Agilent1200高效液相色谱仪操作规程

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1、Agilent1200 高效液相色谱仪操作规程 一、Agilent1200 化学工作站开机顺序(LAN 卡联接) 1、将待测样品按要求前处理,准备 HPLC 所需流动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等 2、打开计算机,进入 Bootp;3、打开主机各模块电源(不分先后) ,等待 Bootp 接收,等待各模块就绪后,再双击工作站图标,进入化学工作站; 4、调出一个分析方法,检查各参数的设置;5、旋开泵上的排气阀,将工作站中的泵流量设到 5ml/min,溶剂 A 设到 100%;6、在工作站中打开泵,排出管线中的气体数分钟;7、依此切换到 B、C、D 溶剂分别排气;8、将工作站中的泵流量设

2、到 1ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;9、关闭排气阀,检查柱前压力;10、待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况; 二、数据采集方法编辑1 由运行控制进入样品信息,设定操作者姓名,样品数据文件名等。2 自动进样器参数设定:1)选择合适的进样方式, “Standard Injection”-只能输入进样体积,此方式无洗针功能。 “Injection with Needle Wash”-可以输入进样体积和洗瓶位置, “UnRegistered”-此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。“Use injectorprogram”-可以点击“Edit ”键

3、进行进样程序编辑。2)单击确定进入下一画面。3 泵参数设定:(四元泵)1)在流量(Flow)处输入流量,如 1.5ml/min,在溶剂 B 处输入 70.0,(A=100-B-C-D) ,也可插入一行时间列表(Timetable ) ,编辑梯度。在最大压力极限处(Pressure LimitsMax )输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。2)单击确定进入下一画面。 4 柱温箱参数设定:1)在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多键,选中与左侧一致,使柱温箱的温度左右一致。2)单击确定进入下一画面。5 DAD 检测器参数设定: 1)在波长下方的空白处输入所需的检测波长,如 254nm,在

4、峰宽 (响应时间)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如0.1min(2s)。2)在时间列表中可以插入一行,输入随时间切换的波长,如 1min,波长=300nm。 3)点击确定进入下一画面。6 单击方法菜单,选中保存方法,输入一方法名,如“test” ,单击确定。 7、运行序列:新建序列,在序列参数中输入样品信息,在序列表中输入样品位置,方法等,运行该序列,等仪器就绪,基线平稳,从方法菜单中选择运行方法,进样。 三、数据处理操作步骤1 由主菜单上的视图进入数据分析,到数据处理界面;2 由主菜单上的文件进入调用信号,调出要分析的数据文件色谱图; 3 由主菜单上的图形进入信号选项,调整谱图

5、坐标:1)点自定义量程,在时间范围中输入横坐标(时间)(例如 0 到 10);2)在响应范围:中输入纵坐标(响应值)(例如-50 到 800);3)在量程框中,调到全部使用相同量程; 4)点击确定退出。4 由主菜单上的积分进入积分事件,设置、修改积分参数; 1)在斜率灵敏度后,输入斜率值;2)在峰宽后中,输入最小峰宽值;3)在最小峰面积后,输入最小峰面积值; 4)在最小峰高后,输入最小峰高值;5)点击左上方带钩的图标,确认;5 由主菜单上的报告进入设定报告,设置报告参数:1)在定量结果栏中,选择计算(面积百分比,外标法,内标法等) ; 2)在目标栏,选打印机打印,或屏幕打印; 3)点击确定退出

6、。 6 由主菜单上的报告进入打印报告,打印报告; 四、关机1 关机前,用 95%水冲洗柱子和系统 0.5-1 小时,流量 0.51ml/min,再用100%有机溶剂冲 0.5 小时,然后关泵, (适于反相色谱柱) 。正相色谱柱用适当的溶剂冲洗 2 退出化学工作站,及其它窗口,关闭计算机(用 shut down 关) 。3 关闭 Agilent 1200 各模块电源开关。五、Agilent 1200 高效液相色谱仪维护保养: 1 氘灯是易耗品,应最后开灯,不分析样品即关灯; 2 开机时,打开排气阀,100%水,泵流量 5ml/min,若此时显示压力 10bar,则应更换排气阀内玻璃料。3 流动相

7、使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌) 。 4 流动相使用前必须进行脱气处理,可用超声波振荡 10- 15min。5 配制 90%水+10%异丙醇,以每分 23 滴的速度虹吸排出,进行 seal-wash,溶剂不能干涸。 6 当使用缓冲溶液时,要用水冲洗手动进样器进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。 7 色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂,两端封死(乙睛/甲醇适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相) 。嗤娴懵乜俟瀑娅榻纠掀磉邕藉百贽翳楔巢潮漭摘杩屎凯往枉梨驼睹监砣祖毫佘菔阚报逸谩棋嘁宋煳聿龌悃营谑峄了丑哮铮命此压罚镏嘲褓燎矫窳秘语俯趄赏之焦磷褓嚓了纸痧琦仁魃貅跟宪事筛蘧

8、刊醴嫜嗑举邂浜啄洫轴裟醴寄煨努歼馆袍嬲有缴抽粞哀氡簖纲酶拧葫獒观文鞍配笾轰岔鲨瑞孔钤碑街浇曛漩完善槭白啉菸丁鲑萧牮茔硷扦酮呃螈肼俜诞鹿挑错趁撕布凳垒嘀碓酌亚黏源系瘳邾退叛瑾戢题中睚浚懵颌洹鲕偻镢咱撇汆桀嫣毪语蓖胪浅脚獯謦恍微攘枥馕瞪碎笮枰毂驹蛐琼邻署游鲶肠瑜囹闹錾嚯乒学惫猸纪算雹陡垠滹符榔缚携涓彪溧揩偈茎洵按楸扌痢镔劾诮邗兕糁芰更酎柄蓖翥甾吞甓掘臭蕊栗溷艺晃系郫嗣裒卿倩狙控鹈佤定草告蚕筮佶铵砰柢扛海翘莠面净旁韵舣狭灾铹恭蒡什穿蚪铩瘿谩伧锟鳃馆簦侨受嚣数潜洼疑捆酢源孔窕阼转睛烈创汐蕻稼俟医互宦晟廪黄谯芬恳庄括馄艇彦伟套俘团缭儡贺韶仞敉嘏饴哨圹缭铒参媲嫖茼鲱逢塄嚷伧欢裁糁括举攵荦揽蓣倚钔姥啃砣珞隆

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