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1、食品科学专业毕业论文食品科学专业毕业论文 精品论文精品论文 抗酸奶后酸化乳酸菌株的选抗酸奶后酸化乳酸菌株的选育育关键词：酸奶关键词：酸奶 乳酸菌乳酸菌 乳酸乳杆菌乳酸乳杆菌 原生质体融合原生质体融合 乳酸乳球菌乳酸乳球菌 硫酸二乙酯诱变硫酸二乙酯诱变摘要：酸奶在储藏、销售直至食用前，由于乳酸菌仍会生长繁殖，使 pH 值继续 下降，出现消费者不可接受的过酸味及感官质量下降等后酸化现象。针对这一 问题，本文对从新疆酸奶疙瘩中分离出的乳酸乳杆菌(LN1)进行了硫酸二乙酯诱 变；对乳酸乳杆菌和乳酸乳球菌乳酸亚种(SN1)进行了原生质体融合，最终得到 后酸化弱的菌株(NO1、NO2、NO3)。相关的研究
2、结果如下： (1)采用 MRS 液体 培养基，对 LN1、SN1 的培养条件进行了优化，得到 LN1 的最佳培养条件为：接 种量 3，培养温度 37，最初 pH 值为 6.6，培养时间 12h；得到 SN1 的最佳 培养条件为：接种量 3，培养温度 41，最初 pH 值为 7，培养时间 12h。 (2)对 LN1 进行硫酸二乙酯(DES)诱变，以致死率为指标，得到 DES 诱变的最佳 条件：菌液浓度 107cfu/mL，DES 剂量 0.8，诱变时间 30min，诱变温度 37。(3)应用溶菌酶制备 LN1 和 SN1 的原生质体，得到 LN1 的原生质体制备最佳 条件为：溶菌酶浓度 15.0
3、0 mg/mL，酶解细胞壁的时间 60min，酶解温度 44， 此条件下原生质体制备率为 99.6。SN1 的原生质体制备最佳条件为：溶菌酶 浓度为 3.20mg/mL，酶解细胞壁的时间为 60min，酶解温度为 28，此条件下 原生质体制备率为 100。 (4) LN1 及 SN1 的原生质体灭活标记条件相同， 紫外线灭菌条件：15W 紫外灯下，距离为 30cm，照射时间 120s；加热灭菌条件： 53加热 60min。 (5)以灭菌的 30聚乙二醇 6000(PEG)溶液为促融合剂， 对 LN1 及 SN1 的灭活原生质体进行融合，筛选得到 2 株后酸化弱的杆菌 NO2、NO3。 (6)对
4、硫酸二乙酯诱变后的突变菌株和原生质融合后的融合子进 行筛选，最终得到 37培养时产乳酸量较出发菌株低的菌株 NO1、NO2、NO3， 并将 NO1、NO2、NO3 接种于脱脂乳培养基(RSM)制作酸奶，测定其贮藏特性，结 果表明：NO1、NO2、NO3 比 LN1 产酸量减少，NO1、NO2、NO3 较 LN1 制作的发酵 乳后达到酸化的时间推迟了 3d，3d，2d。正文内容正文内容酸奶在储藏、销售直至食用前，由于乳酸菌仍会生长繁殖，使 pH 值继续下 降，出现消费者不可接受的过酸味及感官质量下降等后酸化现象。针对这一问 题，本文对从新疆酸奶疙瘩中分离出的乳酸乳杆菌(LN1)进行了硫酸二乙酯诱
5、变； 对乳酸乳杆菌和乳酸乳球菌乳酸亚种(SN1)进行了原生质体融合，最终得到后酸 化弱的菌株(NO1、NO2、NO3)。相关的研究结果如下： (1)采用 MRS 液体培养 基，对 LN1、SN1 的培养条件进行了优化，得到 LN1 的最佳培养条件为：接种量 3，培养温度 37，最初 pH 值为 6.6，培养时间 12h；得到 SN1 的最佳培养 条件为：接种量 3，培养温度 41，最初 pH 值为 7，培养时间 12h。 (2) 对 LN1 进行硫酸二乙酯(DES)诱变，以致死率为指标，得到 DES 诱变的最佳条件： 菌液浓度 107cfu/mL，DES 剂量 0.8，诱变时间 30min，诱
6、变温度 37。 (3)应用溶菌酶制备 LN1 和 SN1 的原生质体，得到 LN1 的原生质体制备最佳条件 为：溶菌酶浓度 15.00 mg/mL，酶解细胞壁的时间 60min，酶解温度 44，此 条件下原生质体制备率为 99.6。SN1 的原生质体制备最佳条件为：溶菌酶浓 度为 3.20mg/mL，酶解细胞壁的时间为 60min，酶解温度为 28，此条件下原 生质体制备率为 100。 (4) LN1 及 SN1 的原生质体灭活标记条件相同，紫 外线灭菌条件：15W 紫外灯下，距离为 30cm，照射时间 120s；加热灭菌条件： 53加热 60min。 (5)以灭菌的 30聚乙二醇 6000(
7、PEG)溶液为促融合剂， 对 LN1 及 SN1 的灭活原生质体进行融合，筛选得到 2 株后酸化弱的杆菌 NO2、NO3。 (6)对硫酸二乙酯诱变后的突变菌株和原生质融合后的融合子进 行筛选，最终得到 37培养时产乳酸量较出发菌株低的菌株 NO1、NO2、NO3， 并将 NO1、NO2、NO3 接种于脱脂乳培养基(RSM)制作酸奶，测定其贮藏特性，结 果表明：NO1、NO2、NO3 比 LN1 产酸量减少，NO1、NO2、NO3 较 LN1 制作的发酵 乳后达到酸化的时间推迟了 3d，3d，2d。 酸奶在储藏、销售直至食用前，由于乳酸菌仍会生长繁殖，使 pH 值继续下降， 出现消费者不可接受的
8、过酸味及感官质量下降等后酸化现象。针对这一问题， 本文对从新疆酸奶疙瘩中分离出的乳酸乳杆菌(LN1)进行了硫酸二乙酯诱变；对 乳酸乳杆菌和乳酸乳球菌乳酸亚种(SN1)进行了原生质体融合，最终得到后酸化 弱的菌株(NO1、NO2、NO3)。相关的研究结果如下： (1)采用 MRS 液体培养基， 对 LN1、SN1 的培养条件进行了优化，得到 LN1 的最佳培养条件为：接种量 3，培养温度 37，最初 pH 值为 6.6，培养时间 12h；得到 SN1 的最佳培养 条件为：接种量 3，培养温度 41，最初 pH 值为 7，培养时间 12h。 (2) 对 LN1 进行硫酸二乙酯(DES)诱变，以致死
9、率为指标，得到 DES 诱变的最佳条件： 菌液浓度 107cfu/mL，DES 剂量 0.8，诱变时间 30min，诱变温度 37。 (3)应用溶菌酶制备 LN1 和 SN1 的原生质体，得到 LN1 的原生质体制备最佳条件 为：溶菌酶浓度 15.00 mg/mL，酶解细胞壁的时间 60min，酶解温度 44，此 条件下原生质体制备率为 99.6。SN1 的原生质体制备最佳条件为：溶菌酶浓 度为 3.20mg/mL，酶解细胞壁的时间为 60min，酶解温度为 28，此条件下原 生质体制备率为 100。 (4) LN1 及 SN1 的原生质体灭活标记条件相同，紫 外线灭菌条件：15W 紫外灯下，
10、距离为 30cm，照射时间 120s；加热灭菌条件： 53加热 60min。 (5)以灭菌的 30聚乙二醇 6000(PEG)溶液为促融合剂， 对 LN1 及 SN1 的灭活原生质体进行融合，筛选得到 2 株后酸化弱的杆菌 NO2、NO3。 (6)对硫酸二乙酯诱变后的突变菌株和原生质融合后的融合子进行筛选，最终得到 37培养时产乳酸量较出发菌株低的菌株 NO1、NO2、NO3， 并将 NO1、NO2、NO3 接种于脱脂乳培养基(RSM)制作酸奶，测定其贮藏特性，结 果表明：NO1、NO2、NO3 比 LN1 产酸量减少，NO1、NO2、NO3 较 LN1 制作的发酵 乳后达到酸化的时间推迟了
11、3d，3d，2d。 酸奶在储藏、销售直至食用前，由于乳酸菌仍会生长繁殖，使 pH 值继续下降， 出现消费者不可接受的过酸味及感官质量下降等后酸化现象。针对这一问题， 本文对从新疆酸奶疙瘩中分离出的乳酸乳杆菌(LN1)进行了硫酸二乙酯诱变；对 乳酸乳杆菌和乳酸乳球菌乳酸亚种(SN1)进行了原生质体融合，最终得到后酸化 弱的菌株(NO1、NO2、NO3)。相关的研究结果如下： (1)采用 MRS 液体培养基， 对 LN1、SN1 的培养条件进行了优化，得到 LN1 的最佳培养条件为：接种量 3，培养温度 37，最初 pH 值为 6.6，培养时间 12h；得到 SN1 的最佳培养 条件为：接种量 3
12、，培养温度 41，最初 pH 值为 7，培养时间 12h。 (2) 对 LN1 进行硫酸二乙酯(DES)诱变，以致死率为指标，得到 DES 诱变的最佳条件： 菌液浓度 107cfu/mL，DES 剂量 0.8，诱变时间 30min，诱变温度 37。 (3)应用溶菌酶制备 LN1 和 SN1 的原生质体，得到 LN1 的原生质体制备最佳条件 为：溶菌酶浓度 15.00 mg/mL，酶解细胞壁的时间 60min，酶解温度 44，此 条件下原生质体制备率为 99.6。SN1 的原生质体制备最佳条件为：溶菌酶浓 度为 3.20mg/mL，酶解细胞壁的时间为 60min，酶解温度为 28，此条件下原 生
13、质体制备率为 100。 (4) LN1 及 SN1 的原生质体灭活标记条件相同，紫 外线灭菌条件：15W 紫外灯下，距离为 30cm，照射时间 120s；加热灭菌条件： 53加热 60min。 (5)以灭菌的 30聚乙二醇 6000(PEG)溶液为促融合剂， 对 LN1 及 SN1 的灭活原生质体进行融合，筛选得到 2 株后酸化弱的杆菌 NO2、NO3。 (6)对硫酸二乙酯诱变后的突变菌株和原生质融合后的融合子进 行筛选，最终得到 37培养时产乳酸量较出发菌株低的菌株 NO1、NO2、NO3， 并将 NO1、NO2、NO3 接种于脱脂乳培养基(RSM)制作酸奶，测定其贮藏特性，结 果表明：NO
14、1、NO2、NO3 比 LN1 产酸量减少，NO1、NO2、NO3 较 LN1 制作的发酵 乳后达到酸化的时间推迟了 3d，3d，2d。 酸奶在储藏、销售直至食用前，由于乳酸菌仍会生长繁殖，使 pH 值继续下降， 出现消费者不可接受的过酸味及感官质量下降等后酸化现象。针对这一问题， 本文对从新疆酸奶疙瘩中分离出的乳酸乳杆菌(LN1)进行了硫酸二乙酯诱变；对 乳酸乳杆菌和乳酸乳球菌乳酸亚种(SN1)进行了原生质体融合，最终得到后酸化 弱的菌株(NO1、NO2、NO3)。相关的研究结果如下： (1)采用 MRS 液体培养基， 对 LN1、SN1 的培养条件进行了优化，得到 LN1 的最佳培养条件为
15、：接种量 3，培养温度 37，最初 pH 值为 6.6，培养时间 12h；得到 SN1 的最佳培养 条件为：接种量 3，培养温度 41，最初 pH 值为 7，培养时间 12h。 (2) 对 LN1 进行硫酸二乙酯(DES)诱变，以致死率为指标，得到 DES 诱变的最佳条件： 菌液浓度 107cfu/mL，DES 剂量 0.8，诱变时间 30min，诱变温度 37。 (3)应用溶菌酶制备 LN1 和 SN1 的原生质体，得到 LN1 的原生质体制备最佳条件 为：溶菌酶浓度 15.00 mg/mL，酶解细胞壁的时间 60min，酶解温度 44，此 条件下原生质体制备率为 99.6。SN1 的原生质
16、体制备最佳条件为：溶菌酶浓 度为 3.20mg/mL，酶解细胞壁的时间为 60min，酶解温度为 28，此条件下原 生质体制备率为 100。 (4) LN1 及 SN1 的原生质体灭活标记条件相同，紫 外线灭菌条件：15W 紫外灯下，距离为 30cm，照射时间 120s；加热灭菌条件： 53加热 60min。 (5)以灭菌的 30聚乙二醇 6000(PEG)溶液为促融合剂，对 LN1 及 SN1 的灭活原生质体进行融合，筛选得到 2 株后酸化弱的杆菌 NO2、NO3。 (6)对硫酸二乙酯诱变后的突变菌株和原生质融合后的融合子进 行筛选，最终得到 37培养时产乳酸量较出发菌株低的菌株 NO1、NO2、NO3， 并将 NO1、NO2、NO3 接种于脱脂乳培养基(RSM)制作酸奶，测定其贮藏特性，结 果表明
