免疫实验室基础常识

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1、免疫实验室基础常识 免疫学检测方法的简介基本原理 免疫学检测方法的应用 抗原、抗体的定义 免疫室检测的项目 感染性疾病检查项目 细胞、体液免疫检查项目 肿瘤标志物电化学发光检测项目 自身免疫性疾病检查项目*1免疫学检测方法的简介n 方法 原理n免疫间接凝集方法 RBC、乳胶颗粒+Ag n免疫 沉淀反应方法 琼脂板+Ab n酶免疫分析技术（EIA） HRP+Ag或Abn放射免疫方法（RIA） I*125+Ag或Abn免疫光散射比浊分析 Ag+Ab=CIC、微粒+Agn免疫胶体金检测方法 胶体金+抗人IgGn免疫荧光显微镜方法 FITC+抗人IgGn化学发光免疫分析技术 ABEL+抗CEAn电化学

2、发光免疫分析技术Ru（bpy）3* +抗AFP Date2免疫学检测常用的基本技术n凝集方法 MP-IgM、TPPA、Widal、Weil-Fn ASO、RF、CRP、冷凝集实验等n 沉淀方法 IgG、A、M、C3、C4、CRP、等n酶联方法 病毒抗体IgG、IgM及蛋白抗原n放射方法 肿瘤标志物等n光散射比浊方法 Ig、ASO、RF、微量蛋白n胶体金方法 TB-Ab、HBsAg、HCG、LP-IgMn荧光显微方法 自身抗体、呼吸道V-IgM等 n化学发光技术 肿瘤标志、甲状腺功能、n电化学发光技术 肝炎标志、性腺分析等Date3免疫学检测常用的基本技术n 现代常用的免疫方法n酶免疫分析、荧光

3、免疫分析、光散射比浊分析 、化学发光技术、电化学发光免疫分析技术、 仪器方法。还有凝集、沉淀、金标记等方法。 性激素、细胞因子、肿瘤标志、免疫球蛋白等 ，都为标准曲线定量方法。以上检测都可视为 抗原抗体反应的方法。抗原抗体的内容、免疫 的基本概念还需复习一下，以便更充分了解免 疫实验检测的基本原理。Date4抗原与抗体n一. 抗原、抗体的定义1n1. 抗原的定义n(1) 凡是能够刺激机体免疫系统产生抗体的免疫物 质、并能在体内外与抗体发生特异性结合反应的物 质称为抗原。n(2)抗原指能与T细胞的TCR何B细胞的BCR结合，促 使其增殖、分化、产生抗体或致敏淋巴细胞，并能 与之结合，发挥免疫效应

4、的物质。n（3）抗原两个特性：免疫原性、抗原性。n2. 医学上重要的抗原2na. 病原微生物：细菌、病毒、立克次氏体。(表 面抗原、核心抗原、鞭毛抗原等)Date5抗原与抗体na. 自身抗原：n一般自身组织对机体自身没有抗原性，但在外伤、感 染、电离辐射、药物等影响下可以发生变性成为自身 抗原，刺激机体产生免疫反应引起自身免疫性疾病， ANA.dsDNA等。na.肿瘤抗原：如AFP、CEA、PSA等。nb.同种异体抗原：红细胞血型抗原、白细胞抗原（人 类白细胞抗原又称HLA）等等。n 2 抗体的定义：n （1） 抗体是机体在抗原物质刺激下所形成的一类具 有与抗原发生特异性结合反应的球蛋白。Da

5、te6n（2）抗体是介导体液免疫的重要分子， 是指B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞 所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等 体液中。能与抗原特异性结合，具有免疫 功能。n（3）Date7抗原与抗体nl 抗体产生的一般规律n抗原刺激机体后可产生免疫球胆白G 、A、M。一般2-3周后才有抗体产生 ，其出现顺序；IgM最早,但消失也 快,在血液中只维持数周至数月。（ 所以临床检测IgM抗体利于早期诊断 ）IgG出现稍迟于IgM，当IgM接近消 失时，IgG达高峰阶段，它在血液维 持时间较长可达数年之久。IgA继 IgM和IgG后出现。Date8抗体的基本内容n用电泳的方法可将血清或血浆蛋白分离成白蛋白

6、和球 蛋白两个组分。大多数抗体位于r球蛋白区域内。抗 体的另一个常用名为免疫球蛋白（Ig），意为r球蛋 白中与免疫相关的组分。n抗体在血液中检出，但它在其他部位存在；细胞质内 质网和高尔基体的膜和B淋巴细胞膜上、NK细胞和肥 大细胞的细胞膜上、组织液和血浆中、还在乳汁和分 泌液中。n抗体分类；IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。nIgG亚类IgG1-4、IgA亚类1-2Date9抗体的基本内容n抗体的功能n对有害因子，如毒素、药物、病毒、细菌、和其它寄生虫可通过 与特出细胞受体结合而造成机体的损害，而分泌抗体可通过与其 结合了阻止与响应受体结合，起到了中和作用。nIgG的调理作用促进吞噬细

7、胞对抗原的吞噬。nIgG、IgE和IgM介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用。（NC 、MC、NK细胞）nIgE所介导的超敏反应nIgA介导的粘膜免疫n母体的IgG介导的新生儿免疫Date10应用抗原抗体结合原理检测的项目 n感染性疾病检测项目n肝炎病毒筛查：A、B、C、D、E、G、TTV、CMVn呼吸道病原体筛查：EB、AD、CB、RSV、MP、CPn感染性疾病检查项目：Uu、CT、NG、USR.TPPA、HIVn自身免疫性疾病项目 n免疫全项 ：ANA、ds-DNA、AMA、ANCA、ENA、Ig.C3、C4、CRP、 ASO、RF、CIC n肝病自身抗体 ：ANA、ds-DNA、SMA、

8、AMA、LKM、SLA可溶性 肝 抗原、LC1抗肝溶质型抗原 n自身抗体 ：ANA、ds-DNA、AMA、ANCA、ENA n肾病自身抗体：ANA,ds-DNA,GBM,ANCN.ENAn糖尿病自身抗体 ：IAA、ICA、GAD Date11应用抗原抗体结合原理检测的项目n电化学发光定量分析仪检查项目 参考值nAFP 肝 25%前列腺癌可能性小 （ 0.75ng/mL/ 年，前列腺癌可能性增加。Date45n 12.血清铁蛋白（SF）是一种储铁蛋白。uSF升高见于肺癌、胰癌、白血病、肝脏疾病。uSF减低见于缺铁性贫血、大量失血、长期腹泻 。Date46部分肿瘤标志物的阳性顺序项目名称主诊阳性顺

9、序CA50广谱胰、肝、卵巢、肠、胃、肺CA125卵巢卵巢、胰、肺、乳、肠CA15-3乳房乳房CA19-9消化道胰、胆、胃、肠MGAg/CA72 4胃胃、肠、肺、乳SCC/CYFR A211鳞癌肺、食道、上颚、宫颈、皮肤n Date47肿瘤标志物检测图谱十 肿瘤标志物检测图谱癌肿部位肿瘤标志物选择顺序 肝AFP CEA SF结直肠CEA CA19-9 CA242 CA50 胰腺CA19-9 CA242 CEA CA50 胃MGAg CA724 CEA CA19-9 食道SCC 肺 NSE CYFRA21-1 SCC CEA 乳房CA15-3 CA125 CEA 卵巢CA125 -HCG CEA

10、AFP 子宫SCC SF -HCG 前列腺fPSA PSA 甲状腺HTG CEA CA19-9 血液病SF 2-MGDate48自身抗体的分类及命名 1、以抗体在细胞或组织中存在的位置进行命 名：ANA、 AMA、LKM等。 2、以靶细胞或靶组织进行命名：抗骨骼肌抗体、抗胰岛细 胞抗体等。 3、以首先被检测到该抗体的患者名字的缩写进行命名：抗 Sm、抗Ro、抗La等。 4、以相关疾病的名字的缩写进行命名：抗Scl-70、抗SS-A 、抗SS-B等。 5、以抗原的化学性质进行分类命名：抗RNP、抗ss-DNA、 抗dsDNA等。*49自身免疫性疾病项目u免疫全项 ：ANA、ds-DNA、AMA、

11、ANCA、 ENA、IgC3、 C4、CRP、ASO、RF、CIC u肝病自身抗体 ：ANA、ds-DNA、SMA、AMA 、LKM、SLA可溶性 肝抗原、LC1抗肝溶质 型抗原 u自身抗体 ：ANA、ds-DNA、AMA、ANCA、 ENA u肾病自身抗体：ANA,ds-DNA,GBM,ANCN.ENAu糖尿病自身抗体 ：IAA、ICA、GAD Date50自身抗体与相关疾病 标志抗体 相关疾病平滑肌抗体(SMA) I 型自身免疫性肝炎肝肾微粒体抗体(LKM-1) 型自身免疫性肝炎可溶性肝抗原抗体（SLA抗体） 型自身免疫性肝炎线粒体抗体2型(M2) 原发性胆汁性肝硬化(PBC)肾小球基底膜(GBM)抗体 肺出血肾炎综合征中性粒细胞胞浆抗体(ANCA) 多种系统性血管炎双链DNA抗体 系统性红斑狼疮Sm抗体 系统性红斑狼疮SSA-B抗体 干燥综合征Scl-70 进行性系统性硬化症Jo-1抗体 多发性肌炎皮肌炎高滴度RNP抗体 混合性结缔组织病*51