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1、百合的组织培养种子生产与经营11001班 制作人：闫重阳百合花的简介 种类：百合科属多年生草本鳞茎植物 原产地：澳洲 它是著名的球根花卉 主要分布在北半球的温带和寒带地区，少数种类 分布在热带高海拔地区。 形态特征 多年生球根草本花卉，株高4060cm，还有高达1m以上 的。茎直立，不分枝，草绿色 茎秆基部带红色或紫褐色斑点。 地下具鳞茎，鳞茎由阔卵形或披针形，白色或淡黄色， 直径由68cm的肉质鳞片抱合成球形，外有膜质层。多数须 根生于球基部。单叶，互生，狭线形，无叶柄，直接包生于 茎秆上，叶脉平行。有的品种在叶腋间生出紫色或绿色颗粒 状珠芽，其珠芽可繁殖成小植株。花着生于茎秆顶端，呈总 状
2、花序，簇生或单生，花冠较大，花筒较长，呈漏斗形喇叭 状，六裂无萼片，因茎秆纤细，花朵大，开放时常下垂或平 伸；花色，因品种不同而色彩多样，多为黄色、白色、粉红 、橙红，有的具紫色或黑色斑点，也有一朵花具多种颜色的 ，极美丽。花瓣有平展的，有向外翻卷的，故有“卷丹”美名 。有的花味浓香，故有“麝香百合”之称。花落结长椭圆形蒴 果。 生 长 习 性 性喜湿润、光照、要求肥沃、富含腐 殖质、土层深厚、排水性极为良好的砂 质土壤， 多数品种宜在微酸性至中性土壤中生长 。百合喜凉爽潮湿环境，日光充足的地 方、略荫蔽的环境对百合更为适合。忌 干旱、忌酷暑，它的耐寒性稍差些。百 合生长、开花温度为1624，
3、低于 5或高于30生长几乎停止，10以 上植株才正常生长，超过25时生长又 停滞，如果冬季夜间温度低于5持续5 7天，花芽分化、花蕾发育会受到严重 影响，推迟开花甚至盲花、花裂。百合 喜肥沃、腐殖质多深厚土壤，最忌硬粘 土；排水良好的微酸性土壤为好，土壤 pH值为5.56.5。 关于百合的组织培养最早是Dobreaux等人（1950）首次用纯白百合（Liliumcandidum）的花 蕾成功地诱导出小鳞茎。 黄济明（19791984）对25个种或品种进行了组培试验，证明百合的珠芽、 鳞片、鳞茎盘、根、茎、叶、茎尖、花梗、花柱和未成熟胚等外植体均能被 促进形态发生。新美芳二（1980）对百合鳞片
4、、花被片、花丝、花柄等也组 培成功，认为开花时各花器官和茎所形成小鳞茎的能力最高。 程治英等人（19912001）对30多种或品种的百合进行组培证实的结果如下 ： （1）用百合根、叶作为外植体，也与鳞片一样，不同部位分化丛芽的能力 都是近轴端大于远轴端。 （2）鳞茎鳞片分化能力（分化苗的频率和速度）都是外部大于内部。杂种 品种的分化能力大于野生种，低海拔种大于高海拔种。鳞片组培得到小鳞茎 的试管鳞片其分化能力大于原始培养鳞片的分化能力。 有效的组培方法 1、培养基配方 诱导诱导 培养基：MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 增殖培养基：MS+BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L
5、生根培养基：1/2MS+NAA0.1mg/L 培养的前处理 2、培养程序 取材及灭灭菌优选优选 生长长健壮、开花性状好的种球 作为为外植体。在取材前，最好将准备备接种的鳞鳞茎在 45的低温下处处理68周，然后经经洗衣粉常规规清洗 后，剥去鳞鳞茎外皮及外部23层鳞层鳞 片，切去少许顶许顶 部 及基部，先用75%的酒精浸泡3060S，然后在0.1% 升汞溶液中处处理1520分钟钟，次氯氯酸钠处钠处 理1015分 钟钟，无菌水洗34次，即可进进行无菌操作切块块（段） 接种。 温度：20-25 光照：800-1200lx 每天9-14h照明 培养基：pH5.6-5.8培养条件培养条件培养条件根的培养以
6、毛百合为材料，在MS+NAA0.5-0.1mg/L 培养基上，形成肿胀肿胀 的粗根，将其切成小段MS+B2mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上进进行培养，便能分化出苗。毛百合试试管苗5-6个月，能形成直径17mm左右的鳞鳞茎，移栽后成活情况良好。胚培养在杂交育种工作中， 为防止杂种胚和母体 胚乳间不亲和，有可 能造成胚败育的情况 下，可采取胚培养， 以克服不亲和现象， 有利于育种工作的顺 利进行。培养时时仍以MS培养基较较好，糖浓浓度是种类类而异常在20-40之间间pH5.0较为较为 适宜，NAA用量只宜在0.1-0.001之间间。加入适量BA有利于幼胚成活，高BA会抑制胚根的产产生，并促
7、进进胚组织组织 愈伤伤组织组织 化，通常MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养促进进愈伤组织伤组织 生长长，然后将长长大的愈伤组织伤组织转转移到1/2MS不加任何激素的培养基上，约约2个月后，可形成大量的不定芽，延长长培养时间时间 ，就会生根，产产生出完整的杂杂交后代。影响百合小鳞茎形成的因素 季节（春、夏、秋、冬） 鳞片不同部位的影响（上 、中、下） 小鳞片培养后形成小鳞茎 的大小分布 小鳞茎形成的重量与培养 及用量的关系（成反比）试管鳞茎休眠现象百合30下的小鳞茎不休眠，而25下的绝大部分鳞茎休眠；低盐 低糖和高氮培养基上的小鳞茎不休眠，而高糖（9%）培养基上的 小鳞茎会出现休
8、眠现象。不同的品种在36的温度下39120D可 打破休眠。 休眠现象还与培养小鳞茎时所用的糖浓度有关（Takayama等1982 ）；3%糖浓度培养下得到的小鳞茎在5下约2个月可打破休眠， 而9%糖浓度下培养得到的小鳞茎要冷藏约4个月。我们在培养过程 中发现，蔗糖浓度较高（40g/L）对小鳞茎的形成和长大有利。如 糖浓度降到20g/L，小鳞茎很快能长成幼苗。因此，可用糖浓度控 制小鳞茎的生长，使幼苗生长健壮，提高成活率。也有人在组培前 用4的低温处理鳞片120D，在经组培所得到的小鳞茎不发生休眠 现象。 快速繁殖的实例 把最初培养得到的小鳞茎，每两个月用 20x90mm的培养皿，加入MS+NAA0.1+蔗 糖9%+活性炭0.5%的琼脂培养基，继代一 次。2个月后奖得到的小鳞片切割，转移到 MS+KT10的培养基上培养，给予25和 2.5w/的连续连续 光照。在经过经过 2 个月在原小 鳞鳞片的表面再生出无数成堆的、新的小鳞鳞 片。再将这这些成堆的小鳞鳞片转转移到加 100mLMS液体培养基的300mL锥锥形瓶中， 25,0.5w/ 连续连续 光照的条件下，用 180r/min的旋转摇转摇 床摇动摇动 培养1个月。这这 种条件证证明最适宜小鳞鳞片的快速增长长，所 得的小鳞鳞片用于培养形成小鳞鳞茎。参考文献：观赏植物组织 培养技术
