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1、疟原虫的镜下 形态及鉴别山东省寄生虫病防治研究所王用斌 公共邮箱: 登陆密码:jfs2353263授课内容1.厚、薄血膜中间日疟、恶性 疟各期疟原虫的形态结构及 其鉴别。 2.镜检示教。人体疟原虫的基本结构v疟原虫基本构造为细胞质(胞浆)、核和疟 色素这三要素。v1.细胞浆 被染成蔚蓝色或深蓝色,随着虫 体发育长大,细胞浆逐渐增多。vv2. 2. 核核 即细胞核或染色质粒。在正常情况即细胞核或染色质粒。在正常情况 下核呈下核呈鲜红色。鲜红色。vv3. 3. 疟色素疟色素 不着色,不着色,颜色和颗粒的形状,颜色和颗粒的形状, 因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色
2、素颗粒 呈短棒状,呈短棒状,黄褐色;黄褐色;恶性疟原虫的色素颗粒恶性疟原虫的色素颗粒 呈细砂状,呈细砂状,黑褐色。黑褐色。薄血膜中间日疟、恶性疟 各期疟原虫的形态结构特点薄血膜中常见的血液成分中 性 粒 细 胞嗜酸性粒细胞血小板单核细胞淋巴细胞红细胞薄血膜疟原虫形态间日疟 环状体 感染的红细胞:胀 大不明显,基本 正常。 虫体大小:较大, 约为红细胞直径 1/3。 胞浆:环状,浅蓝 色。 核:红色,一个, 偶有二个。 疟色素:无。约占寄生红细胞的1/3,很少见到一个红细胞 寄生2个环状体和一个环状体有2个核。 薄血膜疟原虫形态恶性疟环状体感染的红细胞:大小正常, 颜色较深。 虫体大小:较小,约
3、为红 细胞直径1/5-1/6。 胞浆:蓝色,环状纤细,有 时位于红细胞的边缘。 常见多个原虫同寄生于 一红细胞的现象。 核:红色一个,常有二个。 疟色素:无。恶性疟原虫-环状体环纤细,约为RBC直径的1/6,RBC不胀大 核1个,但2个常见,红细胞常含2个以上原虫薄血膜间日疟大滋养体形态感染的红细胞:胀大褪 色,出现形状大小相 等、分布均匀、数目 较多、鲜红色的薛氏 小点。 虫体大小:较大。 胞浆:不规则,浅蓝色 ,出现阿米巴伪足, 有空泡。 核: 红色,一个。 疟色素:有,细小杆状 ,黄褐色,分布不均 匀。间 日 疟 大 滋 养 体虫体不规则,较大; 阿米巴样空泡明显; 疟色素细小,黄褐色
4、。间日疟大滋养体恶性疟大滋养体受感染红细胞:大小正常 ,颜色较深,可出现较 粗、大小不一、分布不 匀、数目较少红色茂氏 小点。 虫体大小:较小。 胞浆:蓝色,圆形,坚实 ,体积小。 核:一个,红色。 疟色素:较细的黑褐色颗 粒,常集成块。 恶性疟大滋养体红细胞:胀大,褪色 ,可有薛氏小点。 胞浆:较不规则,空 泡小或消失,浅蓝色 。 核: 红色,分裂为二 个以上。 色素:黄褐色,分布 不均匀。间日疟未成熟裂殖体薄血膜疟原虫形态间 日 疟 未 成 熟 裂 殖 体恶性疟未成熟裂殖体红细胞:大小正常,颜色 较深,可有茂氏小点。 大小: 较小。 胞浆:规则,圆形或卵圆 形,蓝色。 核:分裂为二个以上,
5、红 色。 色素:黄褐色颗粒,常集 成黑褐色团块。间日疟成熟裂殖体红细胞:胀大,褪色,可见 薛氏小点。 大小:个体较大。 胞浆和核:裂殖子1224个 ,通常为1618个,排列 不规则,核红色,胞浆浅 蓝色。 疟色素:黄褐色,常集于疟 原虫的一边。间日疟裂殖体恶性疟成熟裂殖体红细胞:大小正常,颜色 较深,可见茂氏小点 。 大小:虫体较小。 胞浆和核:裂殖子832 个,通常为818个, 排列不规则,核红色, 胞浆蓝色。 色素:黑褐色,集中于中 央或一侧。恶性疟成熟裂殖体 v裂殖子832个,通常818个 ,排列不规则v疟色素集中成团块状v虫体占红细胞体积的2/3至3/4 薄血膜间日疟雌(大)配子体形态
6、形状大小:圆形或椭圆形 ,较大。 胞浆:深蓝色。 核:一个,较小,深红色 ,常偏于一边,核周可 见明显不染色带。 疟色素:黄褐色,均匀散 在,数目较多。间日疟原虫雌配子体间日疟雄(小)配子体形态形状大小:圆形, 虫体较大。 胞浆:浅蓝色。 核:一个,较大, 疏松,位于中央 ,浅红色,周围 有明显不着色带 。 疟色素:黄褐色, 散在分布。间日疟原虫雄配子体恶性疟雌(大)配子体形态形状:新月形, 两端稍尖。 胞浆:深蓝色。 核:一个,较小 ,致密,深红 色,位于中央 ,核周可见透 明不染色带。 疟色素:黑褐色 ,密布于核的 周围。薄血膜恶性疟雄(小)配子体形态形状:腊肠形,两端钝 圆。 胞浆:浅蓝
7、色或淡紫红 色。 核:一个,较大,疏松 ,位于中央,浅红色 ,核周可见不染色带 。 疟色素:黑褐色,松散 分布于核周围。将(未)成熟雌配子体与成熟大滋养体(核分裂前,刚要进入裂殖体前期)的形态鉴别虫体大小:几乎充满被寄生的红 细胞v核:一个,较大且致密,周 围有一圈空白的不染色带v胞浆:边缘清楚,不含空泡v疟色素:颗粒较多较粗,均 匀散在虫体大小:不超过被寄生红细胞 的3/4v核:一个,延长呈带状,周 围无明显的不染色带v胞浆:边缘不整齐,多有空 泡v疟色素:颗粒较少较细,分 布不均匀厚血膜中间日疟、恶性疟 各期疟原虫的形态结构特点厚血膜中疟原虫的形态厚血膜由于 用血量较多, 涂制的血膜小 ,
8、红细胞重叠 且干燥慢,致 使虫体皱缩, 空泡消失,胞 浆变形,各期 疟原虫的体积 都略微缩小, 其中只有大、 小滋养体的形 态有较大改变 ,而裂殖体和 配子体的形态 则无明显变化 。厚血膜环状体体形态环状体: 胞浆呈 环状或向核的一 侧或两侧收缩, 使环的中间断裂 ,或围绕核。间 日疟原虫的环较 大,常呈分号“;” 和感叹号“!”状; 恶性疟原虫的环 纤细,常呈冒号“ :”、飞鸟“.” 、V状和断环状。 间日疟小滋养体恶性疟小滋养体厚血膜间日疟大滋养体形态间日疟大滋养体呈 阿米巴样运动,胞浆 常断裂几块或缩成圆 形,核和疟色素均被 包在胞浆之中,着色 深,只隐约可见红色 的核和黄绿色的疟色 素
9、。胞浆可皱缩断裂 成几个块状,大小不 一,似互不连接。核 位于胞浆之中或外边 。疟色素分布不均匀 。有些仅见胞浆和疟 色素而核看不清楚。 大滋养体厚血膜恶性疟 大滋养体形态恶性疟原虫大滋 养体与薄血膜形 态相似,常呈圆 形,体小结实, 疟色素细小,金 黄色,结成块状 后,呈黑褐色。大滋养体厚血膜裂殖体形态v裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前 期及成熟裂殖体,除虫体略微缩小着色较深 外,均与薄血膜相似。 恶性疟裂殖体厚血膜间日疟配子体形态v间日疟原虫的配子 体呈圆形或卵圆形 ,除虫体略缩小且 着色深外,均与薄 血膜相似。雄配子 体核大,疏松,圆 形或呈星状,胞浆 较少,着色淡,疟 色素颗粒
10、大,数量 较多,散在分布。v雌配子体与圆形成 熟的大滋养体相似 ,但配子体疟色素 颗粒粗大,多而散 在分布。厚血膜恶性疟配子体 形态配子体呈新月形或 腊肠形,如血膜干 燥较慢,则可缩成 圆形,核居中,疟 色素围在核周,外 围一圈胞浆。此外 ,还可见配子体的 胞浆部分或全部消 失,只留下核和疟 色素,或核和胞浆 均消失,只留下一 些疟色素。 恶性疟原虫厚血膜厚薄血膜的优缺点及适用范围薄血膜:用血量少1-1.5ul,疟原虫的形态完 整,便于疟原虫虫种的鉴定。为保证检测的 敏感性,常耗时较多,不适用于大规模调查 ;常出现漏诊。 厚血膜:用血量较多4-5ul,疟原虫胞浆和核 有一定程度的固缩,较难识别
11、;但须查范围 小,节省时间,阳性检出率较高。讲义43页倒数第二行厚血膜用 血量10ul-20ul错误,应更正为4- 5ul。1.红细胞通 常胀大 2.薛氏点明 显 3.成熟环状 体粗大4.滋养体有 阿米巴样 伪足5.可见不同 发育期的 原虫间日疟(P. vivax )鉴定要点1.环状体钎细, 红 细胞不涨大 2.一个红细胞内 可有几个环状 体 3.环状体内可有2 个核 4.环状体可贴在 红细胞边缘 5.血片中没有其 他发育期滋养 体 6.配子体呈新月 形或腊肠形 7.可出现茂氏点恶性疟(P.falciparum)鉴定要点三日疟(P.malariae)鉴定要点1.环状体可呈 方形 2.带状形大滋
12、 养体是其 特点 3.成熟裂殖体 呈菊花状 ,内含6 12个裂殖 子 4.红细胞不胀 大,略缩 小 5.有时有西门 氏点卵形疟(P. ovale)鉴定要点1. 红细胞略胀 大或不变大 2. 红细胞边缘 呈车轮状3. 环状体有时 呈现鱼眼状4. 薛氏点明显 5. 成熟裂殖体 呈菊花状, 类似三日疟 原虫,但更 粗大6. 原虫呈卵圆 形 疟原虫与其它物体的鉴别v白细胞残骸和幼稚红细胞残骸白细胞破裂后散出的颗粒,易误认 为环状体的核,但看不到胞浆;白细胞 残骸和幼稚红细胞残骸常为蓝色,与疟 原虫胞浆相似,有时与其它红点或与血 小板巧合在一起,容易误认为疟疾原虫 。鉴别时如果形同大滋养体,可根据疟 色
13、素来鉴别;如形同环状体,可根据虫 体大小、折光是否均匀、核与胞浆是否 在同一平面,其它视野内有无疟疾原虫 等仔细分析判定。v灰尘和染色液的色素沉着灰尘和染色液的色素沉着在血膜的 表面上时,易被误认为是疟色素,可依 据其颗粒的形状、大小、色泽、有无核 与胞浆的结构来鉴别也可转动显微镜的 微调,看是否在同一水平面上。v细菌细菌尤其是球菌在厚血膜中常被染成红色小点 ,与疟原虫的核相似,最易混淆。球菌形体较大 ,边缘光滑,且与红细胞不在同一平面。v水中原虫水中原虫有时也可看到核、胞浆和空泡,与间 日疟大滋养相似,但无疟色素,而空泡多如网眼v植物种子有很清晰的厚薄一致的边界,染色较深、无疟 色素,也看不到核,且有柄脱落时的痕迹小结:血片镜检中 鉴定是否为疟原虫的五条原则1、疟原虫要有核有浆(红核蓝浆)。 2、疟原虫各期(除环状体外)均含有疟色素 。 3、疟原虫自然形态要像;疟原虫呈半透明状 态,模糊一团不透明者不是。 4、体积最大的疟原虫也不能超过中性粒细胞 大。 5、数量极少,似是而非者判为可疑,应重新 选择时机多次制片、多次检查,结合临床并 交上级大夫鉴定或行药物试治。镜检要求v1.师资培训:一定掌握,负责培训乡镇v2.牢记三要素:红核、蓝浆、疟色素v3.厚血膜要求:至少能认出疟原虫,可不分 种、期;最好能进行计数v4.薄血膜要求:能分出虫种、期