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1、遮烤 卫E R E D I T A S ( B e i ji n g ) 7 ( 2 ) : 3 5 -3 6 1 9 8 5介绍柞蚕染色体制片的 三种方法杨 菊 倩（ 辽宁大学生物系， 沈阳）一、柞蚕脑细胞染色体压片法柞蚕脑较其它神经节大，在幼虫各龄期均 可取材， 方法简便效果好， 其步骤如下： （ 一）前处理将 0 . 1 毫升0 .2 关的秋水 仙素溶液注人幼虫体内，在室温下处理 2 4 小时。 （ 二）取材与解剖用解剖针把幼虫的 头部和尾部固定在解剖蜡盘中。然后用解剖剪 将幼虫从腹面前胸部向头方小心剪开，使露出白色球状物即脑的部分。再用尖咀镊子将脑取 出。（ 三）低渗处理把取 出的 脑
2、 立 即投人 0 .4 肠 K C 1 溶液中处理3 0 -4 0 分钟， 此过程可 使细胞膨大， 有利于染色体分散。 （ 四）固定对经过上述处理后的脑， 用 3 : 1 甲醇冰醋酸固定液进行固定， 时间为2 -2 4 小时。 （ 五）制片首先滴一滴4 5 %的醋酸于 载片上， 然后再将脑置于其中进行压片， 冰冻揭 片， 晾干。 （ 六 ）染色镜检用5 : 1 或1 0 ： 1 的G ie -m s a染液进行染色，3 0 分钟后， 用蒸馏水冲洗 后镜检， 若颜色合适即可终止。对于染色适中、 分裂相好的片子经二甲苯处理3 -5 分钟后进 行封片。采用此法制片， 取材方便， 操作简单， 分裂 相
3、多（ 图1 ) 0二、柞蚕精巢染色体涂片法（ 一）取材和解剖直接取化蛹前的老 熟幼虫， 取其精巢， 即用解剖针将幼虫固定在解 剖蜡盘里， 腹面朝上， 用解剖剪剪开腹面， 边剪 边用解剖针将腹面体壁拉平固定， 去掉丝腺、 马 氏管、 消化管等， 然后仔细观察，在背面第8体 节处即可看到两粒白色透明呈肾脏形的精巢。 （ 二）低渗处理用镊子取出精巢， 并去 掉其外面的脂肪体、 气管等物， 用0 .4 务的 K C l 溶液进行低渗处理 3 0 -4 0 分钟。 此时可将精图 2 柞蚕精巢涂片 （ ，二 4 9 )图 1 柞蚕脑细胞压片 （ 2 n9 8 )Y a n g u g r a n : I
4、n t r o d u c t i o n t o T h r e e Me t h o d s f o r C h r o mo s o me P r e p a r a t i o n i n A n t h e r a e a p e r n y i 3 5” 巢夹破， 使内含物溢出于低渗溶液中（ 用指管） 。 （ 三）离心固定将材料经过 2 , 0 0 0 转 分钟的离心机离心 1 0 分钟， 去上清液， 换人3 : 1 的甲醇冰醋酸固定液2 -3 毫升， 用滴管把沉淀 物即细胞块均匀打碎后，将固定液增至5 毫升， 然后再离心一次， 去上清液， 再滴人固定 液1 毫升， 使材料分散均匀
5、。 （ 四）冰冻滴片， 晾干。 （ 五）染色镜检步骤同脑细胞压片（ 图 2 ) 0 采用上述方法，染色体分散均匀，片子千净。三、柞蚕精巢染色体压片法（ 一）取材与解剖同精巢涂片法。 （ 二）低渗处理将精巢进行低渗处理 3 0 分钟， 药液为0 .4 并的K C 1 溶液， 不要夹破精 巢。 （ 三）固定同第一种方法。 （ 四）制片先滴一滴4 5 外的醋酸于载 片上，再放人精巢。这时的精巢由于低渗处理 后胀得很大， 用镊子将其轻轻夹破， 取出少量内 含物即可。然后压片， 使其均匀分散。图3 柞蚕精巢压片 ( n 二钓）（ 五）冰冻揭片， 晾千。 （ 六）染色镜检方法同上述两种 （ 图3 ) 0
6、对柞蚕脑细胞或精细胞染色，作者曾采用 过其它几种方法，最后经比较认为：制片后再进行 G ie m s a染色效果较好， 染色体清晰。参 1 叶柄辉等：1 9 7 9 0考文献遗传，1 ( 4 ) : 2 9 -3 0 ,（ 上接第2 9 页） 计数 5 对大染色体对数来确定孤雌生殖火鸡胚胎早期 发育染色体的倍数。结果发现许多胚胎都为单倍、 2 倍 及异倍细胞的嵌合型。早期发育胚胎的单倍体细胞比 例很大， 说明孤雌生殖胚是由单倍体卵子发育而成的。 发育至第 6 天的胚大多数细胞为 2 倍体， 孵出的雏为2 倍休。他们认为2 倍体的产生一定是在单倍体卵子第 一次卵裂后由于核融合所致。 火鸡一 鸡杂
7、种染色体的 研究表明，火鸡带Z 和W的两种卵子都能与鸡的精子 受精。 N . S . F e c h h e i m e r ( O h io州立大学） 在“ 鸡胚异倍体的起源” 一文中综述和讨论了 1 0 个试验结果。在他所测的 9 , 0 0 0 只胚胎中， 畸变的总频率为5 . 2 % a ， 其中 大多数为单倍体（ I n ) 或单倍 整倍嵌合体，多倍体 大 多为3 倍体 （ 3 n ) , 4 。 和 5 ， 极少1 次之，2 n / 4 n , 2 n / 3 n , 2n/2n11, 2 n 1 / 2 ， 一 1等嵌合胚的频串相对 较低。他在文中着重讨论了各种异倍体的起源。 最后一篇文章题目为 “ 用于鸡的基因定位的标记 染色体及G 带技术， 。R . N . S h o f f n e r ( M i n n e s o t a 大学） 提供了定位青壳蛋基因的标记染色体的重组及 G带分 化染色方法。这一基因参与蛋壳外琳色素的形成。 若要了解论文集详情， 请查阅 1 9 8 1 , P o u l s r y S c i e - 。 ， 6 0 ( 7 ) : 1 3 5 3 -1 3 7 5 , （ 四川农学院家禽育种专业，熊淑众）36
