亚硝酸盐中毒模型的建立及定性检验

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1、 内科实验三亚硝酸盐中毒模型的建立及定性检验1亚硝酸盐中毒病因:亚硝酸盐系硝酸盐在细菌的作用下 还原为氨过程的中间产物各种鲜嫩青草、作物秧苗以及叶菜等富 含硝酸盐硝化细菌广泛分布于自然界,最适宜的 生长温度为20-40之间2亚硝酸盐中毒发病机制使血中正常的氧合血红蛋白迅速地氧化 成高铁血红蛋白(变性血红蛋白)从而丧失了血红蛋白的正常携氧功能。 通常是30%的血红蛋白被氧化成高铁血 红蛋白时呈现临床症状。3亚硝酸盐中毒症状与病理变化采食后15分钟至数小时内发病,称“饱 潲瘟”。呼吸困难、脉搏疾速细弱,全身 发绀,躯体末梢部们厥冷。耳尖、尾端 的血管中血液量少而凝滞,在刺破或截 断时仅渗出少量黑褐

2、红色血滴。病病猪 尸体腹部多较膨滿,口鼻呈乌紫色。4亚硝酸盐中毒诊断根据患畜病史,结合饲料状况,和血 液缺氧为特征的临床症状,可作为诊断 的重要依据。为确立诊断,可在现场做 亚硝酸盐简易检验。5亚硝酸盐中毒解救 氧合血红蛋白白色美蓝 辅酶 美蓝变性血红蛋白6一、亚硝酸盐定性检验格里斯法 :本法是亚硝酸盐检验的 特效反应方法 。 (一)原理:亚硝酸盐使对氨基苯磺酸重 氮化后,再与萘胺起偶氮反应,生 成紫红色染料。(二)试剂:1.对氨基苯磺酸溶液:72. 萘胺(甲萘胺)溶液:取盐酸萘胺1.25克溶解于187.5毫 升水与62.5毫升冰醋酸中,储于有色瓶 中备用。8(三)检材胃内容物、呕吐物、剩余饲

3、料中亚硝 酸盐的提取:取上述检材10到20克加适 量蒸馏水调成糊状,过滤,滤液若有颜 色,可用活性炭脱色。血清:静脉采血后离心沉淀,分离血 清备用。9(四)操作:取滤液(或血清)1到2毫升于试管中加 对氨基苯磺酸溶液及萘胺溶液各数 滴,如有亚硝酸盐立即出现紫红色。101、正常实验动物全身状况观察(呼吸、粘 膜、血管、心博等)2、中毒模型的建立(5%亚硝酸钠8ml、口 服) 3、中毒症状的观察(时间、症状),同时准 备好急救药物(1%美兰:0.5ml1ml、静 注) 4、收集病料(胃内容物和血液) 5、病料的处理(过虑、离心) 6、病料的亚硝酸盐定性检查11氢氰酸中毒病因家畜采食含氰甙配糖体的青

4、饲料,在 胃内由于酶和水解胃液盐酸的作用,产 生游离的氢氰酸,而发生中毒。如木薯、高粱及玉米的新鲜幼苗12氢氰酸中毒发病机制:氢氰酸能抑制许多酶的活动,特别是 氰离子能迅速与氧化型细胞色素氧化酶 的三价铁结合,并阻碍其被细胞色素还 原为还原型细胞色素氧化酶。结果失去 了传递氧作用。破坏组织内氧化过程, 阻止组织对氧的吸收作用。13氢氰酸中毒临床症状、病理变化表现为先兴奋,后抑制,呼吸麻痹。采食后1520分钟发病。胃肠粘膜和浆膜出血,气管有大量泡 沫状红色血液,胃内容物有苦杏仁味。14氢氰酸中毒诊断饲料中毒时吃得越多死得越快,根据 病史、病因、临床症状作初歩判断。根 据血液颜色与亚硝酸中毒相区别

5、。最后 确诊可进行毒物分析。15二:氢氰酸及氰化物定性检验普鲁士兰法:本法是检验氰化物的特效 反应方法,灵敏度高(1:50000)。 原理:检材中的氰化物遇酸分解出氢氰酸,氰 离子在碱性溶液中与亚铁离子作用,生 成亚铁氰化钠(钾),在酸性溶液中与 高铁离子化合,生成亚铁氰化铁(普鲁 士兰)。16(二)试剂:1.20硫酸亚铁溶液(新配制)2.10氢氧化钠(钾)溶液3.5三氯化铁溶液4.10盐酸17(三)检材:胃内容物、呕吐物、剩余饲 料、血液,为最好的检材。而富含血液 的内脏如:肺、脑、肝等亦可作检材。18操作:取检材5到10克切碎,置于三角 瓶中,加适量水调成糊状,加入几滴 10%的盐酸。取滤纸一小方块在其上滴 加20硫酸亚铁2滴及10氢氧化钠( 钾)2滴,将此滤纸覆盖三角瓶口。19在瓶底缓缓加热,候有蒸汽上冒,取下 滤纸,在滤纸上滴加10%的盐酸及5三 氯化铁,若出现兰色斑或兰绿色斑者, 表示有氰离子的存在,前者含量较多, 后者含量较少。有时反应不明显,须放 置12小时后,兰色反应才出现。20THANK YOU !21

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