《Monacolin K高产菌株选育及其发酵条件优化研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Monacolin K高产菌株选育及其发酵条件优化研究（61页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、沈刚农业人学硕l ：学位论文摘要随着人们生活水平的不断提高，冠心病和动脉硬化等心脑疾病对人类健康的危害n 益加剧。医学研究表明，高胆固醇血症可能是冠心病和动脉硬化的重要原因之一。在人体内，胆回醇是在肝脏晕合成的，又在肝脏罩被转化成胆酸，如果能够抑制H f 脏内源性胆圃醇的生物合成，就一定会降低血液内胆固醇的浓度，从而治疗高胆固醇血症，防止或缓解动脉硬化和冠心病的发生。1 9 7 9 年日本学者远藤章从红曲霉( 如一c ，“6 日，)的培养液中获得一种次级代谢产物，这是一种新的艟固醇合成摔割剂一M D n a c o l ；nK 。目前M o n a c o l i n K 是各国公认的降低胆固
2、醇的理想药剂，具有高效、低毒、安全的特点。但是，M o n a c o l i nK 在红曲霉的发酵液中产率廿常低，目前国内外的研究重点都集中于提高M 锄a c o l i n K 的产率，降低生产成本。本项研究的主要胃的是通过诱变育种筛选出M o n a c o l i nK 高产菌株，并对其发酵条件和培养基配方进行优化，以提高M o 肌c o l i nK的产率，降低生产成本。活化保藏菌种，选择诱变出发菌株，测其M 。n a c o ! 纽K 的产率为2 8 6 i l l g L 。然后利用紫外线诱变的方法对其孢子进行诱变处理，通过初筛、复筛，得到5 株产率较高的突变株。分别对这5 株高
3、产菌株进行遗传稳定性试验，确定菌株T 2 为高产突变株。其M o n a c o l i nK 产率为5 4 0 m g L ，是出发菌株的1 8 9 倍。通过对菌株T 2 的生物学特性进行研究，确定摇瓶培养的发酵周期为1 2 d ，其耐乙醇度小于1 5 。对高产菌株n 发酵培养基配方进行单因素试验，按单因素试验结果选择甘油、混合氮源、M g s 0 4 7 H 2 0 、K H 2 P 0 4 四个因素进行正交试验，确定这四个因素对M o n a c o I i nK 产率影响的显著性，并确定菌株T 2 的最佳发酵培养基配方为：甘油5 O 、混合氮源( 牛肉膏2 。2 9 + N E L N
4、 O 。O 。8 9 ) 、K H 2 P 0 4 0 1 0 、M g S O 7 H 2 0O 1 0 、K C l O 0 6 、F e S 0 4 7 OO 0 0 1 。对高产菌株T 2 的发酵条件进行单因素试验，按单因素试验结果选择初始口H 、培养温度、接种量、装液量四个因素进行正交试验，确定这四个因素对M o n a c o l i nK 产率影响的显著性，并确定T 2 的最佳培养条件为2 5 0 m L 三角瓶装液量6 5 m L 、接种量5 ( v v ) 、培养基初始p H 为6 O 、培养温度为3 l 。关键字：红曲霉；M o n a c o l i nK ：诱变育种：发
5、酵和培养条件；优化摘要A b s t ra c tA l o n gw i t ht h ep e o p l el i V i n gs t a n d a r du n c e a s i n ge n h a n c i n g ，c o r o r l a r yh e a r td i s e a s ea 1 1 da r t e r i o s c l e r o s i sh 黝t h eh u m a nh e a l t hd a yb yd a y T h em e d i c a lr e s e a r c hi n d i c a t e dt h a t ，h y
6、 p e r c h 。j e s t e r o i e m i ai sp o s s j b l yo n eo ft 1 1 ei m p o r L a n tT e a s o n so fc o r o n 甜yh e a nd i s e a s ea n d州e r i o s c l e r o s i s I nt h eh u m a nb o dy ，t h ec h o I e s t e m l i ss y n t h e s i z e dmt h el i v e ra J l dt r a n s f b H n e di n t ot h ec h o
7、l i ca c i di nt h el i v e L t o o I f t h eb i o s ”t h e s i so f t h el i v e re n d o g e n e s i sc h o l e s t e f 0 1c a nb es u p p r e s s e d t h ec h o l e s t e r 0 1d e n s i t yi nt h eb l o o dc a nb er e d u c e dc e r t a i n ly ，m u sa c h j e v e dt r e a t i n gh y p e r c h o l
8、 e s t e r o l e m i a ，p r e v e n t e do ra l l e v i a t c dt h ea r t e r i o s c l e r o s i sa n dc o r o n a r yd i s e a s ef o mo c c u r i n g 1 n1 9 7 9J a p a r l e s es c h o l a rE n d oo b t a j n e do n ek h l do fs e c o l l d a r ym e t a b o l i t ej 九t h en u t r i e n tf 】u i d
9、，t 1 1 i si so n eh n do fn e wc h 0 1 e s t e r o ls y n t h e s i si n h b i t o r M o n a c 0 1 i nK A tp r e s e n tM o n a c 0 1 i nKh a so b l a i n e dt h er e c o g n i t i o no fm a I l yc o u n t r i e sa n di st h o u g h tt ob em ei d e a lm e d i c a m e n to nr e d u c i n gt I l ec h
10、0 1 e s t e r o l ，h a sI l ec h a r a c t e r i s t i c so fK 卧e 伍c i e n c y ，t h el o wp o i s o na n ds a f e B u t ，t h ep r o d u c t i o nf a t eo f M o n a c o l i nKi se x l r e m e I yl o wi nt h e 朋b 打c 姗f c H n e n t a t i o nn u i d A tp r e s e n tt h ee m p h 韶i so fm ed o m e s t i c
11、a n df o r e i g nr e s e a r c hi sa l lc o n c e n t r a t e di ne n h a n c i n gt h ep m d u c t i o nr a t eo fM o n 8 c o I i nK ，r c d u c e i n gt h ep r D d u c t i o nc o s l 1 1 1 em a i ng o a lo f 仳sr e s e a r c hi st os c r e e nt h cM o n a c o l j nKh i 曲p r o d u c t i o ns t r 血b
12、ym u t a t i o nb r e e d i n 昌姐dc a r r yo n 血eo p t i m i z a t i o nt oi t sf e n n e n t a t i o nc o n d i t i o na n dt I l ec u l n 弓m e d i 岫f b 咖u l a ，t oe n h a n c et h ep r o d u c t i o nr a t eo fM o n o l i nKa I l dr c d u c et 1 1 ep m d u c t i o nc o s t A c t i v a t e dt h ep r
13、 e s e r v e ds t r a l i l la n dc h o s e dt h cb e 百n n i n gs t m i n I t sM o m c o l i nKp r o d u c t i o nr a t ei s2 8 6 m g ，L T h e nc a r r i e do ni n d u c e i n gm u t a t i o no fc h r o m o s o m a lc h a n g ep r D c e s s i n gb yu s i n gt h eu l l r a v i o l e tr a y ，d e t e n
14、 n i I l e d5h i 曲p m d u c t i o ns t m i nb yi I l j t i a l l ys i e v e sa l l dd u p l i c a t es i e v e s c a r r i e do nm eh e r e d i t ys t a b i l i t yt e s ts 印a r a t e l yt ot l l e s e5h 蟾hp r o d u c t i o nS t r a i n ，d e f i n i t e ds t r a i l lT 2i st h em o s ts u i t a b l
15、es 试n n sM o n a c 0 1 i nKp r o d u c t i o nr a t ei s5 4 0 m g ，L ，i s1 8 9t i m e so f t h ei n i t 瑚s t m i n C a r r i e do nt h eb i o l o g yc h a r a c t e r i s t i cr e s e a r c ht ot h es t r a i nT 2 ，r e s u l t c dt oc h o o s e1 2d a y s岫b et l l e 托H r l e n t a “o nc y c l ei nt h
16、 es h m c u l t u r e I tb e a r se m y la l c o h o lt 0b es m a l l e rc h a n1 5 C a r r i e do nt h es i n g l ef a c t o re x p e r i m e n tt ot h ef e 珊e n t a t i o nm e d i u mf o H n u l ao fm eh i 曲沈刚农业人学硕上学位沦文p r o d u c t i o ns t r a i n1 1 2 ，a c c o r d i n gt ot h es i 九g I ef h c t o r 【e s tI e s u l tc h o i c e dg l y c e “n e ，t h em i xn i t r o g e ns o u r c e ，M g S 0 4 7 H 2 0 ，K H 2 P 0 41 o u rf a c t o
