谷氨酸受体在成骨细胞力学信号转导中作用的研究

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2、方法,鉴定在骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 细胞系中 NMDAR 的表达情况,研究 MC3T3-E1 subclorle 14 细胞 的力学响应;利用 NMDAR 非竞争性抑制剂 MK801、细胞外钙离子内流信号阻断 剂 EGTA、细胞微丝骨架阻断剂细胞松弛素 D 单独应用和联合应用的方法,以 RT-PCR、WESTERN-BLOT 技术研究 NMDAR 参与力学信号转导的作用和相关的信号 通路。 结果:骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞。MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 三个细胞系均表达 NMDAR 必

3、须亚基 1(NR1)和不同的亚基 2(NR2A-D); 转录因子 AP-1、CBFA1/RUNX2 参与了力学信号转导的信号通路;阻断 NMDAR, 阻断细胞外钙离子内流,阻断细胞微丝骨架,都分别部分的抑制了力学刺激诱 导的 ERK1/2 信号通路的激活,而分别联合应用 MK801+EGTA、MK801+CYTO D 阻 断剂时则都基本抑制了力学刺激诱导的 ERK1/2 信号通路的激活。 结论: NMDAR 在成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14、骨髓间充质干细胞 D1 中 表达,并在成骨细胞 MC3T3-E1 subclone 14 发挥功能,参与了成骨细胞的

4、力学 信号转导过程;NMDAR、细胞微丝骨架、细胞外钙离子内流耦联的信号通路参与 了力学信号转导过程,并以共同作用的方式介导力学信号转导。正文内容正文内容目的:研究骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 在基底应变作用下 NMDA 型谷氨酸受体(NMDAR)的表达情况,探讨 NMDAR 在成骨细胞力学信号转导的作用和相关的信号通路。 方法:采用 RT- PCR 技术,免疫荧光染色技术,蛋白免疫印迹技术和体外细胞循环拉伸基底应 变刺激的方法,鉴定在骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14

5、 细胞系中 NMDAR 的表达情况,研究 MC3T3-E1 subclorle 14 细胞 的力学响应;利用 NMDAR 非竞争性抑制剂 MK801、细胞外钙离子内流信号阻断 剂 EGTA、细胞微丝骨架阻断剂细胞松弛素 D 单独应用和联合应用的方法,以 RT-PCR、WESTERN-BLOT 技术研究 NMDAR 参与力学信号转导的作用和相关的信号 通路。 结果:骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞。MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 三个细胞系均表达 NMDAR 必须亚基 1(NR1)和不同的亚基 2(NR2A-D); 转录因子 AP-1、CBFA1/RUNX2 参与了

6、力学信号转导的信号通路;阻断 NMDAR, 阻断细胞外钙离子内流,阻断细胞微丝骨架,都分别部分的抑制了力学刺激诱 导的 ERK1/2 信号通路的激活,而分别联合应用 MK801+EGTA、MK801+CYTO D 阻 断剂时则都基本抑制了力学刺激诱导的 ERK1/2 信号通路的激活。 结论: NMDAR 在成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14、骨髓间充质干细胞 D1 中 表达,并在成骨细胞 MC3T3-E1 subclone 14 发挥功能,参与了成骨细胞的力学 信号转导过程;NMDAR、细胞微丝骨架、细胞外钙离子内流耦联的信号通路参与 了力学信号转导过程,并以

7、共同作用的方式介导力学信号转导。 目的:研究骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 在基底应变作用下 NMDA 型谷氨酸受体(NMDAR)的表达情况,探讨 NMDAR 在成 骨细胞力学信号转导的作用和相关的信号通路。 方法:采用 RT-PCR 技术, 免疫荧光染色技术,蛋白免疫印迹技术和体外细胞循环拉伸基底应变刺激的方 法,鉴定在骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 细胞系中 NMDAR 的表达情况,研究 MC3T3-E1 subclorle 14 细胞的力学响应; 利用 NMDA

8、R 非竞争性抑制剂 MK801、细胞外钙离子内流信号阻断剂 EGTA、细胞 微丝骨架阻断剂细胞松弛素 D 单独应用和联合应用的方法,以 RT- PCR、WESTERN-BLOT 技术研究 NMDAR 参与力学信号转导的作用和相关的信号通 路。 结果:骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞。MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 三个细胞系均表达 NMDAR 必须亚基 1(NR1)和不同的亚基 2(NR2A-D); 转录因子 AP-1、CBFA1/RUNX2 参与了力学信号转导的信号通路;阻断 NMDAR, 阻断细胞外钙离子内流,阻断细胞微丝骨架,都分别部分的抑制了力学刺激诱 导

9、的 ERK1/2 信号通路的激活,而分别联合应用 MK801+EGTA、MK801+CYTO D 阻 断剂时则都基本抑制了力学刺激诱导的 ERK1/2 信号通路的激活。 结论: NMDAR 在成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14、骨髓间充质干细胞 D1 中 表达,并在成骨细胞 MC3T3-E1 subclone 14 发挥功能,参与了成骨细胞的力学 信号转导过程;NMDAR、细胞微丝骨架、细胞外钙离子内流耦联的信号通路参与 了力学信号转导过程,并以共同作用的方式介导力学信号转导。 目的:研究骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1

10、subclone 14 在基底应变作用下 NMDA 型谷氨酸受体(NMDAR)的表达情况,探讨 NMDAR 在成 骨细胞力学信号转导的作用和相关的信号通路。 方法:采用 RT-PCR 技术, 免疫荧光染色技术,蛋白免疫印迹技术和体外细胞循环拉伸基底应变刺激的方法,鉴定在骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 细胞系中 NMDAR 的表达情况,研究 MC3T3-E1 subclorle 14 细胞的力学响应; 利用 NMDAR 非竞争性抑制剂 MK801、细胞外钙离子内流信号阻断剂 EGTA、细胞 微丝骨架阻断剂细胞松弛素 D 单独应用和联

11、合应用的方法,以 RT- PCR、WESTERN-BLOT 技术研究 NMDAR 参与力学信号转导的作用和相关的信号通 路。 结果:骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞。MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 三个细胞系均表达 NMDAR 必须亚基 1(NR1)和不同的亚基 2(NR2A-D); 转录因子 AP-1、CBFA1/RUNX2 参与了力学信号转导的信号通路;阻断 NMDAR, 阻断细胞外钙离子内流,阻断细胞微丝骨架,都分别部分的抑制了力学刺激诱 导的 ERK1/2 信号通路的激活,而分别联合应用 MK801+EGTA、MK801+CYTO D 阻 断剂时则都基本抑

12、制了力学刺激诱导的 ERK1/2 信号通路的激活。 结论: NMDAR 在成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14、骨髓间充质干细胞 D1 中 表达,并在成骨细胞 MC3T3-E1 subclone 14 发挥功能,参与了成骨细胞的力学 信号转导过程;NMDAR、细胞微丝骨架、细胞外钙离子内流耦联的信号通路参与 了力学信号转导过程,并以共同作用的方式介导力学信号转导。 目的:研究骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 在基底应变作用下 NMDA 型谷氨酸受体(NMDAR)的表达情况,探讨 NMDAR 在成 骨细

13、胞力学信号转导的作用和相关的信号通路。 方法:采用 RT-PCR 技术, 免疫荧光染色技术,蛋白免疫印迹技术和体外细胞循环拉伸基底应变刺激的方 法,鉴定在骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 细胞系中 NMDAR 的表达情况,研究 MC3T3-E1 subclorle 14 细胞的力学响应; 利用 NMDAR 非竞争性抑制剂 MK801、细胞外钙离子内流信号阻断剂 EGTA、细胞 微丝骨架阻断剂细胞松弛素 D 单独应用和联合应用的方法,以 RT- PCR、WESTERN-BLOT 技术研究 NMDAR 参与力学信号转导的作用和相关的信号

14、通 路。 结果:骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞。MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 三个细胞系均表达 NMDAR 必须亚基 1(NR1)和不同的亚基 2(NR2A-D); 转录因子 AP-1、CBFA1/RUNX2 参与了力学信号转导的信号通路;阻断 NMDAR, 阻断细胞外钙离子内流,阻断细胞微丝骨架,都分别部分的抑制了力学刺激诱 导的 ERK1/2 信号通路的激活,而分别联合应用 MK801+EGTA、MK801+CYTO D 阻 断剂时则都基本抑制了力学刺激诱导的 ERK1/2 信号通路的激活。 结论: NMDAR 在成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E

15、1 subclone 14、骨髓间充质干细胞 D1 中 表达,并在成骨细胞 MC3T3-E1 subclone 14 发挥功能,参与了成骨细胞的力学 信号转导过程;NMDAR、细胞微丝骨架、细胞外钙离子内流耦联的信号通路参与 了力学信号转导过程,并以共同作用的方式介导力学信号转导。 目的:研究骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 在基底应变作用下 NMDA 型谷氨酸受体(NMDAR)的表达情况,探讨 NMDAR 在成 骨细胞力学信号转导的作用和相关的信号通路。 方法:采用 RT-PCR 技术, 免疫荧光染色技术,蛋白免疫印迹技术和体外细

16、胞循环拉伸基底应变刺激的方 法,鉴定在骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞 MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 细胞系中 NMDAR 的表达情况,研究 MC3T3-E1 subclorle 14 细胞的力学响应; 利用 NMDAR 非竞争性抑制剂 MK801、细胞外钙离子内流信号阻断剂 EGTA、细胞 微丝骨架阻断剂细胞松弛素 D 单独应用和联合应用的方法,以 RT- PCR、WESTERN-BLOT 技术研究 NMDAR 参与力学信号转导的作用和相关的信号通 路。 结果:骨髓间充质干细胞 D1 和成骨细胞。MC3T3-E1、MC3T3-E1 subclone 14 三个细胞系均表达 NMDAR 必须亚基 1(NR1)和不同的亚基 2(NR2A-D); 转录因子 AP-1、CBFA1/RUNX2 参与了力学信号转导的信号通路;阻断 NMDAR, 阻断细胞外钙离子内流,阻断细胞微丝骨架,都分别部分的抑制了力学刺激诱 导的 ERK1/2 信号通路的激活,

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