血液成分制备及保存

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1、血液成分制备及其保存国际输血协会曾经指出：“20世纪70年代是输血史 上发生重大变革的10年，其中最大成就是成分输血代 替全血输血。”成分输血是输血技术发展的总趋势，也是输血现代 化的重要标志之一。成分输血概述一、成分输血的概念(blood component therapy)是用物理的或化学的方法把全血分离 制备成各种较浓和较纯的制品，根据不同 病人的需要，输给相应制品。二、成分输血的优点 1.一血多用，节省血源，一人献血，多人受益 2.制品的浓度和纯度高，疗效好 3.最大限度地降低输血不良反应及疾病的传播 4.便于保存和运输，使用方便三、血液成分制备方法利用离心、过滤等物理的方法来分离血液

2、成分，最常用的 是利用各种血液成分相对密度、体积等因素的不同，通过密度梯 度离心法，离心分层而得到浓度、纯度较高的单一成分。 手工制备血细胞分离机制备四、血液成分保存的原则使各种血液成分在体外储存过程中看，保持 其最佳生理状态。在保存期内，输入受者体内后 ，可在循环中存活并维持其正常的生理功能，以 达到有效的治疗目的。血液成分是在全血采集后6-8h内制备的,全血 暂时存放的最好条件是2h内被冷却到20-24,如 果无此条件,可存放在2-6,不应在过冷或过热的 外环境久放,如需从中分离血小板,则应保证采血后 2h内冷却到20-24,并在此条件下运输.血液采集注意事项（1）无菌操作，有效消毒，避免

3、污染和感染 （2）无凝块、无溶血、无乳糜，采血量符合标准 （3）采血速度：200ml采集时间小于3min，400ml采集时间小 于6min （4）采集过程中出现血流不畅，则不应用于制备浓缩血小板。血液细胞成分的制备一、制备原理利用各种血液细胞比重、体积等因素的不同，通过离 心分层而得到浓度较高的单一成分。血液中各成分比重(g/ml)血浆 (1.0251.030) 血小板 （1.0301.060） 淋巴细胞 （1.0501.078） 粒细胞 （1.0801.095） 红细胞 （1.0901.111）二、红细胞制品红细胞制品的种类： 悬浮红细胞 浓缩红细胞 悬浮少白细胞的红细胞 浓缩少白细胞的红细

4、胞 洗涤红细胞 冷冻解冻去甘油红细胞 辐照红细胞（一）悬浮红细胞 1.概述：悬浮红细胞是目前国内外应用最广泛的一种红细胞 制品。悬浮红细胞是用离心的方法分出全血中大部分 (90%)血浆后，加入各种晶体盐红细胞保存液。各种晶体盐红细胞保存液：红细胞添加液（additive solution） (mg/100ml)保养液、添加液都是为保存红细胞而设计的, 保存温度2-6也是根据红细胞而定,而血小板、 白细胞、凝血因子的最佳保存条件都与红细胞不 同2.制备方法：多联袋制备血液成分为国内外推荐使用方法。用三联袋（含有保存液的主袋、添加液的末袋和次空的转移袋）的主 袋采集200ml或400ml全血。 将

5、8小时以内的全血，用（42）低温离心机离心，离心力为 5000g，离心7分钟，沉淀红细胞。轻轻取出离心后的血袋悬挂于分离支架上或分离夹内，将上层不含血 细胞的血浆分入空的转移袋内。把三联袋末袋中的添加液加入主袋浓缩红细胞内，使红细胞与添加液 充分混匀。用高频热合机切断塑料袋间的连接管，制成悬浮红细胞。贴上标签，放入血库专用冰箱保存。空转移袋 添加液 保存液全血血浆（含保存液）添加液3、注意事项 （1）制备前应检查全血采血时间及血袋热合部位是否 漏血，各种标签是否齐全等。 （2）用分离支架或分浆夹将血浆分入空的转移袋时， 不能有红细胞混入。 （3）悬浮红细胞肉眼观察应无黄疸、气泡、重度乳糜 。

6、（4）悬浮红细胞所贴标签的条码、血型、献血者、采 血者、采血时间应与原采血袋一致。4、 质量标准 (1)含有全血中全部的红细胞、一定量白细胞、血小板和少量血浆。 (2)血细胞比容为0.500.65。 (3)容量应为200ml10%或400ml10%。 (4)血红蛋白不低于45g/单位。 (5)200ml全血分离出的红细胞为1单位 （unit，U）悬浮红细胞。5、保存和运输悬浮红细胞应保存在26。红细胞添加液为MAP、 SAGM、CPDA-1的保存期为35天；AS-1、AS-3、AS-5的保存 期为42天；红细胞添加液为生理盐水的保存期为24小时。运输 的温度为210，最长运输时间不得超过24小

7、时。（二）浓缩红细胞 1.制备：用离心方法将采集到二联袋内的全血分离出部分血浆制备而成的红 细胞成分血。 2、质量标准 （1）含有全血中全部的红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆。 （2）红细胞比容为0.650.80。 （3）1U红细胞容量为120ml10%。 （4）血红蛋白不低于45g/单位。 （5）200ml全血分离出的红细胞为1U的浓缩红细 胞。 3.保存和运输浓缩红细胞保存在2-6。含ACD-B、CPD保养液的浓缩红细胞保 存期为21天，含CPDA-1保养液的保存期为35天。运输温度2-10。（三）少白细胞的红细胞 1.概述：大多数患者因受血或受孕，体内产生白细胞抗 体，这些抗体大部

8、分属于人类白细胞抗原系统的同种 抗体，当再度输入含有白细胞的全血或其他血液成分 时，有可能产生免疫性发热输血反应。减除血液制品 中的白细胞是安全输血的一种措施。少白细胞的红细 胞有少白细胞浓缩红细胞和少白细胞悬浮红细胞。2.制备方法 离心法（去白膜法）：是一种依据红细胞与白细胞比重 不同，简单、经济易于操作的制备少白细胞的方法。能 减除原全血中85%的白细胞，降低发热反应率。将采集的全血进行强离心，将血浆分入第2袋，将含有 一定量血浆及白膜层分入第3袋；再将第4袋的红细胞添 加液加入首袋与红细胞混合即为少白细胞的红细胞。1.血浆2.白膜层3.添加液 滤器过滤法：由于医用高分子工业的发展，促进了

9、输血器材 的改革。各种不同功能的滤器相继问世。目前常用的为第三代滤 器，具有较高的减除白细胞效果，一般可使白细胞降低至 1.0106/L1.0105/L。避免NHFTR及HLA同种免疫的发生 ，是最为有效的方法。 3、质量标准 手工法：（1）白细胞计数1.2109 /U。 （2）血细胞比容为0.650.75。（3）1U容量应为200ml10%。（4）血红蛋白不低于43g/U。（5）200ml全血分离出的红细胞为1U的少白细胞红细胞。 过滤法：（1）白细胞去除率高，达到99%以上，即白细胞残留量 小于5106/U。（2）减少有效细胞的损失，其回收率红细胞90%，血 小板85%。（3）去除白细胞过

10、程中，有效细胞不受到损伤和不丧失其生理活性。（四）洗涤红细胞 1.概述：洗涤红细胞是采用物理方式在无菌条件下将保存期内全血 、浓缩红细胞、悬浮红细胞等制品用大量静脉注射用生理盐水洗 涤，去除血浆和大部分白细胞，并将红细胞悬浮在生理盐水中制 成的红细胞成分。2.制备方法 （1）从冰箱中取出浓缩红细胞或悬浮红细胞，在室温放置3060分钟。 （2）将四联盐水袋主袋上的针头插入红细胞袋的进针座内，把主袋内200ml盐 水徐徐流入红细胞袋内，边加盐水边混合，混匀后再倒流回主袋内，将中间塑 料管用小夹子夹住。 （3）5个袋装于两个离心桶中，平衡好后，离心桶对称放入离心机内，以 4500r/min离心3分钟

11、。 （4）离心后将主袋轻轻取出，悬挂于支架上，把上清及白膜层分入曾经盛有红 细胞的袋内，然后热合并切断相连的管路，弃掉废液袋。 （5）重复24步骤，依次洗涤红细胞3次，用最后一袋盐水定量加入洗涤后的 红细胞内，调节体积。 （6）在调节好体积的第三袋中相连的塑料管内充满红细胞，分段热合留样本， 以供临床鉴定血型和交叉配型用。3.特点 手工洗涤去除80%一90%的白细胞和98%以上的血浆蛋白； 机器洗涤白细胞减至5108/L以下，几乎不含任何血浆蛋白。 该制品不仅可低白细胞引起的NHFTR反应，也可以减少或避免 血浆蛋白所致的过敏反应。 适应于自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输 血的

12、患者及对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体的患者。 洗涤后的红细胞均应在24小时内输用。4、质量标准(1)红细胞回收率70%。 (2)白细胞清除率80%。(3)血浆蛋白清除率90%。(4)1U容量125ml10%。(5)最后上清液血红蛋白0.5g/U。(6)血细胞比容为0.650.70。5.保存和运输国内规定在26保存，自制备时起，在24小 时内输注为好，运输时温度应在210。总之 ，从安全和疗效的角度，洗涤红细胞在洗涤后应 尽快输注。（五）冰冻解冻去甘油红细胞 1.概述：红细胞代谢速度取决于保存温度，把保存温度降至 红细胞代谢率几乎停止，以达到延长红细胞保存期的目的 。在冰冻过程中，为防止血液

13、结冰，破坏细胞内结构，可 加入防冻剂。细胞内防冻剂：甘油、二甲基亚砜细胞外防冻剂：羟乙基淀粉红细胞低温甘油保护剂 甘油（g/v）79.2%、葡萄糖（g/v ）8.0%、果糖（g/v）1.0%、EDTA2Na（g/v）0.3%，用 注射用生理盐水配成40%甘油应用液。 2.制备 【操作步骤】 (1)冻存 将红细胞转移至医用聚乙烯血袋内，然后在30分钟内缓慢 加入40%甘油保护剂，振荡混匀，室温30分钟后，直接置-80冰 箱冷冻保存。 (2)解冻 冰冻红细胞取出立即放入37恒温水浴箱，在10分钟内 融化，离心去上清甘油。 (3)洗涤 分别用9%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液洗涤第1次， 再用0.9

14、%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液分别洗涤第2次，最后 用0.9%氯化钠溶液洗涤第3次。洗涤完成后2U红细胞灌注100ml 生理盐水。由于冰冻红细胞在融化后，红细胞处于高渗状态，所以 必须先加入9%氯化钠溶液，使红细胞膜内外的渗透压达到平衡， 再分两次加入0.9%氯化钠溶液，使红细胞膜内的渗透压由高渗呈 梯度逐渐过渡到等渗。3、质量标准 (1)红细胞回收率80%。 (2)红细胞存活率70%。 (3)上清液中血红蛋白量1g/L。 (4)白细胞、血小板残留量1%。 (5)甘油残余量10g/L。 (6)体外溶血试验50%。 (7)冰冻红细胞容量200ml10%或400ml10%。4.特点：冰冻解冻去甘

15、油红细胞可以长期保存，一般 保存期为10年。常用于自身输血和稀有血型红细胞 的保存。 5.保存和运输：40%甘油的冰冻红细胞贮存在 65 以下，20%甘油的冰冻红细胞贮存在120 以下。解冻后红细胞贮存在26 ，保存期 24h。在冰冻状态下运输。（六）辐照红细胞 1.概述：输血相关性移植物抗宿主病（TA-GVHD）是指 免疫缺损或免疫抑制的患者不能清除输入血液中具有免 疫活性的淋巴细胞，使其在体内存活、增殖，将患者的 组织器官识为非己物质，作为靶目标进行免疫攻击，从 而导致的一种致命性输血并发症。2.制备：利用射线（r射线和X射线）辐照浓缩红细胞、悬浮红细胞 制品，损伤淋巴细胞细胞核的DNA而使其灭活和停止繁殖，达到 对免疫低下患者的保护作用。3.保存和运输：辐照后的红细胞最好尽快输用。保存温度1 6 。运输温度1 10 。三、白细胞制品 （1）手工制备法 白膜法 1)制备方法：用四联采血袋采集全血后，经过一次强离 心，血浆分入第2袋，白膜层分入第3袋；第3袋再次 轻离心，将富含血小板的血浆挤出，留在第3袋内的 即为白细胞浓缩液。2)主要缺点 由一个单位全血中分离的白细胞数量较少，为了满足治 疗剂量，每次需采集5-10名献血者的粒细胞，造成病 毒感染机会增多，白细胞抗原刺激产生的同种免疫反应 增多。 本制品含有较多的淋巴细胞，可能导致输