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1、【研究原著】 炒紫苏子醇提物对血小板聚集活性的影响董敏1,吕丽2,陆继辉3,张美娟3,李笛3作者单位: 1.大连大学附属新华医院检验科,辽宁 大连116021; 2.大连 医科大学检验系116023; 3.大连大学医学检验系学生116622 作者简介:董敏(19632),女,长春人,主管检验师。研究方向:高血脂。【摘要】 目的:探讨炒紫苏子醇提取物对腺苷二磷酸(ADP)、 花生四烯酸(AA)和血小板活化因子(PA F)诱导血小板聚集功能的影响。 方法:用诱导剂ADP(终浓度3mol?L)、PA F(终浓度7. 2 nmol?L)、AA(终浓度0. 35mmol?L)分别激发血小板聚集,观察炒紫
2、苏子醇提取物对血小板聚集的抑制作用。结果:炒紫苏子醇提取物体外能抑制由ADP、PA F和AA激发的兔血小板聚集,并表现明显的剂量依赖关系。其中,对PA F诱发的血小板聚集作用有更强的抑制作用, 80mg?L就表现出明显的抑制作用(P 8% (Folin2D方法)。(2)PA F, Sigma产品,p27568(lot: 092k5226);AA , Sigma产品,A 9673; ADP, Sino2American Biotec 产品,MD0601。ADP溶于磷酸盐缓冲液中; PA F溶于含0. 25%BSA的T ris N aCl液中, pH7. 4; AA溶于100 mmol?L N a
3、2CO3溶液中,现用现配2。(3)LBY2NJ2四通道血小板聚集仪,北京普利生仪器中心。1. 2 方法1. 2. 1 动物处理 动物为新西兰大耳白兔,雄雄各半,体重23 kg,大连大学动物实验中心提供。8126中国误诊学杂志2007年11月第7卷第26期 Chin J M isdiagn,Nov 2007 Vol 7 No. 261. 2. 2 抗血小板聚集活性 富含血小板血浆(PRP) 和贫血小板血浆(PPP)的制备兔自颈动脉放血,以3. 8%的枸橼酸钠91抗凝收集于塑料离心管中,室 温, 1 000 r?m in离心10 m in,取上层液即为PRP,剩 余血液再以3 000 r?m in
4、离心15 m in,取上层液为PPP,作为测定时调零或用于调整PRP中的血小板。 实验过程中, PRP中的血小板数控制在约20万 30 万?mm33。血小板聚集性测定体外实验。 按Born氏比浊法 原理采用LBY2NJ2四通道血小板聚集仪进行测定。取PPP 0. 2 m l于比浊管中,置于预热孔中;取PRP0. 2 m l于另一比浊管中加溶媒或药液10l,在预热孔 中37温育10 m in。测定时将预热后的PPP管转插 到测试孔中,按 “调零” 键,计算机自动调零。取出PPP 管插入PRP管,按 “调幅” 键,则自动调幅。 然后在磁棒搅拌下分别加入诱导剂ADP(终浓度3mol?L)、PA F(
5、终浓度7. 2 nmol?L)、AA(终浓度0. 35 mmol?L),并按 “测试键”,记录5 m in内血小板最大聚集率。 血小板聚集抑制百分率= (对照管最大聚集率-用药 管最大聚集率)? 对照管最大聚集率100%。2 结果 炒紫苏子醇提物对ADP、PA F和AA诱导的血 小板聚集功能影响分别见表13。表1 炒紫苏子醇提物对ADP诱导的血小板聚集功能影响组别药物浓度(mg?L)动物数血小板聚集率(% )血小板聚集抑制率(% ) 阴性对照-1072 . 520 . 6 炒紫苏子醇提物80956 . 122 . 022 . 6 1601056 . 223 . 122 . 1 320953 .
6、 224 . 626 . 7 6401051 . 618 . 0328 . 8 1280839 . 524 . 53 345 . 6注:和阴性对照组比较,3P 0 . 05,3 3P 0 . 01。表2 炒紫苏子醇提物对PAF诱导的血小板聚集功能影响组别药物浓度(mg?L)动物数血小板聚集率(% )血小板聚集抑制率(% ) 阴性对照-665 . 58 . 1 炒紫苏子醇提物80648 . 615 . 8325. 9 160745 . 013 . 7331. 3 320639 . 716 . 83 339. 4 640734 . 913 . 23 346. 7 1280729 . 19 . 13
7、 355. 6注:和阴性对照组比较,3P 0 . 05,3 3P 0 . 01。表3 炒紫苏子醇提物对AA诱导的血小板聚集功能影响组别药物浓度(mg?L)动物数血小板聚集率(%)血小板聚集抑制率(%)阴性对照-755. 810. 4 炒紫苏子醇提物80649. 712. 411. 0 160743. 316. 222. 4 320639. 720. 728. 8 640731. 815. 33 343. 0 1280828. 418. 13 349. 2注:和阴性对照组比较,3 3P 0. 01。3 讨论 血小板在不同诱导剂的作用下发生不同的活化反应。体外实验结果表明炒紫苏子醇提取物均明显抑制
8、ADP、PA F和AA引起的血小板聚集,并与浓度呈正 相关性,提示炒紫苏子醇提取物表现出非选择性的抑 制血小板活化反应。在ADP、PA F和AA三种诱导剂 中,炒紫苏子醇提取物表现出对PA F诱导的血小板聚集具有更强的抑制作用。炒紫苏子醇提取物对ADP、PA F和AA途径均有抑制作用,可能通过一共同环节 抑制血小板活化。目前公认,血小板活化有ADP、AA 和PA F三条途径,但最终通过降低血小板内cAM P 水平并增加细胞内游离钙离子浓度而引起血小板活化聚集4。大多数黄酮类化合物能够抑制cAM P2磷酸二 酯酶(PDE),升高cAM P含量,细胞内Ca2+降低,从而 产生抑制血小板聚集作用5。
9、【参考文献】1 Q infu W ang, YongqiW ang, Chao Yu, et al . Anti2allergic pharma2ceutic effects of EtOH Ext. of roasted perilla seed. U. SJ . Chi2nese International Journal of Bethune M edicine, 2005, 3 (2): 30235.2 李惠兰,闫彩珍,张荣平,胡建林.滇丹参注射液对兔血小板功能的影响J .天然产物研究与开发, 2002, 14(1): 70273.3 Yin2ye WANG, Zhi2yu TANG,
10、M in DONG, et al . Inhibition ofplatelet aggregation by polyaspartoyl L2arginine and its mecha2nism J . Acta Pharmacol Sin, 2004, 25(4): 4692473. 4 淤泽溥,林亚明,饶高雄,等.脑血清对血小板聚集功能的影响J .云南中医学院学报, 2001, 24(2): 123.5 沈志强,雷伟亚,段理,等.灯盏花总黄酮对血小板聚集和血栓形成的影响J .天然产物研究与开发, 1999, 12(1): 22225.收稿日期: 2007207220;修回日期: 200
11、7208222 责任编辑:许纬洲【征稿启事】 中国误诊学杂志(旬刊)征稿中国误诊学杂志 由卫生部主管,中华预防医学会主办。是中国科技论文统计源期刊、 中国科技核心期刊,是高水平普及型的误诊学研究的权威性专业期刊。刊号: ISSN 100926647,CN 1124518?R,邮发代号: 22763,每册订价15. 00元。凡与误诊学研究有关的论著、 综述与进展、 专家讲座、 卫生管理、 医患纠纷与对策、 经验教训分析、 临床用药、 调查研究、 护理管理、 基础护理、 护理教育、 整体护理、 心理护理、 家庭护理、 康复护理、 社区护理、 专科护理、 健康教育、 护理教学研究等论文均可投稿。地址:北京市朝阳区左家庄前街1号百灵大厦 邮编: 100028,电话: (010)64682836 649160,传真: (010)64630812,E2mail: zgwzx188. com。9126中国误诊学杂志2007年11月第7卷第26期 Chin J M isdiagn,Nov 2007 Vol 7 No. 26
