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1、迪澳食品安全分子检测系统水产病害检测产品水产病害检测产品 PPTPPT五 竞品信息一 养殖状况二 迪澳产品三 实验操作四 客户案例六 常见问题目录1 我国渔业发展现状2 我国渔业生产存在的问题3 主要养殖品种状况4 企业产品检测所面临的问题一 养殖状况SI MUNI MU一 养殖状况1 我国渔业发展现状海水渔业从养殖规模上看，我国海水养殖面积的79.4%集中在辽宁、浙江、福 建、山东和广东5省。从养殖品种来看，鱼类养殖主要集中在广东、福建两省；虾蟹类养殖主 要集中在广东、福建、山东、浙江4省（近些年广西和海南的发展也很快， 仅居广东之后）；贝类主要集中在山东、辽宁、广东和福建淡水渔业从养殖规模
2、上看，四大家鱼的养殖也主要集中在湖南、广东、江苏、安 徽、湖北、江西这6省。 从养殖品种来看，鳗鱼养殖主要集中在福建、江西和广东三省；虾类的 养殖主要集中在江苏和广东两省、河蟹的养殖大省是江苏，养鳖大省当属 浙江、广东、江苏和湖北，罗非鱼的养殖区域集中于广东、广西、海南和 福建4省数据来源：数据来源：国家统计局图3：1978年-2012年我国渔业年总产值一 养殖状况1 我国渔业发展现状一 养殖状况2 主要养殖品种状况 进入21世纪以来，全球对虾产量一直 增长势头良好。然而，紧随其后的是 ，2011-2012年和2012-2013年期间产 量分别下降了6%和10%，之后又再一 次出现了很小的增长
3、。 印度截至目前出现了近几年最大的对 虾产量增长率，而中国则出现了大幅 下降。孟加拉国、巴西和厄瓜多尔都 在期待2013年虾产量增长，然而，墨 西哥却出现了令人失望的产量下滑， 最大可能是因为虾疾病。 对 虾 目前中国养殖对虾主要病害A、白斑/红体病原体是白斑病毒（WSSV） B、生长慢/孵化死亡病原体是传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）C、偷死（隐蔽的死亡）病原体是黄头病毒（YHV）或者是对虾早期死亡综 合症/急性肝胰腺坏死综合症（EMS/AHPNS）的副溶血弧菌一 养殖状况1979-2002年厄瓜多尔虾出口量（公吨）和环境/疾病事件 对 虾一 养殖状况石斑鱼 中国大陆规模化石斑鱼产
4、业研究开始于近10年 ，较之日本（20世纪60年代）、马来西亚（20世 纪70年代）等国家起步虽晚，但目前已取得迅猛 发展。据世界粮农组织（FAO）统计，2009年全 球石斑鱼总产量约7.5万吨（70%来自养殖，30% 来自天然捕捞），其中60%来自中国大陆，23% 来自台湾。中国大陆已成为全球养殖石斑鱼主要 产地 。2 主要养殖品种状况一 养殖状况石斑鱼 近些年，在中国，多种细胞肿大病毒属虹彩病毒陆续被发现，其宿主几 乎涵盖了我国主要的海水养殖鱼类以及重要的淡水养殖鱼类。1992年在台 湾澎湖养殖的石斑鱼(Epinephelus sp)、真鲷等暴发了一种虹彩病毒病， 该病毒可导致养殖石斑鱼、
5、真鲷等大量死亡，死亡率高达60%100% 。特征1：眼睛发青，养殖户 经常称为“青光眼”，有 青光眼症状的青斑PCR几 乎100%的虹彩病毒阳性。12特征2：脾脏肿大发脆， PCR检测强烈阳性。特征3：体表有出血溃疡， 但体内并无菌，PCR检测 强烈阳性。2 主要养殖品种状况3一 养殖状况锦鲤 锦鲤在国内已形成了一定生产能力，目 前普通锦鲤的年生产力可达数千万尾 。 据了解，美国对包括锦鲤在内的观赏鱼的 年进口额达20亿美元；香港的年出口额达 2亿港元；日本的年销售额达1000多亿日 元。 自2012年开始，中国和印尼发生锦鲤疱疹 病毒（KHV）症，大量锦鲤死于此病，经济 损失巨大。锦鲤接触感
6、染源后7-10天內会发 病，死亡率高达80-100%。发病鱼外观并无 任何特异病变，仅腮部有潮紅、肿胀、白色 斑塊及出血，有时可见鳍及尾充血。因此， 应加强分子手段的检测。 2 主要养殖品种状况一 养殖状况 近年来，我国的鲍鱼养殖产业蓬勃发展，养殖产 量长期位列世界首位，2012年全国的鲍鱼养殖产 量突破9万吨，已形成超百亿元的特色海水养殖产 业。 鲍鱼养殖产量，2010年，中国遥遥领先，中国 56511吨，总共65782吨。特别值得一提的，台湾 以前产量是非常领先的，因为九孔病、肌肉萎缩 病害台湾下滑非常严重，从以前的2,3000吨到 2010年170多吨。 2009年，福建养殖的鲍鱼出现大
7、量死亡现象，死 亡高峰期鲍鱼最高死亡率达到50。经过鉴定发 现濒死的鲍鱼个体完整，足部附着力减弱，肌肉 萎缩严重，体表颜色变浅。养殖大户每天损失3000元到5000元！ 鲍鱼2 主要养殖品种状况SI MU一 养殖状况3 我国渔业生产存在的问题渔业灾害仍很严重渔业资源不断下降工厂化养殖比重太低病4 企业产品检测所面临的问题一 养殖状况目前检测单位少监管力度不断增大送检时间长、价格高被检出问题损失大企业建立 快速检测 能力迫在 眉睫1 三大系列产品2 现有检测标准3 产品设计原理4 迪澳产品性能二 迪澳产品1 产品设计原理-基因分子检测发展历程二 迪澳产品第一代普通PCR检测技术注：巣式PCR是基
8、于普通PCR，多设计一对嵌 套引物，以提高检测的准确度1.操作繁杂 2.准确度低 3.需要专业背景 4.只能检测一个 指标二 迪澳产品第二代荧光PCR检测技术普通荧光PCR 荧光探针PCR1.操作很繁杂 3.需要专业背景2.准确度较高 4.只能检测一个指标二 迪澳产品第三代环介导等温PCR检测技 术4条引物 特异性识别6个靶序列识别位点高活性-链置换DNA聚合酶 63 DNA复性和延伸二 迪澳产品1 产品设计原理-环介导等温PCR优势 Bst DNA聚合酶，高效扩增 成哑铃状，茎环结构，自主扩增酶 无需热循环，持续扩增引物设计 提高低拷贝模板的扩增概率恒温扩增反应底物浓 度高准确。快速易于 操
9、作二 迪澳产品比较项目恒温PCR技术普通PCR检测巢式PCR普通荧光检 测反应时间30 min90min190min90min灵敏度十分高高高十分高操作性简单-无需专业 背景复杂-需要专业背 景复杂-需要专 业背景较难-需要专 业背景准确率很高低高很高检测效率可以同时检测多 个样品可以同时检测多 个样品可以同时检 测多个样品可以同时检 测多个样品1 产品设计原理-分子检测方法的比较二 迪澳产品2 现有检测标准世界动物卫生组织 Office International Des Epizooties (OIE)是一个旨在促进和保障全球动物卫生和健康工作的政府间国际组织， 总部位于巴黎，到2011年
10、，OIE成员国已经达到178个。2003年，该组织 正式更名为世界动物卫生组织World Organisation for Animal Health。 OIE与包括FAO、WTO、WHO等45个全球及地区性组织保持联系。OIE国际水生动物法典 OIE水生动物疾病诊断手册OIE水生动物病害名录病毒性疾病传染性造血器官坏死病(IHN)、鲤春病毒病(SVC)、病毒性出血性败血症（VHS）、锦鲤疱疹病毒病（KHD）、对虾Taura综合征(TS)、对虾白斑病（WSD）、对虾黄头病（YHD）、对虾传染性皮下和造血器官坏死病(IHHN)、病毒性脑病和视网膜病(VER)、真鲷虹彩病毒病(RSIVD)、流行性
11、造血器官坏死病(EHN) 、马苏大麻哈鱼病毒病(OMVD)、传染性胰脏坏死病(IPN)、传染性鲑鱼贫血病(ISA) 、对虾中肠腺坏死杆状病毒病（BMN）、螯虾瘟（CP）。二 迪澳产品2 现有检测标准OIE水生动物病害名录细菌性疾病细菌性肾病(BKD)、鮰鱼肠道败血病(ESC)，以及食用水生动物中对人 有害的细菌或人畜共患病原菌如副溶血弧菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、李斯 特氏菌、大肠杆菌O-157等，及细菌总数计数监测工作等。OIE水生动物名录其它水生动物病害鱼立克次氏体病、大西洋鲑鱼三代虫病、包那米虫病、单孢子虫病、 马尔太虫病、闭合孢子虫(小囊虫)病、派琴虫病。二 迪澳产品2 现有检测标准二 迪
12、澳产品3 三大系列产品-部分产品水产病 害检测对虾白斑 综合症 病毒对虾桃拉 综合症 病毒对虾传染 性表皮与 造血组织 坏死症病 毒对虾肝胰 腺细小 病毒对虾黄头病 毒鲤春病毒 血症病毒鲍肌肉萎 缩症病毒赤点石斑 鱼神经坏 死病毒河流弧菌病毒性出 血败血症 病毒拟态弧菌高经济附加值水产 种类病害检测产品对虾病毒常用检测 产品各类弧菌检测试剂 产品3 三大系列产品-适用企业二 迪澳产品水产病害检测水产养殖企业水产种苗养殖销 售企业饲料、渔医企业个体养殖户二 迪澳产品3 三大系列产品-迪澳产品检测特点 恒温连续反应，而且设备要求简单 模板可低至数拷贝，产物可达1010倍检测时间短 4条引物特异性识
13、别6个位点灵敏度高 防止扩增产物污染特异性强闭管反应二 迪澳产品4 迪澳产品性能检测举例：对虾白斑病毒（WSSV）的检测1. 试剂盒组成（1）核酸提取试剂盒：DNA提取液；洗涤液（需要客户加无水乙醇）；洗涤液；核酸吸附柱；废液收集管（2）检测试剂盒2. 前处理注意事项A. 少量虾肉前处理用研磨棒B. 大量虾肉前处理用一次性均质袋3. 实验室性能评估A 与天根等提取试剂盒进行比较，效果相当，且处理时间更短，对后续荧光检测反应影响更小。B 检测试剂盒与OIE 巢式PCR、部分文献中的real-time PCR、LAMP引物同时进行WSSV DNA灵敏度与上百个实际样品的检测，其中与OIE巢式PCR
14、及real-time PCR的阳性符合率为100%。二 迪澳产品4 迪澳产品性能三 实验操作1 样品的前处理2 实验基本流程3 核酸提取过程4 实验结果分析三 实验操作样品的前处理以对虾病毒检测为例：取待测样品，用灭菌镊子夹取虾，去掉头部，放入一次性无 菌均质袋中。加入3-5倍生理盐水，在均质袋中反复碾压即可得 虾组织匀浆液。核酸提取过程三 实验操作一定量组织中加入生理盐水，匀浆，离心上清液中加DNA提取液，颠倒混匀，静置5-10min洗涤液加至DNA的吸附柱中，离心，重复两次将吸附柱装入洁净离心管中，加入30-50ul洗脱液至吸附柱 中央，静置，离心，可获得目的DNA裂解后的液体转入DNA的
15、吸附柱中，离心三 实验操作实验基本流程三 实验操作结 果 判 读有”S”型曲线，为阳性无”S”型曲线，为阴性实验结 果分析四 客户案例31 客户群体2 销售流程 案例分析四 客户案例1 客户群体水产养殖企 业加工出口企 业水产种苗养 殖销售企业饲料公司个体养殖户渔医代理商政府机构第三方检测 机构水产病害检测2 销售流程基本信息 检测需求实验室状况企业营业额企业营业额企业营业额检测指标检测量j及样本现有检测方法现有实验人员实验场地环境具备检测能力拜访所需了解的客户信 息四 客户案例对目标客户群体中的客户或主 动咨询的客户进行预约拜访预约拜访客户，并 预约上门实验演示制定方案，上门实验演示，进 行
16、进一步沟通，并推荐产品推荐产品并达成购买 协议技术培训、定期客户回访，良好的 客户维护四 客户案例2 销售流程3 案例分析-国美水产企业背景：广东国美水产食品有限公司是湛江国联水产开发股份有 限公司旗下的合资公司，是一家集水产品加工、进出口贸易 于一体的大型外向型企业，主要是加工南美白对虾、罗非鱼 等产品。检测需求：建设能检测对虾病毒的实验室，需要对虾必检的 2个病毒（WSSV、YHV）、5个致病菌（沙门、志贺、 葡、副溶血、霍乱）项目的检测产品。四 客户案例3 案例分析-国美水产建设实验室：国际上对进口虾产品实施苛刻的限制性措施，特别是澳 大利亚对WSSV和YHV病毒严格监管，因此在不具备分子检 测能力的情况下，需要送至湛江CIQ检测，送检费用太高， 时间太长。结果：国美水产的市场人员参加广
