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1、实验动物病理标本的标准化取材和量化诊断方法实验动物病理标本的标准化取材和量化诊断方法近年来，由于实验动物病理检验工作质量控制观念的引进，要求将病理标本从取材到读片的全过程进行标准化操作。目前国内实验病理学界对此尚无统一标准。参考国内外实验病理学界和其他生物学实验的标准操作规程制定，从而对实验动物病理标本的取材和读片的标准化操作提出以下方法。 1. 动物的处死、组织的固定和取材动物的处死、组织的固定和取材 (1)小动物每试验组 6-10 只进行病理检验。大动物病理检验数依要求而定。动物处死前禁食 12 h。均用麻醉放血法处死。 (2)按实验要求的顺序打开胸、腹腔，摘取脏器并准确称重。计算脏器系数
2、。摘取时不可损伤所取脏器。心脏不挤压心腔内血块，肝脏分叶固定，肾脏去除包膜。除特殊要求外，均固定于 10中性甲醛溶液中。固定液体积应 1 倍于所固定脏器，组织须定时翻动。脏器固定24 h 后即可取材，再固定 48 h 即可进行脱水、包埋。 (3)各受检脏器均先取肉眼可见病变处。小动物按整个脏器的冠状或矢状切面与表面垂直整片取材。大动物根据要求局部取材，面积均为 1.2cm1.0 cm。厚度均为 0.3 cm。 (4)脏器具体取材部位如下： 心：小动物在主动脉根部行矢状切，取材剖面包括心房、心耳、室间隔、左、右心室壁和主动脉根部。大动物在上述部位各取一块。取材时与心肌纤维长轴平行。 肝：小动物在
3、肝脏上缘 1/3 处与肝表面垂直作矢状切，应包括肝门血管及胆囊。每只动物至少取三叶肝。 脾：小动物在脾长轴 1/2 处与脾表面垂直作冠状切，大动物在脾门处取材。 肺：每只动物最少取三叶肺，左、右肺均在肺门处冠状切取材。包括肺门血管、气管和淋巴组织。 肾：在左、右肾门处包括肾盂冠状切取材。 脑：小动物沿右侧大脑中缝处矢状切，包括小脑及延髓整片取材。大动物在视交叉、垂体窝和大、小脑交界处冠状切取材，包括脑皮、髓质。 胃：大、小动物均于胃底长轴矢状切取材，长 1.2 cm，宽0.3 cm，包括消化道全层。小动物包括前胃和腺胃。大动物包括贲门、幽门、大弯和小弯。 睾丸：取两侧，在长轴 1/2 处冠状切
4、取材。 乳腺：包括乳头矢状切取材。 子宫、阴道、十二指肠、空肠、回肠、结肠和直肠在其长轴的1/2 处冠状切取材。胰、肠系膜等薄片状脏器，小动物固定后卷成卷，截面最大处取材。附睾、前列腺、精囊腺、尿道球腺、肾上腺、胸腺、垂体、松果体、甲状腺、卵巢、眼球等脏器，小动物在截面最大处冠状切，取整片或整体包埋。大动物取所需部位。 2 切片病变的定量观察 (1)常规 HE 染色，切片厚度应4m。 (2)光镜下首先区分有否特异性病变及范围，然后由脏器一端向另一端进行整体观察和描述。 (3)观察小动物脏器有否肿大、增生，用 l0 倍镜由一端开始计数该脏器包含的 l0 倍镜镜头视野数，或计数整个切片中功能单位数
5、。如脾生发中心、胸腺小叶、肝小叶、肾小球及整个切片中病变灶数量。 (4)大动物脏器疑有肿大、增生时，用 40 倍镜头计数每一视野中的细胞或功能单位数。心肌、骨骼肌在与长轴平行的切面上计数每一视野直径中的肌纤维数，肝小叶中肝细胞索数(数 40 倍镜视野的一半)。根据需要计数 l0-20 个 40 倍镜视野。 (5)确定病灶大小及积分用 40 倍镜头进行观察。先将镜头的圆周与观察的病灶边缘相切，再观察该病灶在这一视野中的比例。40 倍镜头视野 1/3 的为小灶病变，积 1 分。1/32/3 的为小片病灶积 2分。2/3 的为大片病灶积 3 分。计数所有病灶的积分。 (6)实验动物肿瘤发生率的计算：动物肿瘤的组织分化常不明显，在长期毒性试验或诱癌实验中出现的肿瘤不论良、恶性均计入肿瘤发生数，并计算肿瘤发生率。 来源：中国比较医学杂志
