《家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞抑制作用的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞抑制作用的实验研究（29页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、免疫学专业优秀论文免疫学专业优秀论文 家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞抑制作用的家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞抑制作用的实验研究实验研究关键词：家蝇胚胎细胞关键词：家蝇胚胎细胞 抗菌肽抗菌肽 黑色素瘤细胞黑色素瘤细胞 髓样白血病细胞髓样白血病细胞 抗癌活性抗癌活性摘要：目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研 究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的 抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处 于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗 菌肽用 PBS 配制成 40
2、、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细 胞和 K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞 的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对 上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照 组采用等量 PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期
3、及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流 式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管 内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对 大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。 五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比， 差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375 细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，
4、对细胞的抑 制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显 著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓 度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可 引起 K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比， 各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性 （Pgt;0.05） 。 （6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽
5、组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内 皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚 胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素 瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正 常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的 抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗 菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常 发育。 （5）家
6、蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤 肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。正文内容正文内容目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究 所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑 制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于 对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌 肽用 PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞 和 K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤
7、细胞的 抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上 述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照 组采用等量 PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流 式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管 内皮细胞的有效
8、杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对 大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。 五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比， 差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375 细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑 制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显 著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A3
9、75 细胞的 G2/M 期升高，高浓 度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可 引起 K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比， 各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性 （Pgt;0.05） 。 （6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内 皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和
10、 36.37%。 结论：（1）家蝇胚 胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素 瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正 常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的 抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗 菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常 发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤 肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。 目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽
11、，研究所提 取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作 用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数 生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用 PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和 K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑 制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）
12、 用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞 和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞 细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪 测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞 的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌 有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均 具有抑制作用，与
13、正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓 度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无 显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375 细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作 用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性 差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组 （gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期 的影响与正常对照组相比差异有显著
14、性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起 K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓 度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀 伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率 分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠 杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样 白血病细胞 K562 两种肿瘤细
15、胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细 胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量 的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两 种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细 胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤 正常人体细胞。 目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提 取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作 用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对
16、数 生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用 PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和 K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑 制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述 五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4） 用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞 和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞 细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪 测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞 的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆
