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1、微生物知识培训时间:5月21日 上午9:00-12:00 下午13:00-14:00微生物的定义l微生物(microorganism, microbe)是一些 肉眼看不见的微小生物的总称。l微生物按其结构、化学组成及生活习性等差 异可分成三大类:真核细胞型、原核细胞型 、非细胞型。 l微生物的特点:体积小,面积大;吸收多, 转化快 ;生长旺,繁殖快;易变异,适应强 。真核细胞型: l真菌:真菌的种类很多,约有12万余种,分 别归于霉菌、酵母及蕈(xn)菇(伞菌、 食用菌)中。原核细胞型 l原核生物即广义的细菌,指一大类细胞核无 核膜包囊,只存在称作核区的裸露DNA的原 始单细胞生物包括真菌核古
2、生菌两大类。l原核微生物的7种类型:细菌(狭义),放 线菌,蓝细菌,支原体,立克次氏体,衣原 体,螺旋体。 非细胞型l非细胞型微生物是结构最简单和最小的微生 物,它体积微小,能通过除菌滤器,没有典 型的细胞结构,无产生能量的酶系统,只能 在宿主活细胞内生长增殖的微生物。这种微 生物仅有一种核酸类型,即由DNA或RNA构 成核心,外披蛋白质衣壳,有的甚至仅有一 种核酸不含蛋白质,或仅含蛋白质而没有核 酸。如病毒(virus)、亚病毒(subvirus)、朊粒 (prion)。 微生物生长所需营养l水:生物体最重要的组成部分 ;l碳源:淀粉、糖类、醇、脂肪、高级石腊等有 机物;是构成细胞的重要物质
3、 。l氮源:含N物质如铵盐、硝酸盐、氨基酸、胶胨 及蛋白质等;是组成蛋白质和核酸的重要元素 。l无机盐:无机化合物中的盐类,旧称矿物质, 在生物细胞内一般只占鲜重的1%至1.5% ;l生长因子:微生物生长不可缺少的微量有机物 叫做生长因子,主要包括维生素、氨基酸和碱 基等,它们一般是酶和核酸的组成成分。微生物的生长细菌群体生长规律 生长曲线在不补充营养物质或移去培养物 ,保持整个培养液体积不变条件 下,以时间为横坐标,以菌数为 纵坐标,根据不同培养时间时细 菌数量的变化,可以作出一条反 映细菌在整个培养期间菌数变化 规律的曲线。生长曲线可分:延滞期对数期 稳定期 衰亡期 延滞期l将少量菌种接入
4、新鲜培养基后,在开始一段 时间内菌数不立即增加,或增加很少,生长 速度接近于零。也称延迟期、适应期。l特点:分裂迟缓、代谢活跃。对数期l以最大的速率生长和分裂(繁殖方式一般为 无性繁殖,以二分裂方式增加细菌数目), 细菌数量呈对数增加;l特点:细菌内各成分按比例有规律地增加, 表现为平衡生长。稳定期l由于营养物质消耗,代谢产物积累和pH等环 境变化,逐步不适宜于细菌生长,导致生长 速率降低直至零(即细菌分裂增加的数量等于 细菌死亡数量),结束对数生长期,进入稳定 生长期。衰亡期l细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶, 产生或释放出一些产物,如氨基酸、转化酶 、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态
5、, 有时产生畸形,细胞大小悬殊,有些革兰氏 染色反应阳性菌变成阴性反应等。l特点:该时期死亡的细菌以对数方式增加, 但在衰亡期的后期,由于部分细菌产生抗性 也会使细菌死亡的速率降低。 微生物生长繁殖的控制l基本概念:l防腐:在某些化学物质或物理因子作用下,能防止 或抑制微生物生长的一种措施;l消毒:利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有 病原微生物的一种措施;l灭菌:指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的 所有微生物的一种措施;l化疗:利用具有选择毒性的化学物质如磺胺、抗生 素等对生物体内部被微生物感染的组织成病受细胞 进行治疗,以杀死组织内的病原微生物或病变细胞 ,但对机体本身无毒害作用的治
6、疗措施。一、控制微生物的化学物质l抗微生物剂:是一类能够杀死微生物或抑制微 生物生长的化学物质 。l根据它们抗微生物的特性可分为: 抑菌剂 杀菌剂 溶菌剂 作用机理是这类物质结合到核糖体上抑制蛋白质合成,导 致生长停止,由于它们同核糖体结合不紧,它们在浓度降 低时又会游离出来,核糖体合成蛋白质的能力恢复,使生 长恢复 它们是紧紧地结合到细胞的作用靶上,即使在浓度降低时 也不能游离出来,因此生长不能恢复 能抑制细胞壁合成或损伤细胞质膜 抗微生物剂通常又将它们分为消毒剂:可杀死微生物,通常用于非生物材料的灭菌或消毒。防腐剂:能杀死微生物或抑制其生长,但对人及动物的体表组织无毒性或毒性低,可作为外用
7、抗微生物药物。HgCl2、CuSO4、碘液、氯气、乙烯氧化物、甲醛剂、臭氧 有机汞、0.1%-1硝酸银、碘液、70%乙醇、3过氧化氢车间常用:70%75%乙醇水溶液;0.1%新洁尔灭;醋酸洗必泰。环氧乙烷是广谱杀菌剂,能杀灭细菌、芽孢和多种病毒 ,还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有 毒(有致变异性),用于药品方面极有限,多用于医疗 器械、塑料制品等灭菌 。抗代谢物l有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢 物很相似,以至可以和特定的酶结合,从而 阻碍了酶的功能,干扰了代谢的正常进行, 这些物质称为抗代谢物。叶酸对抗物(磺胺)、嘌呤对抗物(6-巯基嘌呤)、苯丙氨酸对抗物(对氟苯丙氨酸)
8、、尿嘧啶对抗物(5-氟尿嘧啶)胸腺嘧啶对抗物(5-溴胸腺嘧啶 )抗生素l抗生素是由某些生物合成或半合成的一类次 级代谢产物或衍生物,它们在很低浓度时就 能抑制或影响它种生物的生命活动,如杀死 微生物或抑制其生长。应用抗生素注意l(1)第一次使用的药物剂量要足;l(2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生 素;l(3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用;l(4)对现有抗生素进行改造;l(5)筛选新的更有效的抗生素;二、控制微生物的物理因素 温度辐射作用过滤渗透压干燥超声波高温灭菌l高压蒸汽灭菌法:超过一个大气压时,水的沸点高 于100,反之亦然。此法适用于耐高温和潮湿的物 品。通常情况下灭菌温
9、度及时间有:115.5 30min ;121.5 20min ;126.5 15min。是杀灭芽胞最可 靠的方法 。l干热灭菌法:烘箱内热空气灭菌;火焰灼烧。温度:150-170 ;时间:1-2h;对象:金属器械、 玻璃器皿等。煮沸消毒:将待消毒物品如注射器、金属用具、解 剖用具等在水中煮沸15min或更长时间,以杀死细菌 或其他微生物的营养体和少部分的芽孢或孢子。如果 在水中适当加1碳酸钠或2一5的石炭酸则杀菌 效果更好 l间隙灭菌法:将物品先用6080 加1h, 然后置2025保存24h(或常温过夜), 使其中残存的芽孢萌发成繁殖体,再用以上 条件灭菌,如此反复三次 。适用于需保持营 养活
10、性的物质。l巴氏消毒法:低温维持法:只要在63下 维持30min;高温瞬时法:只要在72下维 持15s;超高温法:只要在135-150下维持 2-6s;适应于牛奶的消毒。辐射作用l辐射灭菌:一种是利用电磁辐射产生的电磁 波;一种是利用电磁辐射产生离子射线;达 到杀死大多数物质上的微生物的目的。l电磁波:微波;紫外线;红外线;l电离辐射:X射线和射线。过滤作用l是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去 ,以达到无菌目的 。l所用的器具是含有微小孔径的滤菌器。l过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、 密度、滤膜的厚度等因素有关 。l要求最终过滤的滤膜孔径为 0.22m ;生产过程中防止微生物污染的措施l设备、管道、容器具的清洗消毒;l进入洁净区的人员应更换衣物,手消毒,戴 手套、口罩;l进入洁净区物料:通过缓冲、脱外包装、表 面消毒;l空气净化系统、纯化水制备;l地面、墙面、地漏的清洁;l物料的规范盛装、存放等等。