血清中的总蛋白测定

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1、血清总蛋白测定总蛋白简介 血清蛋白质是各种蛋白的复杂混合物。可利用不 同的方法将其分离。血浆中的白蛋白、a1、a2、 球蛋白，纤维蛋白原，凝血酶原和其它凝血因 子等均由肝细胞合成。球蛋白主要来自浆细胞 。当肝脏发生病变时，肝细胞合成蛋白质的功能 减退，血浆中蛋白质即会发生质和量的变化。临 床上用各种方法检测血浆蛋白的含量来协助诊断 肝脏疾患，并作为疗效观察，预后判断的指标。 测定原理 原理： 血清(浆)中蛋白质的肽键(-CO-NH-)在 碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红 色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的 双缩脲(H2N-OC-NH- CO-NH2)在碱性溶液中与 铜离子作用

2、形成紫红色的反应相似，故称之为双 缩脲反应。这种紫红色络合物在540nm处有明 显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量 呈正比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较 ，即可求得蛋白质含量。标本要求 血清或血浆（肝素或EDTA）抗凝 血清标本贮存在2-8稳定三天，-20稳 定六个月。临床意义 1.总蛋白升高 2.总蛋白降低血清总蛋白增高： (1)血液浓缩，导致总蛋白浓度相对增高： 见于严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水， 血清总蛋白浓度可明显升高。休克时，由 于毛细血管通透性增加，血液中水分渗出 血管。血液可发生浓缩，慢性肾上腺皮质 功能减退的患者，由于丢失钠的同时伴随 水的丢失，血浆也可出现浓缩

3、现象。 (2)血浆蛋白质合成增加：主要见于球蛋白 合成增加，多发性骨髓瘤患者、巨球蛋白 症、系统性红斑狼疮等。 血清总蛋白降低： (3)蛋白质合成障碍：如慢性肝炎、急性干 细胞坏死、肝硬化等。 (5)摄人不足和消耗增加：食物中长期缺乏 蛋白质或慢性胃肠道疾病所引起的消化吸 收不良，因患消耗性疾病，如大失血、严 重结核病、甲状腺功能亢进、肾病综合征 、长期营养不良、恶性肿瘤等，均可造成 血清蛋白浓度降低。 (6)蛋白质丢失：严重烧伤时大量血浆渗出 ，大量失血，肾病综合征时大量蛋白尿， 溃疡性结肠炎时肠道长期丢失一定量的蛋 白质，这些病理改变均可使血清总蛋白浓 度降低。 注意事项 1.黄疸血清，严

4、重溶血，葡萄糖，酚酞及 溴磺酞钠对本法有明显干扰，故用标本空 白管来消除。但如标本空白管吸光度太高 ，可影响测定的准确度。 (4)血液稀释，导致总蛋白浓度相对降低： 如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引 起的钠、水潴留。 注意事项 血清总蛋白生理性波动。直立体位由于 体液分布原因，血液相对浓缩，而长久卧 床者血液较直立体位稀。因此长久卧床者 血清总蛋白比直立活动时约低35g/L。 新生儿血清总蛋白可比成人低58g/L。 60岁以上的老年人约比成人低2g/L。 评价 1.双缩脲显色反应仅和蛋白质中肽键数成 正比关系，与蛋白质的种类、分子量及氨 基酸的组成无明显关系，各种蛋白质的显 色程度基本相同。 本法重复性好，RCV为4%，CCV为3.9% ；线性范围为0140g/L；本法干扰少， 并且大多可以避免；使用单一的稳定试剂 ，操作简便、快速，既适于手工操作，也 便于自动化分析，已被推荐为测定血清总 蛋白的参考方法。 唯一的缺点是灵敏度较低，但本法的检出 限为0.21.7g/L，已能满足临床生化检验 的需要。