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1、园林植物与观赏园艺专业毕业论文园林植物与观赏园艺专业毕业论文 精品论文精品论文 漳州水仙随体单漳州水仙随体单染色体文库的构建及其染色体文库的构建及其 AFLPAFLP 标记的研究标记的研究关键词：漳州水仙关键词：漳州水仙 随体染色体随体染色体 染色体微分离染色体微分离 单染色体文库单染色体文库 AFLPAFLP摘要：中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)为石蒜科水仙属多年生球 根花卉，是法国水仙(Narcissus tazetta)的一个变种。中国是世界重要的水仙 生产及出口国之一，久负盛名的中国水仙不仅是中国著名的十大传统名花之一， 更是中国传统出口花卉中
2、的佼佼者12。但近年来，我国在水仙生产中存在的 品种单一、病虫害增多，品质下降等问题日益显现，因此需要进行水仙育种基 础性研究，为培育新品种打下坚实的基础。一直以来，对漳州水仙的染色体起 源问题都不是很明确，而且研究大多是局限在细胞学水平，分子水平研究甚少， 作者认为对漳州水仙有代表性的第 7 号染色体的 3 条随体染色体的研究，将对 探索漳州水仙的染色体起源问题及指导水仙新品种的选育有较大的意义。 本 研究以漳州水仙为材料，探索了漳州水仙随体染色体数，通过染色体微分离、 微克隆技术建立了两条随体染色体(第 7 号染色体)单染色体 DNA 文库，并且把 该技术与单酶切 AFLP 分子标记技术相
3、结合，建立了两条染色体分子标记。主要 内容及结论如下： 1.漳州水仙的随体染色体 漳州水仙为三倍体，2n=3x- 30，其中第 7 号染色体的 3 条染色体均为随体染色体，但 3 条随体染色体形态 不同。当染色体预处理时间过长时，其中一条随体收缩过短，光学显微镜下难 以辨认。 2.漳州水仙随体染色体 DNA 文库的构建 用玻璃针显微分离出漳 州水仙两条随体染色体，经 LA-PCR 扩增得到 2002500bp 的 DNA 片段； Southern 杂交表明，扩增片段与漳州水仙基因组 DNA 之间有同源性，从而证明 漳州水仙带随体染色体 DNA 已经被成功扩增；将扩增产物克隆到 PMD18-T
4、载体 中，约获得 5.0105 个和 3.7105 个克隆，经 EcoR、Hind酶切鉴定插入 片段大小为 3002000bp。 3.两条染色体的 AFLP 分子标记 将 LA-PCR 技 术与单酶切 AFLP 分子标记结合，以 LA-PCR 接头序列为依据，设计引物，通过 变性聚丙烯酰胺胶电泳与银染技术，建立了两条染色体的分子标记，并且选取 17 对引物，对两条染色体扩增出来的谱带进行分析，其中两组谱带相同条带比 率约为 58.8，初步得出该两条染色体并非同源染色体。正文内容正文内容中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)为石蒜科水仙属多年生球根 花卉，是法
5、国水仙(Narcissus tazetta)的一个变种。中国是世界重要的水仙生 产及出口国之一，久负盛名的中国水仙不仅是中国著名的十大传统名花之一， 更是中国传统出口花卉中的佼佼者12。但近年来，我国在水仙生产中存在的 品种单一、病虫害增多，品质下降等问题日益显现，因此需要进行水仙育种基 础性研究，为培育新品种打下坚实的基础。一直以来，对漳州水仙的染色体起 源问题都不是很明确，而且研究大多是局限在细胞学水平，分子水平研究甚少， 作者认为对漳州水仙有代表性的第 7 号染色体的 3 条随体染色体的研究，将对 探索漳州水仙的染色体起源问题及指导水仙新品种的选育有较大的意义。 本 研究以漳州水仙为材料
6、，探索了漳州水仙随体染色体数，通过染色体微分离、 微克隆技术建立了两条随体染色体(第 7 号染色体)单染色体 DNA 文库，并且把 该技术与单酶切 AFLP 分子标记技术相结合，建立了两条染色体分子标记。主要 内容及结论如下： 1.漳州水仙的随体染色体 漳州水仙为三倍体，2n=3x- 30，其中第 7 号染色体的 3 条染色体均为随体染色体，但 3 条随体染色体形态 不同。当染色体预处理时间过长时，其中一条随体收缩过短，光学显微镜下难 以辨认。 2.漳州水仙随体染色体 DNA 文库的构建 用玻璃针显微分离出漳 州水仙两条随体染色体，经 LA-PCR 扩增得到 2002500bp 的 DNA 片
7、段； Southern 杂交表明，扩增片段与漳州水仙基因组 DNA 之间有同源性，从而证明 漳州水仙带随体染色体 DNA 已经被成功扩增；将扩增产物克隆到 PMD18-T 载体 中，约获得 5.0105 个和 3.7105 个克隆，经 EcoR、Hind酶切鉴定插入 片段大小为 3002000bp。 3.两条染色体的 AFLP 分子标记 将 LA-PCR 技 术与单酶切 AFLP 分子标记结合，以 LA-PCR 接头序列为依据，设计引物，通过 变性聚丙烯酰胺胶电泳与银染技术，建立了两条染色体的分子标记，并且选取 17 对引物，对两条染色体扩增出来的谱带进行分析，其中两组谱带相同条带比 率约为
8、58.8，初步得出该两条染色体并非同源染色体。 中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)为石蒜科水仙属多年生球根花卉， 是法国水仙(Narcissus tazetta)的一个变种。中国是世界重要的水仙生产及出 口国之一，久负盛名的中国水仙不仅是中国著名的十大传统名花之一，更是中 国传统出口花卉中的佼佼者12。但近年来，我国在水仙生产中存在的品种单 一、病虫害增多，品质下降等问题日益显现，因此需要进行水仙育种基础性研 究，为培育新品种打下坚实的基础。一直以来，对漳州水仙的染色体起源问题 都不是很明确，而且研究大多是局限在细胞学水平，分子水平研究甚少，作者 认为对
9、漳州水仙有代表性的第 7 号染色体的 3 条随体染色体的研究，将对探索 漳州水仙的染色体起源问题及指导水仙新品种的选育有较大的意义。 本研究 以漳州水仙为材料，探索了漳州水仙随体染色体数，通过染色体微分离、微克 隆技术建立了两条随体染色体(第 7 号染色体)单染色体 DNA 文库，并且把该技 术与单酶切 AFLP 分子标记技术相结合，建立了两条染色体分子标记。主要内容 及结论如下： 1.漳州水仙的随体染色体 漳州水仙为三倍体，2n=3x-30， 其中第 7 号染色体的 3 条染色体均为随体染色体，但 3 条随体染色体形态不同。 当染色体预处理时间过长时，其中一条随体收缩过短，光学显微镜下难以辨
10、认。2.漳州水仙随体染色体 DNA 文库的构建 用玻璃针显微分离出漳州水仙两 条随体染色体，经 LA-PCR 扩增得到 2002500bp 的 DNA 片段；Southern 杂交表明，扩增片段与漳州水仙基因组 DNA 之间有同源性，从而证明漳州水仙带随 体染色体 DNA 已经被成功扩增；将扩增产物克隆到 PMD18-T 载体中，约获得 5.0105 个和 3.7105 个克隆，经 EcoR、Hind酶切鉴定插入片段大小为 3002000bp。 3.两条染色体的 AFLP 分子标记 将 LA-PCR 技术与单酶切 AFLP 分子标记结合，以 LA-PCR 接头序列为依据，设计引物，通过变性聚丙
11、烯 酰胺胶电泳与银染技术，建立了两条染色体的分子标记，并且选取 17 对引物， 对两条染色体扩增出来的谱带进行分析，其中两组谱带相同条带比率约为 58.8，初步得出该两条染色体并非同源染色体。 中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)为石蒜科水仙属多年生球根花卉， 是法国水仙(Narcissus tazetta)的一个变种。中国是世界重要的水仙生产及出 口国之一，久负盛名的中国水仙不仅是中国著名的十大传统名花之一，更是中 国传统出口花卉中的佼佼者12。但近年来，我国在水仙生产中存在的品种单 一、病虫害增多，品质下降等问题日益显现，因此需要进行水仙育种基础性研
12、究，为培育新品种打下坚实的基础。一直以来，对漳州水仙的染色体起源问题 都不是很明确，而且研究大多是局限在细胞学水平，分子水平研究甚少，作者 认为对漳州水仙有代表性的第 7 号染色体的 3 条随体染色体的研究，将对探索 漳州水仙的染色体起源问题及指导水仙新品种的选育有较大的意义。 本研究 以漳州水仙为材料，探索了漳州水仙随体染色体数，通过染色体微分离、微克 隆技术建立了两条随体染色体(第 7 号染色体)单染色体 DNA 文库，并且把该技 术与单酶切 AFLP 分子标记技术相结合，建立了两条染色体分子标记。主要内容 及结论如下： 1.漳州水仙的随体染色体 漳州水仙为三倍体，2n=3x-30， 其中
13、第 7 号染色体的 3 条染色体均为随体染色体，但 3 条随体染色体形态不同。 当染色体预处理时间过长时，其中一条随体收缩过短，光学显微镜下难以辨认。2.漳州水仙随体染色体 DNA 文库的构建 用玻璃针显微分离出漳州水仙两 条随体染色体，经 LA-PCR 扩增得到 2002500bp 的 DNA 片段；Southern 杂交 表明，扩增片段与漳州水仙基因组 DNA 之间有同源性，从而证明漳州水仙带随 体染色体 DNA 已经被成功扩增；将扩增产物克隆到 PMD18-T 载体中，约获得 5.0105 个和 3.7105 个克隆，经 EcoR、Hind酶切鉴定插入片段大小为 3002000bp。 3
14、.两条染色体的 AFLP 分子标记 将 LA-PCR 技术与单酶切 AFLP 分子标记结合，以 LA-PCR 接头序列为依据，设计引物，通过变性聚丙烯 酰胺胶电泳与银染技术，建立了两条染色体的分子标记，并且选取 17 对引物， 对两条染色体扩增出来的谱带进行分析，其中两组谱带相同条带比率约为 58.8，初步得出该两条染色体并非同源染色体。 中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)为石蒜科水仙属多年生球根花卉， 是法国水仙(Narcissus tazetta)的一个变种。中国是世界重要的水仙生产及出 口国之一，久负盛名的中国水仙不仅是中国著名的十大传统名花之一，
15、更是中 国传统出口花卉中的佼佼者12。但近年来，我国在水仙生产中存在的品种单 一、病虫害增多，品质下降等问题日益显现，因此需要进行水仙育种基础性研 究，为培育新品种打下坚实的基础。一直以来，对漳州水仙的染色体起源问题 都不是很明确，而且研究大多是局限在细胞学水平，分子水平研究甚少，作者 认为对漳州水仙有代表性的第 7 号染色体的 3 条随体染色体的研究，将对探索 漳州水仙的染色体起源问题及指导水仙新品种的选育有较大的意义。 本研究 以漳州水仙为材料，探索了漳州水仙随体染色体数，通过染色体微分离、微克 隆技术建立了两条随体染色体(第 7 号染色体)单染色体 DNA 文库，并且把该技术与单酶切 A
16、FLP 分子标记技术相结合，建立了两条染色体分子标记。主要内容 及结论如下： 1.漳州水仙的随体染色体 漳州水仙为三倍体，2n=3x-30， 其中第 7 号染色体的 3 条染色体均为随体染色体，但 3 条随体染色体形态不同。 当染色体预处理时间过长时，其中一条随体收缩过短，光学显微镜下难以辨认。2.漳州水仙随体染色体 DNA 文库的构建 用玻璃针显微分离出漳州水仙两 条随体染色体，经 LA-PCR 扩增得到 2002500bp 的 DNA 片段；Southern 杂交 表明，扩增片段与漳州水仙基因组 DNA 之间有同源性，从而证明漳州水仙带随 体染色体 DNA 已经被成功扩增；将扩增产物克隆到 PMD18-T 载体中，约获得 5.0105 个和 3.7105 个克隆，经 EcoR、Hind酶切鉴定插入片段大小为 3002000bp。 3.两条染色
