《抗膜突蛋白抗体与结缔组织病相关间质性肺病的临床相关性研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《抗膜突蛋白抗体与结缔组织病相关间质性肺病的临床相关性研究（37页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中国医科大学研究生学位论文独创性声雕I I I I l U l l l l l l l l M M l l l l l l lI llY 2 2 9 6 5 6 3本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：查主芏日期：翌生! ! 号1D中国医科大学研究生学位论文版权使
2、用授奴书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：盘婆 指导教师签名：趟!日期：21 璺兰旦! 垒目录一、摘要中文论著摘要1英文论著摘要3二、英文缩略语6三、论文前言7日蟊7材料与方法8结果1 1讨论1 5结论1 8四、
3、本研究创新性的自我评价1 9五、参考文献2 0六、附录综述2 3致谢3 6个人简介3 7中文论著摘要抗膜突蛋白抗体与结缔组织病相关间质性肺病的临床相关性研究目的通过检测结缔组织病( C T D ) 相关间质性肺病( I L D ) 患者外周血中抗膜突蛋白抗体水平，分析抗膜突蛋白抗体的临床意义；测定C T D I L D 患者的抗膜突蛋白抗体水平并结合对患者胸部H R C T 和肺功能评估，探讨抗膜突蛋白抗体与间质性肺病之间的关系。方法观察2 0 1 1 年1 0 月2 0 1 2 年1 0 月于中国医科大学附属盛京医院风湿科住院治疗的4 0 例C T D I L D 患者，2 0 例无肺脏、肾
4、脏受累C T D 患者，2 0 例非C T D 患者，2 0 例来自体检中心的健康受试者。应用酶联免疫吸附法( E L I S A ) 检测四组患者抗膜突蛋白抗体浓度，分析C T D I L D 患者与对照组抗膜突蛋白抗体浓度的差异；分别根据高分辨率C T ( 屺T ) 、肺功能指标，探讨其与抗膜突蛋白抗体浓度的相关性。非正态分布的计量资料采用中位数及四分位数间距描述，不同组之间比较采用K m s k a l W a l l i sH 检验，两组之间比较采用B o n f e r r o n i 校正，各因素间的相关分析采用S p e a r m a n 秩相关分析。结果C T D I L D
5、 组患者抗膜突蛋白抗体浓度分别高于C T D 无肺脏、肾脏累及组、病例对照组、正常对照组，并且差异具有显著性( P _ 4 0 m m H g 为肺动脉高压，并根据估测肺动脉收缩压及纽约心脏协会( N e wY o r kH e a r tA s s o c i a t i o n ，N Y H A ) 将之分为轻度( N Y R AI 级、4 0 - 5 5 m m H g ) ，中度( N Y H AI I 级、 5 5 m m H g ) ，重度( N Y H AI I I 级、肺动脉压力升高伴中度右室功能障碍、S V 0 2 _ 4 0 m m H g 为肺动脉高压。三、统计方法采用S
6、 P S S17 0 统计软件进行统计学分析。变量经过S h a p i r o W i l k 检验是否服从正态分布，非正态分布的计量资料采用中位数及四分位数间距描述，不同组之间比较采用K r u s k a l W a l l i sH 检验，两组之间比较采用B o n f e r r o n i 校正，各因素间的相关分析采用S p e a r m a n 秩相关分析；以P 2 5m m H g ( 1 m m H g = 0 1 3 3k P a ) ，肺毛细血管嵌压 1 5 m m H g ，且心输出量正常或降低。系统性硬化症( s y s t e m i cs c l e r o s
7、 i s ，S S c ) 、混合型结缔组织病( M i x e dc o n n e c t i v et i s s u ed i s e a s e ，M C T D ) 、系统性红斑狼疮( s y s t e m i cl u p u se r y t h e m a t o s u s ，S L E ) 、类风湿关节炎( R h e u m a t o i da r t h r i t i s ，R A )是最常见、最易合并P A H 的C T D 。一方面，大部分C T D 合并P A H 的患者症状较轻或者是无症状，所以往往被忽视，很难在早期进行诊断和治疗。另一方面，P A H
8、诊断后的生存率极低，其C T D P A H 的预后更差。所以临床上寻找安全，有效的预测指标和敏感的监测指标已成为研究重点。本文就抗膜突蛋白抗体、抗p 2糖蛋白抗体的结构、表达特点、受体作用机制、生物学作用及其与疾病关系的最新研究进展加以总结回顾。一、膜突蛋白( 一) 膜突蛋白( M o e s i n ，m e m b r a n e o r g a n i z i n ge x t e n s i o ns p i k ep r o t e i n ) 的分子结构人类m o e s i n 表达膜突蛋白的e D N A 核苷酸长度为3 8 3 5 个碱基，3 端有1 9 3 2个核苷酸，并
9、含一个多聚腺苷酸( p o l y A + ) 的加尾序列，5 端有一个1 7 2 核苷酸的非翻译序列，开放读码框内有1 7 3 1 碱基，由此编码5 7 7 个氨基酸。研究表明，小鼠和人的m o e s i n 核苷酸同源性高达9 8 3 ，尤其在3 非编码区和编码区几乎完全一致，主要不同是在5 ，非编码斟1 ，2 1 。膜突蛋白分子由3 部分组成：接近细胞膜的是N 端球形膜结合区，紧接其后的是一个伸长的A 2 螺旋区和一个带正电荷的C 末端肌动蛋白结合点。对鼠E R M超家族的3 个主要成员( e z r i n 、r a d i x i n 和m o e s i n ) 蛋白结构进行比较
10、，发现m o e s i n与e z r i n 和r a d i x i n 分别有8 0 1 和7 1 1 的一致性，但膜突蛋白分子的第4 7 0 4 7 6位缺乏多聚脯氨酸的序列，而后者是e z r i n 、r a d i x i n 所具有。膜突蛋白分子氨基酸的长度为5 7 7 个氨基酸，略短于e z r i l l ( 5 8 6 个氨基酸) 和r a d i x i n ( 5 8 3 个氨基酸) ，分子量大约为7 8 k D 。在C 末端有一高度保守的3 4 个氨基酸序列，为F 2 肌动蛋白结合区，在该区内或其附近有一个苏氨酸残基( m 5 5 8 ) ，它是m o e s i
11、 n 磷酸化位点。在N 末端有结合磷酸肌醇、C D 4 4 、C D 3 4 和其它细胞间粘附分子如I C A M 2 1 ，2 2 等结合区。( 二) 膜突蛋白分子的表达膜突蛋白的表达具有相对的组织和细胞特异性，它常与E R M 家族中的e z r i n ，r a d i x i n 共同表达于细胞膜内面。多种因素可以影响膜突蛋白的表达、细胞的成熟程度，多种细胞因子以及脂多糖( L P S ) 都会影响膜突蛋白的表达。组织中膜突蛋白表达1 3 ：在E R M 家族成员共表达中，每一成员的表达程度因组织不同而有很大差异。研究表明，鼠子宫、肾脏、肝、脾、脑内膜突蛋白表达较高，其次为肠道、心肌等
12、，而在骨骼肌中膜突蛋白表达水平较低。在人体的肺脏和脾脏中存在大量的膜突蛋白表达【6 】，而在肾脏的表达较低。细胞中膜突蛋白表达【7 8 9 】：在体外培养细胞中，包括鼠肝细胞，淋巴细胞，纤维母细胞，畸胎瘤细胞以及人类的上皮细胞，枯否细胞等均可见m o e s i n 表达。M o e s i n 分子在多种组织的内皮细胞中均有丰富的表达，同时还分布在某些特定上皮细胞中，例如外分泌腺的导管细胞以及食道鳞状上皮的基底层细胞1 0 1 。用原位杂交和免疫组化法分析，m o e s i n 在细胞内位于细胞与细胞间的接触面、细胞与基质接触面、有丝分裂期的分裂面、微绒毛。( 三) 膜突蛋白的生物学功能1
13、 、参与维持细胞形态和运动2 4在真核细胞中，细胞膜的结构形态主要由细胞骨架来维持，细胞骨架同时还参与胞吞、胞吐、信号转导及细胞运动等功能。膜突蛋白分子表达分布的位点，决定了它的基本功能就是与E R M 其他成员一起维持细胞的基本形态和运动。作为细胞骨架的主要成员肌动蛋白丝存在于胞膜的内面，但与胞膜并不直接接触，E R M 家族成员便是连接肌动蛋白丝与胞膜的重要物质之一，参与亚细胞骨架构建和接触识别等重要功能【1 1 1 。这些成员大多位于丝状突和膜伸展部位，与亚细胞骨架、接触识别有关。同时膜突蛋白分子还有一个细胞表面区域，因而具有细胞信号传导功能。有研究表明，膜突蛋白在细胞接触，伸展和细胞运
14、动过程中，发生动态变化，对巨噬细胞、淋巴细胞、内皮细胞及血小板等的吞噬、移动和递质传递功能起着重要调节作用【1 2 1 3 1 。2 、参与细胞生长、迁移的调控有实验表明，在培养的原代神经元细胞中抑制膜突蛋白根蛋白的表达，可抑制生长锥和神经元轴突的形成【1 4 1 。体外培养的H e l a 细胞在增殖分裂时，其卵裂沟中E R M 蛋白磷酸化明显增多，参与胞质分裂过程【1 5 】。埃兹蛋白第3 5 3 位酪氨酸残基磷酸化可激活P 1 3 K A k t 信号通路，进而抑制细胞凋亡。但另有研究表明，在培养的人脐静脉内皮细胞( 瑚E C s ) 中，埃兹蛋白可被R O C K 激活而作为信号分子转
15、位入核内，抑制细胞周期素A 的转录与表达，从而抑制H U V E C s 生长增殖【1 6 】。因此，E R M 蛋白在不同类型的细胞中对细胞生长的作用及其机制尚需进一步研究。研究表明，体外培养的L L C P K l 肾上皮细胞中转染埃兹蛋白反义寡核苷酸后，可抑制上皮细胞迁移及小管形成【1 7 】。3 、膜突蛋白参与细胞膜功能E R M 家族蛋白的主要功能是作为肌动蛋白细胞骨架和细胞质膜的连接细胞膜上与E R M 结合的蛋白分子称为E R M 结合膜蛋白( E R Mb i n d i n gm e m b r a n ep r o t e i n s ，E R M B M P s ) ，可分为两类【1 8 】：一类介导E R M 与质膜的直接结合如C D 4 4 为首先被发现的E R M B M P s ，属于这
