蛋白质纯化武器设备篇

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1、蛋白质纯化武器设备篇蛋白质纯化武器设备篇工欲善其事，必先利其器。对照一下，你的实验室还缺那些？ （1）超声波细胞破碎机 适用于 5100g 湿菌体超声破碎，实验室规模用。一般可选择直径 10、15、20mm 的超声探 头。推荐国产机器为宁波新芝。 （2）高压匀浆机 大规模生产用，对菌体量无限制。破菌效果好，但要注意冷却。 （3）高分散乳化机 均匀悬浮菌体用，比搅拌快，均匀性好，特别适合于大规模生产。另外，大规模生产时缓 冲液的配制很有用，可快速溶解、混匀。推荐品牌：IKA 国产品牌：FLUKO； （4）中空纤维超滤柱 大规模生产时做菌体收集用，要配合大蠕动泵及压力表。 （5）高速冷冻离心机 小

2、试、中试菌体收集用，破菌后离心，包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌： BECKMAN、日立、Eppendorf （6）磁力搅拌器 就是搅拌用了。缓冲液配制，包涵体溶解等。推荐品牌：国产的都行，最好配 4 或 6 工位 的。 （7）真空泵 离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌：Millipore WP61 型。 （8）过滤器 同真空泵配合使用。推荐品牌：Sartorius 烧结金属垫板的不锈钢 50mm 滤器。 （9）pH 计 缓冲液配制、样品 pH 调节用。推荐品牌：梅特勒 （10）电导仪 就是测定缓冲液及样品的电导了。 （11）纯水仪 如果没有管道系统的纯水设备，那就必需

3、要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。 推荐品牌：MINI Q (12)紫外可见分光光度计 测定蛋白浓度。推荐品牌：Beckman，岛津 （13）核酸蛋白检测仪 纯化时在线监测。如果不是用 AKTA、Bio-Rad 之类的高级仪器，就必须要了。 （14）蠕动泵 简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌：兰格、GE 公司 P50。 （15）纯化系统 高级的纯化系统了。推荐品牌：AKTA explorer、AKTA Purifier。不推荐 bio-rad 的 DUOFLOW。 （16）膜超滤器 蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌： Millipore

4、 Labscale、Pellicon（泵可用国产的兰格） （17）蛋白电泳仪SDS-PAGE、Westblot 用。推荐品牌：Bio-Rad。 （18）脱色摇床 电泳染色、脱色用。 （19）制冰机 破菌时冷却用。 （20）恒温培养箱 融合蛋白酶切去除 tag 时恒温用，做 ELISA 时用。 （21）凝胶成像仪 就是给电泳胶及 WB 拍照片用，要配照片打印机哦。就是一台数码相机，硬件各品牌没有本 质差异，主要看那家的软件做的好，界面友好。 （22）电磁炉 加热电泳样品。 （23）微波炉 电泳考染脱色。加热水，溶解尿素、硫酸铵等。 （24）微量取样器 就是枪了。从 1ul 到 5ml 都要的。还

5、有一种电动的，可以用刻度吸管。推荐品牌： Gilson，eppendorf (25)超净工作台 做蛋白样品的无菌过滤用。 （26）冰箱 不说了。 （27）电风扇 小量样品的浓缩风干。 （28）电子天平 称重了。两种精度：0.1mg 和 0.01g。推荐品牌：梅特勒 （29）空调 这个我相信大家都不会反对，也是蛋白纯化对环境的要求。 （30）超声波清洗机 缓冲液脱气用，当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时，有机溶剂与 水相混溶时脱气。 （31）酶标仪、洗板机 测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时，SDS-PAGE 无法有效监测 就必须应用 Elisa 方法。 （32）恒温干燥箱、干烤箱 恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥，设定温度 40-60 度。 干烤箱用于干烤灭菌，内毒素去除等，设定温度 180-220 度。 （33）酸缸 就是做细胞培养常用的那种浸泡容器的东东，对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡 过。 （34）UPS 电源 保护层析设备，防止数据丢失。 （35）层析冷柜 低温冷室 4 度双门的那种大冷柜，可以把层析柱放进去，对温度敏感的蛋白纯化需要。 冷室作用同上，更彻底，只是运行费用更大。（36）冷冻干燥机（器） 蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。