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1、自由基清除剂的应用新技术 益长素的应用技术方案诠释广东新南都饲料科技有限公司 2011 2011 携手新南都携手新南都创造饲料核心价值创造饲料核心价值王胜林内容提纲u1、关于自由基的常识与危害u2、自由基清除剂（益长素）的清除效果u3、自由基清除剂（益长素）的研发历程u4、自由基清除剂（益长素）的使用效果u5、自由基清除剂（益长素）的应用方案广东新南都饲料科技有限公司 自由基的常识与其危害广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解自由基与机体氧化应激u 自由基（Free Radical ，FR）的产生：:自由基是生物体内正常代谢的中间产物，主要来源于细胞嘌呤代谢 、线粒体呼吸
2、链、免疫细胞以及体内UFA发生过氧化作用的产物。:来源：外源性自由基和内源性自由基。 内源性自由基：在机体新陈代谢过程中由体内生化反应所产生。 外源性自由基：由外界因素如光化学因素、化学因素（药物、重 金属等）、高能辐射等引发共价键断裂而生成的自由基。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解自由基与机体氧化应激u 自由基（Free Radical ，FR）的危害：当机体处于应激状态时，自由基的产生和清除平衡遭到破坏， 体内氧自由基的产生过多，使机体许多重要的生物大分子发生不可 逆转的氧化损伤：如使核酸、蛋白质、膜多不饱和脂肪酸（PUFA） 等出现交联或断裂，导致细胞结构和功
3、能的破坏。机体存在的几种主要自由基：:超氧阴离子自由基(.O2-) :羟基自由基(.OH-) :脂质过氧化物(LPO) :.NO自由基广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解蛋白质断裂蛋白质-蛋白质交联-S-S-CH3-S- 脂质-脂质交联O二硫交联脂质-蛋白质交联OH HO脂肪酸氧化OH HO氧化的脂肪酸释 出丙二醛（MDA ）氨基酸氧化Cu2+,Fe2+等氧化自由基细胞膜广东新南都饲料科技有限公司 自由基与机体氧化应激新南都：请您了解新南都：请您了解u氧化应激的诱导与产生：自由基与机体氧化应激广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解自由基清除自由基产
4、生自由基稳衡态氧化应激u自由基参与维持正常生命活动的生理、生化反应，同时对机体又有损伤。其产生与清除处于动态平衡，过多或过少的积聚都会引起机体氧化应激。广东新南都饲料科技有限公司 自由基与机体氧化应激新南都：请您了解新南都：请您了解u氧化应激对动物生长及健康的影响：自由基与机体氧化应激广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u氧化应激对动物生长及健康的影响：（相关报道）自由基与机体氧化应激广东新南都饲料科技有限公司 资料来源动物应激类别危害或损伤Husarin，1982肉鸡氧化应激增重和饲料效率下降。Sallman等，1988肉鸡氧化应激日增重和饲料利用率下降，严重者出现死
5、亡。顾浩清，1991蛋鸡氧化应激产蛋率急剧下降。Liu等，1995猪氧化应激产生的自由基对肉质存在明显的影响，会使肉色变差、滴 水率增加。梁萌青等，1996水产动物氧化应激水产鱼类和中国对虾的增重下降、死亡率上升。刘佳，2007肉鸡氧化应激因组织性缺氧产生大量的自由基，会引发腹水症，尤其快 速生长的肉鸡更为明显。李丽娟等，2007断奶仔猪氧化应激造成了脾脏损伤，显增加脾脏MDA含量，极显著降低脾脏 GST（谷胱甘肽-S转移酶）的活力，降低血浆中SOD、 GSH-PX的活性和抑制羟基自由基的能力。袁施彬等，2009断奶仔猪氧化应激降低了肝脏抗氧化酶活性和提高了MDA含量，降低了空肠 绒毛高度和增
6、加了隐窝深度，空肠黏膜和肝脏发生不同程 度的病理变化。新南都：请您了解新南都：请您了解广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解 仔猪断奶消化器官组织学变化 （肠绒毛结构）21日龄断奶断奶后一周断奶后六周广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解断奶仔猪体内自由基与抗氧化系统活性变化广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解断奶仔猪血清与肝脏组织中自由基变化氧化应激对猪生长性能的影响u利用Diquat（二吡啶基除草剂）诱导产生氧化应激，观察对生长 猪生长性能的影响（处理35天后测定结果）。新南都：请您了解新南都：请您了解广东新南都饲料科技有
7、限公司 自由基的清除与应用u自由基清除剂：是指能清除体内自由基或能阻断自由基参与 氧化反应，从而提高机体的自身抗氧化能力的物 质（抗自由基物质、体内抗氧化物质）。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u在机体的抗自由基系统中，酶和非酶抗氧化作用都能及 时清除自由基，使机体内部的氧化与抗氧化能力保持动态 平衡。自由基的清除与应用广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u抗氧化效果的评价体系：:1、自由基产物：丙二醛（MDA）、硫代巴比妥（TBARS）、羰基化蛋 白质；:2、抗氧化酶：超氧化物歧化酶（CuZn-SOD、Mn-SOD）、谷胱甘肽过 氧化物酶（
8、GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）；:3、体内抗氧化剂：金属硫蛋白（MT）、铜蓝蛋白（CRE）、还原型谷 胱甘肽、VC、VE等；:4、免疫功能指标：CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+、 T淋巴细胞转化率等；:5、生产性能表现：日增重、采食量、料重比、肉质评价；配种率、泌乳 量、产蛋率、受精率。益长素清除自由基的效果u一、体外细胞实验证明：:1、可直接清除细胞内的自由基；:2、降低细胞内活性氧含量；:3、减少氧化对细胞的损伤；:4、保护细胞线粒体结构的完整性。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解益长素对邻苯三酚鲁米诺体系化学 发光抑制率
9、的影响(O2 ) 益长素（mol/L）%益长素对Fe2+/H2O2鲁米诺体系 化学发光抑制率的影响(OH) %1、益长素清除氧自由基（O2）与羟自由基（OH）广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解对照组氧化组 100umol/LFeSO4+H2O2u细胞与H2FDA（活性氧探针）共孵育，在激光共聚焦显微 镜下观察发现加入氧化剂，细胞内活性氧明显增加，加入益 长素能够降低活性氧含量。氧化20umol/L 益长素2、益长素降低细胞内活性氧含量广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解细胞的染色分群图 3、应用流式细胞技术研究细胞的氧化与益长素的抗氧化作用u荧
10、光强度 越强，表明 细胞受损伤 的程度越大 。u细胞受到 氧化损伤后 ，细胞的各 参数发生变 化，脱离原 来的细胞群 。ABCABC正常对照组氧化对照组添加益长素 20umol/L广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解A 对照组B 氧化组C 氧化+20um益长素u结果显示：加入氧化剂，氧化组线粒体呈松散状态， 结构不完整，加入益长素后，线粒体的结构相对完整。4、应用激光共聚焦观察线粒体的立体结构，从亚细胞水 平研究细胞氧化与益长素的抗氧化机理广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u二、细胞培养实验证明：:1、可提高小肠粘膜上皮细胞的抗氧化力；:2、可
11、提高肝脏细胞的抗氧化力；:3、可提高骨骼肌细胞的抗氧化力；:4、可提高脂肪细胞的抗氧化力。益长素清除自由基的效果广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解1、益长素对小肠粘膜上皮细胞抗氧化力的影响正常对照组：细胞间相互连接 ，细胞边界轮廓清晰可见 。氧化处理组：细胞破裂溶解 ，培养液中充满细胞碎片， 细胞核悬浮于培养液中。氧化处理+益长素组：少量细 胞破损，细胞保持较完整结构 。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解正常对照组：细胞间相 互连接，细胞结构完整氧化处理组：细胞破裂，只剩 下细胞核悬浮在培养液中，可 看到培养液中密布细胞碎片 氧化处理+益长素
12、组： 细胞损伤不同程度降低 2、益长素对肝脏细胞抗氧化力的影响广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解（荧光强度/mg prot） 3、益长素对氧化损伤的猪骨骼肌细胞抗氧化力的影 响广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解（荧光强度/mg prot） 4、益长素对氧化损伤的猪脂肪细胞抗氧化力的影响广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u三、动物饲养实验的结果证明：:1、可提高断奶仔猪肠道组织的抗氧化力；:2、可提高断奶仔猪血清的抗氧化力；:3、可提高断奶仔猪肝脏组织的抗氧化力；:4、可提高生长猪肌肉组织的抗氧化力；:5、可提高肥育猪
13、肌肉组织的抗氧化力；:6、可提高生长-肥育猪机体的抗氧化力。益长素清除自由基的效果广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u结果显示：益长素能提高断奶仔猪肠道抗氧化酶系的活性和 降低自由基（MDA）的含量。1、断奶后1周2、断奶后6周1、益长素对断奶仔猪肠道组织抗氧化力的影响广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解2、益长素对断奶仔猪机体抗氧化力的影响u结果显示：益长素能提高断奶仔猪血清中抗氧化酶系的活性，降低血清中 自由基（MDA）的含量。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解3、益长素对断奶仔猪肝脏组织抗氧化力的影响u结果显示：
14、益长素能提高断奶仔猪肠道抗氧化酶系的活性和非酶抗氧 化物的浓度。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解4、益长素对生长猪肌肉抗氧化力的影响u结果显示：益长素能提高生长猪肌肉组织中的抗氧化酶的活性 和总抗氧化能力。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解A、背最长肌SOD 、CAT、GSH-Px mRNA表达量B、宰后肌肉中MDA含量C、宰后肌肉中羰基蛋白质含量5、益长素对肥育猪肌肉抗氧化力的影响u结果显示：益长素能提高肥育猪肌肉组织中的抗氧化酶的活性 ，降低肌肉组织中自由基（MDA和羰基蛋白质）的含量。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都
15、：请您了解6、益长素对生长-肥育猪机体抗氧化力的影响u结果显示：益长素能提高断奶仔猪血清中抗氧化酶系的活性，降低血清中 自由基（MDA）的含量。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解小 结u1、体外细胞实验证明：益长素可清除细胞内的自由基，降低细胞内活性氧含量，减少氧化对细胞的损伤，保护细胞线粒体结构的完整性。u2、细胞培养实验证明：益长素可提高小肠粘膜上皮细胞、肝脏细胞、骨骼肌细胞、脂肪细胞的抗氧化力；u3、动物饲养实验的结果证明：益长素可提高肠道组织、血清、肝脏组织、肌肉组织的抗氧化力。广东新南都饲料科技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解总 结广东新南都饲料科
16、技有限公司 新南都：请您了解新南都：请您了解u益长素作用机理的研究及应用生产的实验证明：作为体内自由基清除剂，能有效清除动物机体组织器官、细胞及细胞器的自由基，并提高动物机体本身的抗氧化能力，为动物的健康生长提供强有力的机能保障，进而提高畜禽的养殖效益。自由基清除剂益长素（生物活性甙 ）u产品研发历程： l2000年，研究植物源生物活性甙元的特性与功效； l2004年，改造活性甙分子结构，成功提高其活性； l2005年，复配成功和中试推广试验； l2006年，获“广东省高新技术产品”； l2007年，获“国家重点新产品”； l2008年，获“广东省重点新产品”。广东新南都饲料科技有限公司 自由基清除剂益长素（生物活性甙 ）u有效成分：植物源生物活性甙元。u成分来源及研发路线：主要有效成分来源于三种植物精 华，后经分离和提纯，并经过有机精细化工研发人员对 其分子结构进行定位改造，获得高活性甙的有效组分， 经组合和不同动物饲养试验证实，益长素通过清除机体 自由基来发挥其独特功效，并可产生非常可观的经济效 益，后经生物安全实验证实不会对动物机体产生不利和
