《拟南芥花药特异启动子启动的barnase基因在烟草中的表达》由会员分享，可在线阅读，更多相关《拟南芥花药特异启动子启动的barnase基因在烟草中的表达（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、农业生物技术学报!“#$%;基金项目： 国家高技术研究发展计划 （?A计划） 资助项目 （3446BB3633A6） 。马宏： 女，6C=D年生5博士研究生。联系作者。E“%0-.0$F7GHIH6 研究论文 拟南芥花药特异启动子启动的/;4;介导获得转基因植株。生物学观察表明， 转基因植株表现出了明显的雄性不育性状， 如花丝变短、 花药瘦小等， 说明B、BC两D!启动子片段都在烟草（T,-“.,;4;FP 10P.$#6*%:/$#%&;,$9#/*,%:8%*/:,;:-2DG=:#%+:D2DGH=“$ 2的=“b培养基上进行筛选培养，以转化空载体-Eab!的叶片外植体置于相同筛选培养基
2、中作对照。FU:+继代T次。抗性芽长至F:69时切下， 转入生根培养基。 最后将转基因烟草的组培苗移入营养钵中， 置于温室中培养。“$ 31./!杂交植物总V=G经纯化后， 分别用限制性内切酶Z76,E“酶切过夜，经TdFi琼脂糖凝胶电泳后毛细法转移尼龙膜上，按E,60公司VjK.A*50.D$*9.V=G.c#)1*%5.#%+.V/6/*,%.3/#$/$.b*/!的详细说明， 以 VjK标记的“#$%#E)8F9)69GH9AI9);E)%-)BAJ)%0)3K;L;89K斜体阴影部分为差异碱基， 其中%-启动子的差异为I,!8,0M)%0启动子的差异为!N!I!N。:F9)78BC7I
3、)BAJ)6FBJ;O)+B696)BK9)8F9)J7EE9K9AI9)EK;L)8F9)K93;K89J)69GH9AI9)L;89K)BAJ)!N!I!N)7A)%0)3K;L;89KH8F9KA检测U杂交片段约1)*+大小VM共获得了转3P5%-$的烟草1!株， 转3P5%0$的烟草1W株， 其转化率分别达!和-(U图,M)BV。为进一步证明目的基因已整合到烟草基因组中，利用叶片涂抹法对与RBKAB69紧密连锁的R$/#;#$#9?677%/2$B1%#916%/./#/0$917/;677%677%和GFF/5;的启动子片段，经形成+)*“#$%#7#%97#%9$?81:18/;$6*91%/%86II/5T/94/“$#?1#T9?B*&;81:18/+$#51I6;$/R./L7#%9/V%918/3$#%$B19$9?B/I?$1%2/B18$6&;6$/I76;B%9/?$6I/M,X/EP/O,!GFDM-D
