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1、实验六培养基的制备及常用器皿的准备 河南工业大学微生物学实验室,1、学会培养基的制备和常用器皿的准备方法。2、学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法。,一、实验目的及要求,二、实 验 原理,培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。培养基的种类很多，使用的原料也各有差异。但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所需的C源、N源、无机盐、生长因子以及水等。另外，培养基中一般含有适宜的pH值，一定的氧化还原电位及合适的渗透压。任何一种培养基制成后应及时的灭菌，以备培养菌使用，一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。,三、实 验 器 材,1、培养基：营养琼脂培养基、改良查氏培养基。2、器皿：移液管、培养皿、试管、
2、三角瓶、搪瓷缸、量筒等。3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱。4、其他：报纸、纱布、棉花、棉线绳。,实验所需物品,综合性实验每排5人一组，每组请备齐下列物品：1、洗干净的培养皿10个。2、洗干净的试管10个。3、洗干净的无塞三角瓶2个，具塞三角瓶2个。4、培养皿桶1个。5、1-2ml刻度吸管3支。6、洗耳球1个、玻璃棒1支。7、搪瓷量杯1个。8、量筒1个。纱布、棉花、棉绳、培养基、天平等在最后一排实验台,四、实验方法和步骤,1、营养琼脂培养基的配制称量1.0克可溶性淀粉。加少量水加热溶化，然后加入4.5克营养琼脂，加水至100毫升，煮沸后倒入无塞三角瓶中，加棉塞报纸包扎后用高压蒸汽灭菌器灭
3、菌。,四、实验方法和步骤,2、改良查氏培养基NaNO3 2gK2HPO4 1gKCl 0.5gMgSO4 0.5gFeSO4 0.01gNaCl 60g蔗糖 30g琼脂 20g水 1000ml煮沸后倒入无塞三角瓶中，加棉塞灭菌。,建议每班集中配1000ml，然后均分到各组。,四、实验方法和步骤,2、无菌水的制备（稀释用） 取9ml蒸馏水于试管（18180mm）中，塞棉塞，报纸包扎后湿热灭菌。 取90ml蒸馏水于具塞三角瓶中。,手提小型高压蒸汽灭菌,立式高压蒸汽灭菌,四、实验方法和步骤,四、实验方法和步骤,4、常用器皿准备（干热灭菌） a. 刻度吸管的包装 b. 培养皿的包装,电热鼓风干燥箱（干热灭菌用）,1、高压蒸汽灭菌和干热灭菌各适用于哪些物品？2、两种灭菌技术应注意哪些关键操作？3、培养皿等干热灭菌前包扎的目的？,五、 作 业 题,
