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1、微生物知识培训时间：5月21日 上午9:00-12:00 下午13:00-14:00微生物的定义l微生物（microorganism, microbe）是一些 肉眼看不见的微小生物的总称。l微生物按其结构、化学组成及生活习性等差 异可分成三大类：真核细胞型、原核细胞型 、非细胞型。 l微生物的特点：体积小，面积大；吸收多， 转化快 ；生长旺，繁殖快；易变异，适应强 。真核细胞型： l真菌：真菌的种类很多，约有12万余种，分 别归于霉菌、酵母及蕈（xn）菇（伞菌、 食用菌）中。原核细胞型 l原核生物即广义的细菌，指一大类细胞核无 核膜包囊，只存在称作核区的裸露DNA的原 始单细胞生物包括真菌核古
2、生菌两大类。l原核微生物的7种类型：细菌（狭义），放 线菌，蓝细菌，支原体，立克次氏体，衣原 体，螺旋体。 非细胞型l非细胞型微生物是结构最简单和最小的微生 物，它体积微小，能通过除菌滤器，没有典 型的细胞结构，无产生能量的酶系统，只能 在宿主活细胞内生长增殖的微生物。这种微 生物仅有一种核酸类型，即由DNA或RNA构 成核心，外披蛋白质衣壳，有的甚至仅有一 种核酸不含蛋白质，或仅含蛋白质而没有核 酸。如病毒(virus)、亚病毒(subvirus)、朊粒 (prion)。 微生物生长所需营养l水：生物体最重要的组成部分 ；l碳源：淀粉、糖类、醇、脂肪、高级石腊等有 机物；是构成细胞的重要物质
3、 。l氮源：含N物质如铵盐、硝酸盐、氨基酸、胶胨 及蛋白质等；是组成蛋白质和核酸的重要元素 。l无机盐：无机化合物中的盐类，旧称矿物质， 在生物细胞内一般只占鲜重的1%至1.5% ；l生长因子：微生物生长不可缺少的微量有机物 叫做生长因子，主要包括维生素、氨基酸和碱 基等，它们一般是酶和核酸的组成成分。微生物的生长细菌群体生长规律 生长曲线在不补充营养物质或移去培养物 ，保持整个培养液体积不变条件 下，以时间为横坐标，以菌数为 纵坐标，根据不同培养时间时细 菌数量的变化，可以作出一条反 映细菌在整个培养期间菌数变化 规律的曲线。生长曲线可分：延滞期对数期 稳定期 衰亡期 延滞期l将少量菌种接入
4、新鲜培养基后，在开始一段 时间内菌数不立即增加，或增加很少，生长 速度接近于零。也称延迟期、适应期。l特点：分裂迟缓、代谢活跃。对数期l以最大的速率生长和分裂（繁殖方式一般为 无性繁殖，以二分裂方式增加细菌数目）， 细菌数量呈对数增加；l特点：细菌内各成分按比例有规律地增加， 表现为平衡生长。稳定期l由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环 境变化，逐步不适宜于细菌生长，导致生长 速率降低直至零(即细菌分裂增加的数量等于 细菌死亡数量)，结束对数生长期，进入稳定 生长期。衰亡期l细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶， 产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶 、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态
5、， 有时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏 染色反应阳性菌变成阴性反应等。l特点：该时期死亡的细菌以对数方式增加， 但在衰亡期的后期，由于部分细菌产生抗性 也会使细菌死亡的速率降低。 微生物生长繁殖的控制l基本概念：l防腐：在某些化学物质或物理因子作用下，能防止 或抑制微生物生长的一种措施；l消毒：利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有 病原微生物的一种措施；l灭菌：指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的 所有微生物的一种措施；l化疗：利用具有选择毒性的化学物质如磺胺、抗生 素等对生物体内部被微生物感染的组织成病受细胞 进行治疗，以杀死组织内的病原微生物或病变细胞 ，但对机体本身无毒害作用的治
6、疗措施。一、控制微生物的化学物质l抗微生物剂:是一类能够杀死微生物或抑制微 生物生长的化学物质 。l根据它们抗微生物的特性可分为： 抑菌剂 杀菌剂 溶菌剂 作用机理是这类物质结合到核糖体上抑制蛋白质合成，导 致生长停止，由于它们同核糖体结合不紧，它们在浓度降 低时又会游离出来，核糖体合成蛋白质的能力恢复，使生 长恢复 它们是紧紧地结合到细胞的作用靶上，即使在浓度降低时 也不能游离出来，因此生长不能恢复 能抑制细胞壁合成或损伤细胞质膜 抗微生物剂通常又将它们分为消毒剂：可杀死微生物，通常用于非生物材料的灭菌或消毒。防腐剂：能杀死微生物或抑制其生长，但对人及动物的体表组织无毒性或毒性低，可作为外用
7、抗微生物药物。HgCl2、CuSO4、碘液、氯气、乙烯氧化物、甲醛剂、臭氧 有机汞、0.1%-1硝酸银、碘液、70%乙醇、3过氧化氢车间常用：70%75%乙醇水溶液；0.1%新洁尔灭；醋酸洗必泰。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒 ，还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有 毒（有致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗 器械、塑料制品等灭菌 。抗代谢物l有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢 物很相似，以至可以和特定的酶结合，从而 阻碍了酶的功能，干扰了代谢的正常进行， 这些物质称为抗代谢物。叶酸对抗物（磺胺）、嘌呤对抗物（6-巯基嘌呤）、苯丙氨酸对抗物（对氟苯丙氨酸）
8、、尿嘧啶对抗物（5-氟尿嘧啶）胸腺嘧啶对抗物（5-溴胸腺嘧啶 ）抗生素l抗生素是由某些生物合成或半合成的一类次 级代谢产物或衍生物，它们在很低浓度时就 能抑制或影响它种生物的生命活动，如杀死 微生物或抑制其生长。应用抗生素注意l(1)第一次使用的药物剂量要足；l(2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生 素；l(3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用；l(4)对现有抗生素进行改造；l(5)筛选新的更有效的抗生素；二、控制微生物的物理因素 温度辐射作用过滤渗透压干燥超声波高温灭菌l高压蒸汽灭菌法：超过一个大气压时，水的沸点高 于100，反之亦然。此法适用于耐高温和潮湿的物 品。通常情况下灭菌温
9、度及时间有：115.5 30min ；121.5 20min ；126.5 15min。是杀灭芽胞最可 靠的方法 。l干热灭菌法：烘箱内热空气灭菌；火焰灼烧。温度：150-170 ；时间：1-2h；对象：金属器械、 玻璃器皿等。煮沸消毒：将待消毒物品如注射器、金属用具、解 剖用具等在水中煮沸15min或更长时间，以杀死细菌 或其他微生物的营养体和少部分的芽孢或孢子。如果 在水中适当加1碳酸钠或2一5的石炭酸则杀菌 效果更好 l间隙灭菌法：将物品先用6080 加1h， 然后置2025保存24h（或常温过夜）， 使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上 条件灭菌，如此反复三次 。适用于需保持营 养活
10、性的物质。l巴氏消毒法：低温维持法：只要在63下 维持30min；高温瞬时法：只要在72下维 持15s；超高温法：只要在135-150下维持 2-6s；适应于牛奶的消毒。辐射作用l辐射灭菌：一种是利用电磁辐射产生的电磁 波；一种是利用电磁辐射产生离子射线；达 到杀死大多数物质上的微生物的目的。l电磁波:微波；紫外线；红外线；l电离辐射：X射线和射线。过滤作用l是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去 ，以达到无菌目的 。l所用的器具是含有微小孔径的滤菌器。l过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、 密度、滤膜的厚度等因素有关 。l要求最终过滤的滤膜孔径为 0.22m ；生产过程中防止微生物污染的措施l设备、管道、容器具的清洗消毒；l进入洁净区的人员应更换衣物，手消毒，戴 手套、口罩；l进入洁净区物料：通过缓冲、脱外包装、表 面消毒；l空气净化系统、纯化水制备；l地面、墙面、地漏的清洁；l物料的规范盛装、存放等等。
