是T淋巴细胞分化成熟的场所，而T 淋巴细胞是参与宿主对异体的组织或细胞排斥的主要 成分，裸鼠胸腺的原基从第三咽囊起不能发育，因此 ，裸鼠囊状很小的胸腺残基保持终身。胸腺的不增殖导致成熟的T淋巴细胞数大量减少，其 结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间的组织器 官移植。人类的肿瘤能
5、在裸鼠的体内生长，使裸鼠作为一种 疾病模型的载体，广泛地运用于研究人类移植性肿瘤 生长和转移。影响被移植的动物组织或细胞成活的因素组织的相容性宿主对移植物的血供供体组织或细胞的活性其他因素模拟移植物的选择n肾脏组织是哺乳动物中血供较好、活力 较强的组织实验步骤 1 (麻醉解剖小鼠）n分别将裸鼠和KM鼠腹腔注射3.5%水合氯醛，按 0.1ml/10g体重。n待小鼠麻醉后，腹部朝上固定于小鼠固定板上 。n以3%碘酒棉球和75%酒精棉球进行皮肤消毒； 同时，对裸鼠腋部进行消毒。n用直头剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口，沿 腹部两侧作弧型切开，直至胸膈肌根部。实验步骤 2(观察胸腺)n观察膈肌形状后，
6、于两侧根部分别切一 小口，将膈肌横向切开，绞断肋骨，直 至锁骨，然后掀起胸骨，暴露整个胸腔 。n直视心脏，在心脏的上部，主动脉弓处 ，有两片乳白色蝴蝶状的小片，即为胸 腺。实验步骤 3（取肾脏组织）n用圆头镊将肠道拨向对侧，暴露肾脏。n用眼科剪刀取下肾脏，剥去肾包膜，放 入盛有生理盐水的培养皿中。n用剪刀将肾脏分解为若干2*3mm组织小块 ，取边缘整齐、色泽红润为佳。n将一小块肾组织放入套筒针内备用。实验步骤 4（组织移植）n选取组织的目标区域，常用区域为肋侧 （近腋窝处 ）。n在离目标区域中心点1-2cm处，用眼科小 剪刀作一2-3mm切口。n用套筒针在切口处刺入皮下直至目标中 心区域，将组织块推入，并迅速拔出。实验步骤 5n麻醉、解剖裸鼠，与KM鼠比较胸腺的区 别n裸鼠胸腺只剩残基，基本上看不到实验报告要求:n完成实验指导上第3、13、16页三份实验 报告n在实验报告的实验结果一项中完成小鼠 解剖图、大鼠解剖图注意事项:n实验时请不要戏弄动物、防止被动 物咬伤，防止动物逃逸n实验结束后请把器械清洗干净，整 理齐全
