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1、人用药品国际注册的 药学研究技术要求浙江省药品检验所陈镇生分析方法的确证试验 （ Q2A ）简介： 需要确证的分析方法类型 ：附件A: 术语 a简介m内容o分析方法确证的参数o术语和定义m分析方法确证的目的证明该方法适合预期目的需要确证的分析方法类型m鉴别试验m杂质定量试验m杂质限度试验m原料或制剂中活性成分以及制剂中选 定组分的定量测试典型的确证参数(Characteristics)m准确性(Accuracy)m精密度(Precision)o重复性(Repeatablity)o中间精密度(Intermediate Precision)m专属性(Specificity)m检测限度(Detect
2、ion limit)m定量限度(Quantitation limit)m线性(Linearity)m范围(Range)m耐用性(Robustness)表：分析方法的类型 定性鉴别 杂质检查 含量分析； 溶出 度(含量测定)；项目 定量 限度检测 含量效 价准确度 - + - +精密度重复性 - + - + 中间精密度 - + - + 专属性 + + + + 检测限度 - - + -定量限度 - + - - 线性 - + - +范围 - + - + 注意：- 表示通常不需确证的项目；+ 表示通常需确证的项目；假如测定了重现性（见术语表），中间精密度可不测定；缺乏专属性的分析方法，应由其他分析方法
3、来作补充；有些情况下需要。a下列情况需重新确证m原料药合成方法的改变m制剂组分的改变m分析方法的改变a术语表1分析方法（Ana1ytica1 procedure）分析方法指的是进行分析的方式，应详细描述进 行每个分析试验所必需的步骤。它包括（但不局限于 ）：样品、参比物、试剂的制备，仪器的使用，校准 曲线的绘制，计算公式的运用等。2专属性（Specificity）专属性是指在一些可能存在的组分如杂质、 降解产物、基质等的存在下，对被分析物质的准 确可靠的测定。一种分析方法缺乏专属性时，应由其他分析 方法作补充。专属性有以下含义：定性鉴别：确保被分析物质符合其特性。纯度检查：确保采用的分析方法可
4、检测出杂 质，如有关物质、重金属、溶剂残留量等。含量测定（含量或效价）：可提供样品中被 分析物的含量或效价的准确结果。3.准确性(Accuracy)准确性指的是真实值或认可的参考值与测量值之 间相近程度。准确性有时也称真实度。 4.精密度(Precision)精密度指的是规定条件下对同一匀质样品多次取样 进行一系列检测结果的一致程度（离散程度）。精密度 可以从三方面考虑：重复性、中间精密度、重现性。 精密度检查应使用同一匀质的、可信的样品。如果 得不到，可用人工制得的样品或样品溶液进行研究。分析方法的精密度通常以测量法的变异性、标准偏 差或变异系数来表达。4.1重复性(Repeatabilit
5、y)重复性是指在同样的操作条件下较短时间间隔的精 密度：也称为日内差(Intra-assay precision)。 4.2中间精密度(Intermediate Precision)中间精密度指的是试验室内部条件改变（如：不同 天、不同分析测试者、不同仪器等）情况下的精密度。 4.3重现性（Reproducibility） 指不同试验室之间的精密度，常用于合作试验研究 (collaborative studies)中的方法学的标准化研究。 5检测限度（Detection limit） 检测限度指的是样品中的被分析物质能够被检测到的最 低量，通常无需定量。 6定量限度（Quantitation
6、limit）某种分析方法的定量限度是指具有合适准确性和精 密度的条件下，能够定量测定分析组分的最低限量。它 是样品中含量低的化合物定量分析的参数，特别适用于 杂质和（或）降解产物的测定。 7线性（Linearity）分析方法的线性是指所得检测结果与样品中被分析 物的浓度（含量）成比例关系的性能。 8范围（Range）分析方法的范围是指在样品中被分析物的较高浓度 (量)和较低浓度(量)之间的区间、已证实区间内具有合 适的准确性、精密度、线性。 9耐用性（Robustness）分析方法的耐用性是指试验参数适当地发生细小改 变时，测量能力保持不受影响，可用于说明正常使用时 的可靠性。 分析方法的确证
7、：方法学 （ Q2B ）1：简介m目的：o对每一种分析方法中参数的确证提供指导和建议o申报中建立数据的表示方式m注意：o整个方法学确证中，必须采用经过完全确认的、 纯度已知的参比物质来确证。o参比物质的纯度要求与使用目的应一致2：专属性m鉴别o通过与参比物（结构相同）比较得到正结果或负结果o通过与被测物结构相似或相关物质比较得不到正结果m含量测定和杂质检查o色谱方法 色谱图(标出每一成分)分离度专属性的标准o非专属性方法 用其他支持性的分析方法来辅助n可得到杂质 用加入法n得不到杂质 强力破坏后用不同方法比较测定峰的纯度( 二级管阵列、质谱)3：线性原料药（标准储备液） 至少5个混匀的制剂组方
8、 浓度系列采集信号 测定统计（线性关系或函数关系）4：范围m在尽可能大的浓度范围内均能获得良好的线性、精密度 和准确性m最小的规定范围：o对原料药或制剂的含量测定 80120%o对含量均匀度 70 130%o对溶出度 规定值的20%o对杂质检查 为报告的杂质水平至所订限度的120%o对已知有异常功效或有毒杂质 与其“水平”相当o同法测含量和杂质(且用100%标准品) 从杂质量到120%5：准确性m含量测定原料药o用该方法去测已知纯度的 物质o将该法与另一成熟方法比 较o在精密度、线性和专属性 建立后得出制剂o用该方法去测按处方量制 成的混合物（加入已知量 被测物）o在制剂中加入已知量主药 或与
9、另一成熟方法比较o在精密度、线性和专属性 建立后得出m杂质（定量）o在样品（原料/制剂）中加入已知量的杂质o无法得到杂质/降解物的，与采用其他方法测得的结果比 较，可以使用原料的响应值m申报数据o在规定的线性范围，对3个浓度测9个数据来评价o回收率或平均值与真值的差异及它们的置信区间来评价6：精密度含量测定和杂质的定量测定均应作精密度考察m重复性o在规定范围内测9次（3种浓度/每种重复3次）或o在试验浓度100%时测6次m中间精密度 确定随机事件(日期、分析者、仪器等)对精密度的影响m重现性 试验室之间m申报数据 均应报标准差、相对标准差和置信区间7：检测限度m根据直观评价（用于仪器或非仪器）
10、m根据信噪比（用于有基线噪音的方法） 已知低浓度被测物的信号 3 2空白样品的信号 1 1m根据响应值的标准偏差和斜率检测限度（DL）= 3.3/s：响应值的标准偏差（通过空白样品测背景响应值或Y 轴截距）s ： 校正曲线的斜率（通过被测物的校正曲线求得）=或m申报数据o检测限度 o检测限度的测定方法oDL是由直观评价或信噪比得来（报相关的色谱图）oDL是由计算或外推法得来的估计值，则应专门对一些已 知接近或就在限度上的样品进行分析ACs=1 =0.1 DL=0.33 s=1/2 =0.3 DL=1.98 8：定量限度m直观评价在准确度和精密度符合要求的前提下，能测得的最小量m根据信噪比（用于
11、有基线噪音的方法） 已知低浓度被测物的信号 10 空白样品的信号 1 m根据响应值和斜率的标准偏差定量限度（QL）= 10/s=：响应值的标准差（通过一组空白样品的分析或 根据校正曲线）s ： 校正曲线的斜率m申报数据o定量的限度 o定量限度的测定方法o分析一些已知接近限度或限度上的样品来证实9：耐用性证实在某些参数由微小的变异后，分析方法仍可靠典型例子：o供试液的稳定性o萃取时间o在HPLC中流动相的pH值的变化流动相组分的变化柱子不同（不同批号和供应商）温度不同流速不同o在GC中不同柱子（不同批号和供应商）温度不同流速不同如分析方法对分析参数变化是敏感的，则 该分析参数就应适当控制或在方法中注明。Q2：方法学一九九九年九月完Q精密度试验m应使用同一均质、可信的样品m多次取样进行一系列试验称量溶解(回流提取、超声)加各种试剂反应温度、时间、光照等时间影响供试液测定
