“瘦肉精”监测技术要点及注意事项

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1、“瘦肉精”监管关键点控制*1中国动物卫生与流行病学中心中国动物卫生与流行病学中心赵思俊n瘦肉精?n瘦肉精与兽医工作的关系?n“瘦肉精”监管关键点控制*2“瘦肉精”?n“瘦肉精”最初是盐酸克伦特罗的俗称1964年由美国氰胺公司首次合成,作为一种治 疗呼吸道疾病的药物。20世纪80年代初,美国研究人员意外发现盐酸 克伦特罗可以促进动物机体蛋白质合成和肌肉 组织生长,减少脂肪尤其是皮下脂肪的沉积, 从而提高瘦肉率和饲料转化率。之后,美国开 始将其用于畜禽养殖,并逐渐推广到世界其他 国家,并于20世纪80年代末传入我国。*3*4盐 酸 克 伦 特 罗专 指泛 指泛指养殖业非法使用的 具有促进动物生长、

2、提高 瘦肉率的含-肾上腺能 受体激动剂类的一类物质我国禁止瘦肉精的种类n第176号公告(二二年二月九日)n第193号公告(二二年四月九日)n第235号公告(二二年十二月二十四日)n第1519号公告(二一年十二月二十七日)*5n第176号公告:盐酸克伦特罗、沙丁胺醇 、硫酸沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸多 巴胺、西马特罗、硫酸特布他林n 第193号公告:克仑特罗、沙丁胺醇、 西马特罗及其盐、酯及制剂 n第235号公告克仑特罗、沙丁胺醇、西马 特罗及其盐、酯及制剂*6n第1519号公告苯乙醇胺A、班布特罗、盐酸齐帕特罗 、盐酸氯丙那林、马布特罗、西布特罗 、溴布特罗、酒石酸阿福特罗、富马酸 福莫特罗、

3、盐酸可乐定、盐酸赛庚啶*7*8其他n赛庚啶:抗组胺药物,H1受体拮抗剂, 也是5-羟色胺受体拮抗剂,可在下丘脑 食欲中枢拮抗5-羟色胺,具有刺激食欲 的功能,以达到促进动物增重的作用。n可乐定:一种抗高血压药物,肾上腺素 能2-受体激动剂 ,通过促进下丘脑生 长腺素神经元合成和释放生长腺素,从 而调调控生长长激素的分泌,从而促进动 物 生长。 *9瘦肉精与兽医工作?兽医工作的主要内容?*10动物卫生监督工作的主要内容?OIE世界动物卫生组织n-向各国政府通告全世界范围内 发生的动物疫情以及疫情的起 因,并通告控制这些疾病的方 法。n-在全球范围内,就动物疾病的 监测和控制进行国际研究。n-协调

4、各成员国在动物和动物产 品贸易方面的法规和标准。*11OIE发展的新趋势近几年来,增加了动物福利、抗生素耐药 性监测、食品安全的内容专门成立了食品安全工作组加强了与FAO、WHO、CAC等国际组织在 有关动物产品质量安全安全方面的合作*12我国新时期对兽医工作的定位:“以有效控制动物疫病和保障动物产品质 量安全为目标,着力推动实现动物疫病 从有效控制到逐步根除的质的跨越,着 力推动实行动物产品质量安全全过程监 管 确保动物产品生产供应安全、动 物产品质量安全和公共卫生安全,” (全国兽医事业发展十二五规划)*13*14兽医工作动 物 产 品 供 给动 物 产 品 安 全公 共 卫 生 安 全动

5、物卫生监督机构目 标动 物 防 疫 法农 产 品 质 量 安 全 法食品安全法中央编办发【2010】105号“农业部牵头负责“瘦肉精”监管工作,负 责生猪养殖、收购、贩运、定点屠宰环 节对“瘦肉精”的检验、认定和查处”*15国务院食安办印发了“瘦肉精”专项 整 治方案食安办【2011】14号 开展了“瘦肉精”源头整治、养殖环节 、 收购贩 运环节 、屠宰环节 等7个环节 的 整治工作农业部文件n农业部关于深入推进“瘦肉精”专项整治工作 的意见(农牧发【2011】12号)n农业部关于加强生猪定点屠宰环节“瘦肉精” 监管工作的通知(农医发【2011】18号)进一步明确了畜牧兽医主管部门对“瘦肉 精

6、”的监管职责*16如何做好“瘦肉精”监管工作?n依法、合法n工作到位,不出位、不越位*17检 测 监督抽检立案查处“瘦肉精”监督抽检n可靠检测试剂n适宜的场所n科学的检测流程*18样品的抽取现场筛选阳性确证正确的抽样方式具有资质的检测机构移送公安机关样品抽检*19农产品质量安全监测管理办法2012年明确规定:n第二十一条:抽样人员在抽样前应当向被抽样 人出示执法证件或工作证件。具有执法证件的 抽样人员不得少于2名。n抽样人员应准确、客观、完整填写抽样单。加 盖抽样单位印章,并由抽样人员或被抽查人签 字或捺印;被抽查人为单位的,应加盖被抽查 人印章或由其工作人员签字或捺印。*20农医发【2011

7、】18号n样品抽样方法:猪肉、猪肝、猪尿抽 样样方法NY/T763-2004n检测方法、限量标准、确证方法按照国 家和农业部有关规定n阳性样品的确证:由省级兽药监察机构 、农产品质量安全检测机构或省级畜牧 兽医主管部门指定的有资质的检测机构 承担*21胶体金检测试纸条ELISA试剂盒液质联用仪气质联用仪“瘦肉精”检测筛选确证检测 方法灵敏度检测 时间保存 条件测试 对象技术 要求假阳 性率检测 成本其他胶体金 试纸条2-5 g/kg5-10 min4-30尿样、 组织操作简 便较高低 酶联免 疫试剂 盒0.05- 0.2 g/kg1.5-2 h2-8尿样、 血清、 组织、 饲料等操作相 对复杂

8、 、需简 单培训较低较低 气相色 谱-质谱 联用法0.5 g/kg1天全部样 品需系统 知识、 技术培 训确证方 法高需衍生 化液相色 谱-质谱 联用法0.05 g/kg1天全部样 品需系统 知识、 技术培 训确证方 法高不需衍 生化*23标准文号公告名称1SN/T 1924-2007进出口动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他 林残留量的检测 液相色谱-质谱/质谱法2农业部公告2007958号 动物源食品中莱克多巴胺残留量的测定 高效液相色谱法-质谱法3农业部公告2007958号动物组织及动物尿液中莱克多巴胺残留检测方法 气相色谱-质谱法4农业部公告20081025号 动物性食

9、品中莱克多巴胺残留检测 酶联免疫吸附法5农业部公告20081025号猪尿中-受体激动剂多残留检测 液相色谱串联质谱法6农业部公告20081025号动物源性食品中-受体激动剂残留检测液相色谱串联质谱法7农业部公告20081031号猪肝和猪尿中-受体激动剂残留检测气相色谱质谱法8农业部公告20081063号动物尿液中11种受体激动剂的检测 液相色谱串联质谱法9农业部公告20081063号饲料中13种受体激动剂的检测 液相色谱串联质谱法10农业部公告20081063号饲料中8种受体激动剂的监测 气相色谱质谱法11农业部公告20101486号饲料中苯乙醇胺A的测定 高效液相色谱-串联质谱法 12GB/

10、T 5009.192-2003动物源食品中克伦特罗残留量的测定13GB 21313-2007动物源性食品中-受体激动剂残留检测方法 液相色谱-质谱 质谱法14GB-T22286-2008动物源性食品中多种-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质 谱法15GB/T 22147-2008饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定 液相色谱质 谱联用法16NY/T 468-2006 动物组织中盐酸克伦特罗的测定 气相色谱-质谱法*24农业部审查、备案制度n自2005年10月起,农业部对快速筛选试 剂盒、胶体金试纸条实行了审查、备案 制度,对符合相关规定的酶联免疫检测 试剂盒、胶体金试纸条准予备案

11、,允许 生产和用于全国兽药残留监控计划的检 测。(农业部公告第558号)*25快速筛选检测试剂农业部公 告号公告名称网址第1483号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 910.htm 第1432号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 263.htm 第1387号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 026.htm 第1344号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 628.htm 第1260号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 982.htm 第1172号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 938.htm 第1098号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 729.htm 第1

12、044号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 761.htm 第964号兽药残留检测试剂盒备案目录http:/ 801.htm 第797号关于克伦特罗酶联免疫试剂盒 质量标准等http:/ 866.htm 第558号关于准予克仑特罗等14种酶联 免疫检测试剂盒备案的公告http:/ 972.htm*26农业部有关兽药残留检测试剂盒备案的相关规定如何筛选出符合要求的检测试剂?如何筛选出符合要求的检测试剂?胶体金试纸条筛选考核指标:n灵敏度n重复性n稳定性n交叉反应性n假阴性率n假阳性率n与液相色谱质谱联用仪比较胶体金试纸条n保存条件室温(25左右最好),不宜暴晒和冷藏、冷冻n测试过程试纸条从包

13、装撕开取出后,请尽快测试,时间不宜过长 ,一般应在1 h内检测完成;滴加尿液并非越多越好,实际滴加量请按说明书执行, 一般以100 L为宜;加样后一般观察时间为510 min。结果判定n阳性:C线显色,T线不出 现红色条带,判为阳性n阴性:C线显色,T线出现 红色条带,判为阴性n无效: C线不显色,判为 无效1.1.空白样品空白样品 2.2.标准溶液标准溶液 克伦特罗,纯度为98.5% 莱克多巴胺,纯度为97.0% 沙丁胺醇,纯度为99.5% 3.3.标准溶液配置标准溶液配置均购自德国Dr. E公司标 准 品称取适量标准品分别于10mL棕色容 量瓶中,甲醇定容,稀释成1000 g/mL 的标准

14、储备液。分别吸取适量标准储备液至100ml容 量瓶中,用纯水定容,稀释成200g/L ,放于4冰箱中保存备用。生猪屠宰场采集并经LC-MS/MS法 检测为不含待测物的空白猪尿。 -20保存备用序号序号测试药物测试药物测试药物浓度(测试药物浓度(g/Lg/L)1盐酸克伦特罗0,2,3,5,8,10,152莱克多巴胺0,3,5,8,10,15,203沙丁胺醇0,4,5,8,10,15,20根据试纸条所标注的灵敏度及预实验结果, 每种试纸条选择7个浓度(n=6)进行敏感性和重 复性测试,并进行批内重复试验(n=3)和批间 重复试验(n=3)各检测试纸条灵敏度、重复性测试浓度灵敏度、重复性测定*34稳定性n2-8和室温保存性试验试验n37和-20老化试验试验n 将待测的3类胶体金检测试纸条在60的烘箱中保存(根据报道,胶体金免疫检测试纸条60条件下保存一天,相当于常温保存一个半月,以此类推。),分别于第2、4、8天后取出(分别相当于常温保存3、9、12个月),选择不同浓度的猪尿添加样品进行试验( n6 )。试纸条种类测试药物浓度(g/L)盐酸克伦特罗莱克多巴胺沙丁胺醇盐酸克伦特罗20、5020、50莱克多巴胺20、5020、50沙丁胺醇20、5020、50选择两个浓度的含结构相似物 的猪尿添加样品进

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