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1、动物细胞工程动物细胞与组织培养烧伤病人图片异体皮肤移植图片动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体制备体细胞克隆细胞核移植动物 细胞 工程 技术动物细胞工程 的基础动物细胞培养1、概念（人教版）动物细胞培养就是从动物机体中取出 相关的组织，将它分散成单个细胞，然后 ，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长 和繁殖。讨论 1、动物细胞培养的原理是什么？2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并 解释原因。3、组织分散成单个细胞的方法是什么？ 其理论依据是什么？4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件 ？阅读课本 观察图片 ，简述动 物细胞培 养的基本 过程动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养
2、液制成细胞 悬浮 液10代 细胞部分细胞“癌变”， 遗传物质改变，无 限传代动物细胞培养不能 最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2、过程动物细胞生长特性：细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞 就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑 制。细胞贴壁过程3.有关概念:v原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞 。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培 养。v传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞
3、悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养 ，称为传代培养。v细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞， 大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这 种传代细胞为细胞株。v细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状 态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养 条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。v细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具 有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。细胞 悬浮 液10代 细胞50代 细胞无限传 代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细 胞系？多数组织细胞固定在表面 生长和分裂。随细胞增多，细胞
4、就会停止分裂增殖遗传物质改变思考讨论 1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因。 细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。肿瘤组织或细胞 正常组织或细胞 拓展-动物组织或细胞培养的难易程度幼体组织或细胞 老龄组织或细胞分化程度低的组织或细胞 分化程度高的组织或细胞2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未
5、发生大 的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合 用于药物测试、基因表达等实验研究。 3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对 取出的动物组织进行处理？胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什 么成份？.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个 细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 为什么？进一步思考：否
6、胰蛋白酶水解蛋白质蛋白质蛋白质和磷脂能注意时间的控制不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与 胰蛋白酶的最适PH较接近多细胞动物和人体的细胞 都生活在内环境中，根据你所 学的知识，认为体外培养细胞 应该模拟内环境的哪些内容呢 ？动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、 嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。 ）保证细胞顺利的 生长增殖3、适宜的温度36.5+（-）0.5度4、充足的氧气和适宜的酸碱度O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）问题：1、培养基的类型（1）天然培养基
7、：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件2、动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组织培养基有何独特之处？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞 大都生活在液体的环境） 2、成分中有动 物血清等获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞产物快速繁殖、培育 无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物 血清蔗糖、植物激 素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织和动物细胞培养的比较动物细胞培养应用v大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素 、单克隆抗体）v
8、获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮v培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断 某种物质的毒性v为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据课堂小结动物细胞和组织培养（原理、材料 选择及原因、一般过程、培养条件、 主要应用）注意： 概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、 细胞系 胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 动物细胞培养和植物组织培养的区别思考与探究：如何用细胞培养技术，为烧伤病 人植皮？取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植这只老鼠身上的“人 耳”是由我国科学家 曹谊林教授利用细 胞工程技术复制出 来的。电激处理使供电激处理使供 体核进入受体体核进入受体 卵母细胞构建卵母细胞构建
9、重组胚胎重组胚胎卵母细胞采集、培养卵母细胞采集、培养MM期期卵母细胞卵母细胞供体牛供体牛供体细胞注入供体细胞注入 去核卵母细胞去核卵母细胞代孕母牛代孕母牛克隆牛克隆牛体细胞培养体细胞培养去核卵母细胞去核卵母细胞去核去核胚胎胚胎移植移植体细胞核移植过程体细胞核移植过程 （体细胞克隆动物）（体细胞克隆动物）二.动物细胞核移植技术和克隆动物将动物的一个细胞核，移入一个已 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并 发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最 终发育为动物个体（克隆动物）分 类胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度高，恢复全能性不容易(一)、 动物细胞核移植概念
10、：多莉羊的多莉羊的培育过程培育过程1、谁是“多莉”的母亲？ 2、“多莉羊”是雄还是雌？ 3、是否符合孟德尔遗传？问 题卵细 胞C母绵羊子宫母绵羊母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵细胞细胞拆合技术妊娠(三)、体细胞核移植技术的应用前景： 1、在畜牧业中 可以加速家畜遗 传改良的进程2、保护濒危物种3、医药卫生领 域生产医用蛋白 质及组织器官的 移植4、了解胚胎发育和 衰老过程；追踪研 究疾病的发展过程 和治疗疾病体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题（1 1）成功率非常低）成功率非常低（2 2）克隆动物以表现早衰、生理缺）克隆动物以表现早衰
11、、生理缺 陷等健康问题陷等健康问题1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 - -（ ）A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是 -（ ）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD课堂反馈练习3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因 是这样的组织细胞 （ ）A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强D4、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ）A限制性内切酶 BDNA连接酶C胰蛋白酶 D果胶酶C5、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ ）A动物细胞培
12、养的目的就是为了获得大量的细胞分 泌蛋白B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中D培养至50代后继续传代的细胞是细胞株6、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下 无限制地传代下去，这种传代细胞称之为（ ）A 原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系BD7、动物细胞培养的正确过程是（ ） A.原代培养传代培养细胞株细胞系 B. 原代培养传代培养细胞系细胞株 C.传代培养细胞系原代培养细胞株 D. 原代培养细胞系传代培养细胞株 8、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正 确的是（ ） A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐 、维生素和动物血清 B原代培养
13、的细胞一般传至10代左右便会出 现生长停滞 C动物细胞培养一般能够传到4050代，但 其遗传物质发生了改变 D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得 大量自身健康细胞AC动物细胞体外培养时，通常要在培养 基中补充一定浓度的某些物质。 右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影 响的实验结果。从该图提供的信息可以 获得的正确结论有( )A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 B有无血清对正常细胞培养的影响不同 C培养基中补充血清有助于正常细胞的 培养 D培养基中是否补充血清对癌细胞的培 养影响不大BCD 9、07年江苏高考题10、下图是动物细胞培养的基 本过程示意图。请据此图回答 。(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取 自_。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理 是_，然后用 酶处理，这是为了 使细胞分散开来。这样做的目的是 _.(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有 _ _等。在此瓶中培 养一段时间后，一般传到第 代，有许多细 胞衰老死亡，到这时的培养称为_. (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_ 处理，然后配置成_，再分装。 (5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细 胞全 部死亡。原因是_。幼龄动物的器官或组织、动物胚胎剪碎 胰蛋白 使每个细胞能与培养液接触 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 10原代培养胰蛋白酶 细胞悬浮液细胞没有发生瘤变
