坛紫菜品系间遗传差异的rapd分析

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1、坛 紫 菜 品 系 间 遗 传 差 异 的! “# $分 析%王勇* 2 x 86$ “v* - ( :! 3 *氯仿8异戊醇9 , ; :! 3各抽提一次7水相经蛋白酶8#?3于 A B处理!C7 加入! 8 ! “体积D ()E 8 FG D %溶液处理4 H 6*再经过酚8氯仿8异戊醇9 , 0 :, ; :! 3 *氯仿8异戊醇9 , ; :! 3各抽提一次7,倍体积乙醇沉淀*( B保存备用7! + , + ,I ). 2 . D I扩增及电泳检测总反应体积, 0 = ? *反应体系中包括! J. D I反应缓冲液* , + 0 #$ % K离子* “ + , #$ % L F(. *

2、 ! M(G N酶* ! “ O F)模板* “ O 随机引物7反应循环参数为H ; B预变性0 #P O *然后H ; B变性! “ Q * 5 B退火! #P O * A , B延长, #P O *一共; 0个循环*最后* A , B延伸! “ #P O 7于; B保存7取! 0= ?反应 产物于! R 0 -琼脂糖凝 胶9含“ + 0= 8#? *. D2 ! *. 2 , * . 2 5 * . 2 ! , * . 2 ! 5 * . ,条引物*可以扩增出 F)片段7表! ! “条随机引物的碱基序列和分别扩增出的F )条带数及其中的多态性 F)片段数目( G % a! _ a N b

3、a O S a Q$ c d C ad a Oe f P #a f Q * d C aO b # a f$ c Q S $ f G % aG #e % P c P a LG O Le $ % X #$ f e C P S F) G O L Q引物序号. f P #a f碱基序列_ a N b a O S a Q0 g d $ g扩增F)片段总数( $ d G % O $ +$ c G O L Q多态性 F)片段数. $ % X #$ f e C P S G O L Q. )2 ! AZ)D D ZD ( (Z(. D2 ,Z(Z)Z ZD Z(D;,. ! ;. Z2 Z( ZD D ()D

4、D! ,! ,. 2 “ 5Z)D )D D D D! ;! ;. 2 ! 0)(ZZ DZ D )Z. 2 , “ZZZ )Z )D )(D! ,! ,. 2 ! “)D)D ZD Z Z0;. 2 ! D ( ZZZZ D (Z)0. _ 2 ! !)Z(D ZZ Z(Z Z! ,! !,青岛海洋大学学报,“年在此基础上!根据“ #$片段的数量和亮度选出% ? A A ; 9B C * ! D8分别为E ! E KI J K B CK L B B V; K,- $. / !, - 0. 19 B K V X ; ) :; ? A A ; 9B C ! 9Z * KVI = ; Y = ;

5、B G L? I J B = ; K I J E ! E ; A) 9* VI B B ? = * A ? B ; D G之间的相似系数 分别为= * 和= * F = ;说明不同地域的环境因素是造成坛紫菜遗传差异的主要因素和D G之间的相似系数;原因可能为栽培品系之间基因流动造成的其遗传差异缩小 I ? J的特异 性片段; G = 4 P的KL F F ? = 4 P的K L F = =4 P的KLCD D和C%E;M# 因而;通过两个引物扩增图谱的结合分析;可以区分鉴定这六个坛紫菜品系 R O ! F A O ! F BA %( Y Z 5 8 ( a ; / 1 5 - * K ( 6

6、/ 3 ( 8( 0 5 1 ( . 0 . : - 5 b / 3 2 Y - 1 ( b 5 3 9 ( 1 + Q F H H ? ; ? ! R G O G G F W ( V. 0# 5 3 Z ; / 1 5 - * Q # + 5 / . P + , 1 5 * W W . Y 3 0 5 - . : %5 3 ( 0 / o ( . 1 / 2 + 0 . - . ) , ; F H H B ;? R ? ! ? G# 5 1 9 5 , % “;%5 2 X 5 , Q%;/ 1 5 -*Q / b / 5 - ( 0 ) ) / 0 / 1 ( 2 8 5 3 Z / 3

7、6 ( 0 p q r e s e j nt h u j nQ + . 7 . P + , 1 51 + 3 . Y ) +1 + / 3 5 0 7 . 85 8 P - ( : ( / 7 P . - , 8 . 3 P + ( 2 K L F H H A ; ! H R ! F ? ! ! !? K Y 1 2 + / 3 W X 5 P 3 5 Y 0 K * Q 5 0 7 . 85 8 P - ( : ( / 7 P . - , 8 . 3 P + ( 2 K L Q + . 7 . P + , 1 5 * W W . Y 3 0 5 - . : F H H ; ? R ! ? O

8、 ! O AOC . _E;# + 5 0 )c%;/ 1 5 -*%. - / 2 Y - 5 3 2 + 5 3 5 2 1 / 3 ( 5 1 ( . 0 . : | h m u h k k j nx l r z z k j n 5 0 7 c*k e r e ! j l k j n# + 5 / . P + , 1 54 ,B!青岛海洋大学学报!=年! “ # $ %= “ 4 - ( # “ 7:! ?! # , 94 # = “ 4 ( - # “ 7 P( ? , - 2( ! , 6, ) “ # ( . , “ -“ 7 + , 5 + ? %“ # 94 * # P( .

9、+ 0 “ *9( . # :* ( 6Y * , A B D B D Z E C I Z B GC I D F _ a b c d ce f g h _ h i d jk l d i d e _ me _ no p q r s t q us u v w u x y z v | i l d _ cT( - 5L“ - 5IW , 4Q , , ( -AW 4 “, ! 4 -AU / 2 S “ . ( # # $B F RS+ I H Z( - 6V ; Z F Z . + Z F ZF I H ZF S + S + “ 4 5 +* “ %! ( , - 5. + / 2 I h bJe l K c R / 2 &/ & ( - & ) * C 9 ( 9BIII期/ L 3王勇等E坛紫菜品系间遗传差异的2:0 8分析

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