《甜瓜性别相关基因遗传转化研究》由会员分享,可在线阅读,更多相关《甜瓜性别相关基因遗传转化研究(110页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、C o d e :1 蚴N O 1 0 0 1 2 4D i s s e r t a t i o nf o rt h eD o c t o r a lD e g r e eS t u d yo nG e n e t i cT r a n s f o r ma t i o no f G e n d e rI 沁l a t e dG e n e si nM e l o nC a n d i d a t e :Z h a n gH u i j u nS u p e r v i s o r :P r o f L u a nF e i s h iD e g r e eC a t e g o r y :D
2、 o c t o ro f A g r i c u l t u r eC o l l e g e :N o r t h e a s tA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t yF i r s tl e v e ld i s c i p l i n e :H o r t i c u l t u r eS e c o n dl e v e ld i s c i p I l i n e :O l e r i c u l t u r eH a r b i nC h i n aJ u n e2 0 1 3中文摘要。I英文摘要1 前言l1 1 甜瓜再生体系的研究进
3、展。11 2 甜瓜离体再生的主要影响因素11 2 1 基因型的限制。l1 2 2 培养基11 2 3 外植1 本21 2 4 植物激素21 2 5 培养条件21 3 甜瓜离体再生过程中的生理生化变化31 4 甜瓜遗传转化方法研究进展。41 4 1 农杆菌介导组培法在遗传转化中的应用41 4 2 花粉管通道法在遗传转化中的应用61 4 3 茎尖法在植物遗传转化中的应用61 5 植物的性别研究进展81 5 1 性别分化的生理生化研究进展91 5 2 性别决定相关基因研究进展91 6 基因工程技术在甜瓜上的应用1 51 7 研究的目的意义1 51 8 研究的内容和技术路线1 61 8 1 研究的内容
4、1 6l 。8 2 研究的技术路线。1 62 材料与方法。182 1 甜瓜自交系再生体系的建立1 82 1 1 试验材料1 82 1 2 试验方法1 82 2 甜瓜再生过程中生理生化及内源激素的动态变化1 92 2 1 试验材料1 92 2 2 试验方法l92 3 甜瓜组培遗传转化体系的建立2 l2 3 1 试验材料2 l2 3 2 试验方法2 22 4 花粉管通道法的建立2 7i东北农业大学农学博士学位论文2 4 1 试验材料2 72 4 2 试验方法2 72 5 茎尖法转化体系的建立2 82 5 1 试验材料2 82 5 2 试验方法2 92 6 甜瓜性别相关基因的克隆及功能验证3 02
5、6 1 试验材料3 02 6 2 试验方法3 03 结果与分析3 53 1 甜瓜自交系高频再生体系的建立3 53 1 1 不同培养基对种子发芽率和出苗率的影响3 53 1 2 激素及其配比对甜瓜不定芽诱导的影响3 53 1 3 基因型对甜瓜子叶节再生能力的影响3 63 1 46 - B A 对不定芽伸长的影响3 63 1 5 再生植株的生根3 73 2 甜瓜再生过程中生理生化动态及内源激素的变化。3 93 2 1 甜瓜子叶节在不定芽发生过程中抗氧化酶活性的变化3 93 2 2 内源激素含量及比值的变化4 33 3 甜瓜子叶节遗传转化体系的建立4 63 3 1 质粒提取及酶切4 63 3 2 不
6、定芽卡那霉素临界浓度确定4 73 3 3 头孢霉素的抑菌效果的浓度筛选4 73 3 4 转化植株的P C R 检测4 83 3 5S o u t h e r nb l o t 检测。4 83 3 6 转基因甜瓜植株的花形态分析5 03 4 花粉管通道法转化体系的建立5 23 4 1 卡那霉素致死浓度的确定。5 23 4 2 用于分子检测的外源D N A 制备5 23 4 3 甜瓜花粉管通道法适宜转化时间的确定。5 33 4 4 花粉管通道法转化植株的子房生长状态及坐果率统计5 43 4 5 转化植株种子的抗性筛选5 53 4 6 转基因植株的分子检测5 53 4 7 转基因植株的花形态分析5
7、63 5 茎尖法转化体系的建立5 63 5 1 卡那霉素敏感试验。5 63 5 2 不同激素浓度产生芽数量比较5 8i i目录3 5 3 不同基因型分化率比较5 83 5 4 甜瓜转基因苗的获得5 83 5 5 转基因甜瓜植株的分子检测。6 03 5 6 转基因甜瓜植株S o u t h e r nb l o t 杂交6 13 5 7 转基因植株花的形态分析。6 l3 6 甜瓜性别相关基因的克隆及遗传转化6 33 6 1 全长序列的获得6 33 6 2 蛋白质二级结构预测6 43 6 3 不同性别植株中组织的表达特性分析6 53 6 4 植物表达载体构建6 63 6 5 受体材料的准备及转化6 73 6 6 转基因植株的分子检测和田间性状观察6 84 讨论7 34 1 甜瓜自交系再生体系的建立7 34 2 甜瓜再生过程中生理生化及内源激素的动态变化7 34 3 甜瓜遗传转化体系方法的优化7 54 3 1 甜瓜子叶节遗传转化的优化7 54 3 2 花粉管通道法遗传转化7 54 3 3 茎尖法转化体系的建立7 64 4 三种遗传转化方法的优缺点比较7 64 5 甜瓜性别相关基因的克隆及功能验证7 64 6 主要创新点