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1、主要实验仪器设备的使用与维护天津市动物疫病预防控制中心 李颖一、光学显微镜 (一)光学显微镜的分类 (二) 显微镜的光学技术参数 (三) 显微镜的光学部件 (四) 操作程序 (五) 注意事项 (六) 仪器维护(一)光学显微镜的分类 光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视 野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒 置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜、万 能研究用显微镜等10多种，其用途各有侧 重。 普通光学显微镜主要供常规检验、教学， 用于观察切片、涂片等。 对于光学显微镜，首先要认识其构造及各部 件的功能，同时要掌握正确的调试、使用和 维护方法，才能在实际应用中面对各种要求 采用不同的显微镜检方法，充
2、分发挥显微镜 应有的功能，提高常规检验工作效率，同时 又能获得明确的结果。(二)显微镜的光学技术参数显微镜的光学技术参数包括： 数值孔径、分辨率、放大率、焦深、视场 宽度、覆盖差、工作距离和图象亮度与视 场亮度等。(三)显微镜的光学部件 显微镜的光学部件包括物镜、目镜、聚光 镜及照明装置几个部分。 各光学部件都直接决定和影响光学性能的 优劣。 1物镜 物镜是显微镜的核心光学部件，显微镜的 放大率、分辨率、色差与象差的校正状况 、工作距离等，都直接由物镜来决定，是 衡量一台显微镜质量的首要标准。 根据物镜放大率的高低，原则上可将物镜 分为： 低倍物镜：1X-6X，NA 0.040.15； 中倍物
3、镜：6X-25X，NA 0.150.40； 高倍物镜：25X-63X，NA 0.350.95； 油浸物镜：90X-100X，NA 1.251.40。2目镜目镜的作用是把物镜放大的图象(中间象) 再放大一次，并把物象映入观察者的眼中 ，实质上目镜就是一个放大镜。因为显微 镜的分辨能力是由物镜的数值孔径所决定 的，而目镜只是起放大作用。因此，对于 物镜不能分辨出的细微结构，目镜放得再 大，也仍然不能分辨出来。3聚光镜聚光镜又名聚光器，装在载物台的下方 。小型的显微镜往往无聚光镜，在使用数 值孔径0.40(约20X)以上的物镜时，则必须具 有聚光镜。聚光镜不仅可弥补光量的不足 和适当改变从光源射来的
4、光线性质，而且 可将光线聚焦在被检物体上，以得到最强 的照明光线。（四） 操作程序1 使用时要把显微镜放在座前桌面上稍偏左的位置 ，镜座应距桌沿 67 cm左右。 2 打开光源开关，调节光强到合适大小。 3 转动物镜转换器，使低倍镜头正对载物台上的通 光孔。先把镜头调节至距载物台12cm左右处， 然后用左眼注视目镜内，接着调节聚光器的高度 ，把孔径光阑调至最大，使光线通过聚光器入射 到镜筒内，这时视野内呈明亮的状态。 4 将所要观察的玻片放在载物台上，使玻片中 被观察的部分位于通光孔的正中央，然后用标 本夹夹好载玻片。 5 先用低倍镜观察（物镜10X、目镜10x）。观 察之前，先转动粗动调焦手
5、轮，使载物台上升 ，物镜逐渐接近玻片。需要注意，不能使物镜 触及玻片，以防镜头将玻片压碎。然后，左眼 注视目镜内，同时右眼不要闭合（要养成睁开 双眼用显微镜进行观察的习惯，以便在观察的 同时能用右眼看着绘图），并转动粗动调焦手 轮，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中 材料的放大物像。 6 如果在视野内看到的物像不符合实验要求（物 像偏离视野），可慢慢调节载物台移动手柄。调 节时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物像 移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以 调节微动调焦手轮，直至物像清晰为止。 7 如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍 物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视 野中央
6、（将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视 野中的物像范围缩小了很多）。一般具有正常功 能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在 用低倍物镜观察清晰时，换高倍物镜应可以见到 物像，但物像不一定很清晰，可以转动微动调焦 手轮进行调节。 8在转换高倍物镜并且看清物像之后，根据需要 调节孔径光阑的大小或聚光器的高低，使光线 符合要求（一般将低倍物镜换成高倍物镜观察 时，视野要稍变暗一些，所以需要调节光线强 弱）。9 若使用油镜时，先加香柏油一滴于标本上，眼睛 从侧面注视物镜，将镜筒慢慢下降直到油镜浸入 油内，几乎与标本接触，然后再调动微动调焦手 轮直到物象清晰为止。 10 使用完毕后，关闭电源。先将物镜
7、镜头从通光 孔处移开，或把物镜转成“八”字形，再将载物台缓 缓落下，并下降集光镜，检查零件有无损伤，同 时要注意检查物镜是否沾水沾油，如沾了水或油 要用镜头纸擦净。（五） 注意事项 1 必须熟练掌握并严格执行使用规程。 2 取送显微镜时一定要一手握住弯臂，另 一手托住底座。显微镜不能倾斜，以免目 镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿 轻放。 3 观察时，不能随便移动显微镜的位置。 4 凡是显微镜的光学部分，只能用特殊的擦 镜头纸擦拭，不能乱用他物擦拭，更不能用 手指触摸透镜，以免汗液玷污透镜。不得用 酸、碱、氯仿、酒精、乙醚等能损坏机件的 溶剂擦洗显微镜。 5 保持显微镜的清洁，避免灰尘、水及
8、化学 试剂的玷污。6 显微镜放在干燥的地方，以防潮湿生霉， 并应避免直射日光曝晒。 7 转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，只 能转动转换器。 8 切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋 钮时，用力要轻，转动要慢，转不动时不 要硬转。9 不得任意拆卸显微镜上的零件，严禁随意 拆卸物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或 螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。 10 使用高倍物镜时，勿用粗动调焦手轮调节 焦距，以免移动距离过大，损伤物镜和玻 片。 11 使用完毕后，必须检查物镜镜头上是否沾 有水或试剂，如有则要擦拭干净，并且要 把载物台擦拭干净。（六 ） 仪器维护 1 显微镜长时间不使用时，应放入箱内或用 防
9、尘布覆盖。 2 除了每次使用完毕后所进行的日常维护外 ，每个月用毛刷或软布去除镜架和载物台上 的灰尘，并记录维护情况。二、离心机(一)离心机的用途和分类 (二)离心的原理 (三)离心机的使用和维护(一)离心机的用途和分类 离心机是借离心力分离液相非均一体系的设备 。可根据物质的沉降系数、质量、密度等的不 同，应用强大的离心力使物质分离、浓缩和提 纯。 离心机的种类繁多，一般实验室常见以下几种 ： 普通离心机：分台式或落地式，一般为中、低 速(转速小于6000RPM)，无冷冻功能，因此， 只适宜对温度要求不严格样品的中、低速离心 。 冷冻离心机：根据转速(或离心力)的高低，可 分为高速冷冻离心机
10、(转速一般小于20000RPM) 和超速冷冻离心机(转速大于20000RPM)。(二)离心的原理 当含有细小颗粒的悬浮液静止不动时，由于 重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。 离心就是利用离心机转头高速旋转产生的强 大离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把 样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离 开。(三)离心机的使用和维护 各种型号离心机操作稍有不同，这里主要 强调样品的装载和平衡。由于离心时产生 很大的离心力，当转头所带的样品处于不 平衡状态时，会产生很大的力矩。轻者引 起机器发抖和震动，重者会扭断转轴造成 事故。 离心管至少要两两平衡，放在转头的对称 位置。 在平衡时不仅要保证静平衡，即对
11、称的两 管样品等重，还要保证动平衡。因为离心 时产生的力矩不仅与样品的重量有关，还 和样品的旋转半径有关。以TDL-60B型低速台式离心机的操作为例1 操作程序 1.1 将仪器接上电源后，打开仪器后面的电源开关，此时数码管显示 的“0000”，表示仪器已接通电源。 1.2 将样品等量放置在试管内，并将其对称放入转头。 1.3 盖好盖门。 1.4 调整仪器的性能参数（运行时间和运行速度）：按功能键，使相 应的指示灯亮，数码管即显示该参数值，此时可用“ ”和“”及“”键 相结合调整该参数至需要的值，并按记忆键确认贮存。 1.5 按开键启动仪器。仪器运行过程中数码管显示转速，当需要查看 其他参数时，
12、可按功能键，使该参数对应的指示灯亮，数码管即显示 该参数值。当仪器运行完所设定的时间后或中途停机，停机过程中数 码管闪烁显示转速，属正常现象。 1.6 使用完毕，使用者应记录使用时间和转子转速，并签字等。以TDL-60B型低速台式离心机的操作为例2 操作注意事项 2.1 为确保安全和离心效果，仪器必须放置在坚固水平的台面上，工程 塑料盖门上不得放置任何物品；样品必须对称放置。 2.2 应经常检查转头及实验用的离心管是否有裂纹、老化等现象，如有 就应及时更换。 2.3 实验完毕后，需将仪器擦拭干净，以防腐蚀。 2.4如样品比重超过1.2 g/cm3，最高转速n需按下式计算：n = nMax （注
13、：nMAX =转子极限转速） 2.5 当电机碳刷长度小于6mm时，必须及时更换。 2.6 在离心机未停稳的情况下不得打开盖门。 2.7 仪器必须有可靠接地。 2.8 实验结束后，请关闭后面的电源开关，拔掉电源插头。 3 仪器维护 3.1 离心室的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应 经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清 洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转子旋下，再用中性去污剂（70%的异丙醇/水混合 物或乙醇）清洁离心室；离心室内的橡胶密封圈经去污 剂处理后，用水冲洗，再用甘油润滑。 3.2 例行性保养：先用水清洗转子，再用蒸馏水洗净。 最后，用较柔软的布擦拭水
14、滴，且将转子颠倒干燥，干 燥后转子表面涂抹润滑油，放于干燥处。 3.3 使用腐蚀性样品后，用水冲洗转子一会，并做例行 性保养。 3.4 如果有异物黏着在转子上，应将转子浸在温水(40 50C)中，用清洁棒或软刷子去除异物。三、培养箱 (一)培养箱的用途和原理 (二) 培养箱使用和维护(一)培养箱的用途和原理 培养箱是培养微生物的主要设备，可用于 细菌、细胞的培养繁殖。 原理是应用人工的方法在培养箱内造成微 生物和细胞生长繁殖的人工环境，如控制 一定的温度、湿度、气体等。(二)培养箱使用和维护 以DHP-9082、9162型电热恒温培养箱为例 。1 操作程序1.1 操作人员需仔细阅读使用说明书，
15、了解、熟悉培养箱之后 ，才能操作。 1.2 接通电源：将三芯电源插头插入电源插座，将控制面板上 的电源开关处在“1”的位置，温度控制器出现数字显示（PV为测 量温度，SV为设定温度），表示设备进入工作状态。左边cold 黄灯亮，表示风机在高速状态下工作。 1.3 温度设置： 1.3.1 按“SET”键一下，仪表进入设定方式，此时SV窗口右边的 第一位高亮，其他位闪烁。 1.3.2 按移位键将高亮移至需设定位。 1.3.3 按加键或减键直到将数字设定至所需值。 1.3.4 按“SET”键二下，设定结束（注意：按SET键一下，PV屏显 示T1为定时功能，当T1=0时，定时功能不启动）。PV为箱内测 量温度，SV为新设定的温度。 1.3.5 如设定温度为37，加热指示灯亮，开始进入加 热升温状态，过一段时间，当显示温度接近设定温度时 ，加热指示灯忽亮忽熄，反复多次，一般情况下，加热90min后温度控制进入恒温状态。 1.3.6 所需工作温度较低时（即设定温度接近RT+5） ，可采用二次设定方式，如所需工作温度为37，第一 次先设定35，等温度过冲开始回落后，再第二次设定 37，这样可降低甚至杜绝温度过冲现象，尽快进入恒 温状态。 1.3.7 当培养箱进入PV=SV+cold时，风机会由快转自动 改慢转（此时左边
