首乌益智灵对血管性痴呆模型大鼠脑组织sod活性_mda含量影响

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1、2 Schwarz ER, Pollick C,Dow J,et al1A small animal model of non2ische2mic cardiomyopathy and its evaluation by transthoracic echocardiographyJ 1Cardiovasc Res, 1998; 39: 21622313 PyeMP,BlackM, Cobbe S M1Comparison of in vivo and in vitro haemody2namic function in experimental heart failure: use of e

2、chocardiographyJ 1Cardiovasc Res, 1996; 31: 87328114 Jensen RA, Acton EM, Peters H1Doxorubicin cardiotoxicity in the rat:comparison of electrocardiogram, trans membrane potential, and structuraleffectJ 1J Cardiovasc Pharmacol, 1984; 6: 186220015 Wakasugi S, Fischman AJ,Babich JW,et al1Myocardial sub

3、strate utiliza2tion and left ventricular function in adriamycin cardiomyopathyJ 1J NuclMed, 1993; 34: 152923516 GulatiVK, KatzWE, FollansbeeWP,et al1Mitral annular desent velocityby tissue Doppler echocardiography as an index of global left ventricularfunctionJ 1Am J Cardiol, 1996; 77: 97928417 Fari

4、as CA, Rodriguez L, Garcia MJ,et al1Assessment of diastolic functionby tissue Doppler echocardiography: comparison with standard trans mitraland pulmonary venous flowJ 1J Am Soc Echocardiogr,1999; 12: 60921718 Teraoka K, HiranoM, Yamaguchi K,et al1Progressive cardiac dysfunctionin adriamycin2induced

5、 cardiomyopathy ratsJ 1Eur J Heart Failure,2000; 2: 3732819 Christiansen S, Stypmann JJ,JahnUR,et al1Partial left ventriculectomy inmodified adriamycin2induced cardiomyopathy in the dogJ 1J HeartLungTransplant, 2003; 22: 30128110 Szenczi O, Kemecsei P, Holthuijsen MF,et al1Poly(ADP2ribose) poly2mera

6、se regulates myocardial calcium handling in doxorubicin2inducedheart failureJ 1Biochem Phar macol, 2005; 69: 725232111 Mohamed HE, Asker ME, Ali SI,et al1Protection against doxorubicincardiomyopathy in rats: role of phosphodiesterase inhibitors type 4J 1JPharm Pharmacol, 2004; 56: 75726812007201217收

7、稿 2007205230修回 (编辑 牛铁兵)首乌益智灵对血管性痴呆模型大鼠脑组织S OD活性、MDA含量的影响李长生 王荣霞1李 军 杨晓妮 姚 雷 (山东省千佛山医院,山东 济南 250014) 摘 要 目的 观察首乌益智灵对血管性痴呆(VD)模型大鼠脑组织SOD活性、MDA含量的影响,并探讨其对血管性痴呆的干预机理。方法 用改良Pulsinelli四血管阻断(42VO)法制造血管性痴呆大鼠模型,设首乌益智灵组、 脑复康组、 模型组、 假手术组,分别测定干预后各组大鼠脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、 丙二醛(MDA)含量。结果 灌胃20 d后,首乌益智灵组大鼠脑组织中的SOD活性显

8、著提高、MDA含量显著降低,与模型组和脑复康组相比有显著差异(P 15个月) ,雌雄各半,体重300400 g。山东大学实验动物中心提供,实验动物质量合格证号: 010281。112 方法11211 药物与试剂 首乌益智灵(药物组成:制何首乌、 黄芪、丹参、 川芎、 益智仁、 天麻、 水蛭等) ,济南钢铁公司职工医院制剂室生产;脑复康片,济南东风制药有限公司生产(批号0307043) ; SOD试剂盒、MAD试剂盒,南京建成生物公司提供。11212 模型制备 用改良Pulsinelli四血管阻断(42VO)法制备血管性痴呆大鼠模型2, 3。大鼠于术前禁食12 h,不禁水。用014%戊巴比妥钠按

9、0116 g/kg腹腔麻醉后,将大鼠俯卧固定,行背侧颈正中切口,逐层钝性分离,暴露双侧第1颈椎横突翼小孔。用直径约015 mm的电凝针灼烧双侧翼小孔内的椎动脉,造成永久性闭塞,再将大鼠仰卧固定,行腹侧颈正中切口,钝性分离双侧颈总动脉,以“4” 号丝线穿线备用。24 h后,用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉5 min,间隔1 h后再夹闭5 min,共夹闭3次。局部伤口缝合前,以庆大霉素局部喷洒处理防止感染,术后3 d给予青霉素2 U /kg肌肉注射抗感染。假手术组步骤同上,不做缺血处理。11213 给药方法 随机将VD模型大鼠分为首乌益智灵组、脑复康组、 模型组,每组10只(每组雌鼠6只,雄鼠4只)。并

10、从假手术大鼠中随机选取10只作为假手术组(每组雌鼠6只,雄鼠4只)。术后7 d给大鼠用灌胃器灌胃,每天下午一次,共20 d。灌胃液体温度为20。首乌益智灵组10只大鼠用首乌益智灵溶液灌胃,每次5 ml(含药量0124 g) ;脑复康组10只用脑复康溶液灌胃,每次5 ml(含药量0106 g) ;模型组10只大鼠用生理盐水灌胃,每次5 ml;假手术组10只大鼠用生理盐水灌胃,每次5 ml。11214 水迷宫测试 分别在造模前、 造模后、 用药后进行三次水迷宫测试。迷宫学习训练:大鼠购进后在室温2024、 相对湿度45%55%的环境下饲养1 w,用Morris水迷宫法做定位航行试验对大鼠进行行为学

11、训练。水迷宫为一不锈钢圆形水池,直径100 cm,高50 cm,内置一平台,平台高40cm,底面为15 cm15 cm,水深41 cm,水温22。在水池壁标明4个入水点,由此将水池等分为四个象限,任选一象限正中放置平台,没于水下1 cm。每天下午做4次,将受试大鼠按顺时钟方向顺序面向池壁放入水中,记录2 min内找到平台的时间(逃避潜伏期)。共学习6 d。 造模后水迷宫测试:造模术后7 d,对大鼠进行水迷宫测试。定位航行试验:历时6 d,每天下午4次。将受试大鼠按顺时钟方向顺序面向池壁放入水中,记录2 min内找到平台的时间。前5 d学习,第6天测试,记录测试成绩。空间探索试验( spatia

12、l probe test) :第6天下午定位航行试验后撤除平台,将大鼠从任意一点放入水中,拍摄游泳过程1 min,分析循行路径,统计其在原平台所在象限内外循行路径之比,和在该象限内外停留的时间之比,统计跨越原平台位置的次数。 用药后迷宫测试:用药20 d后,对大鼠进行水迷宫测试。方法同造模后水迷宫测试。11215 脑组织SOD活性、MDA含量 测试学习记忆功能后,用乙醚浅麻醉,并将大鼠快速处死,取脑,将大脑自前2/3与后1/3相交处冠状面切开,保留后半部于缓冲固定液中。将取得的前半部脑组织切成约0161 g的组织块,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入10 ml的烧杯中。量取

13、体积总量是脑组织重量9倍的0186%生理盐水,先倒入烧杯中2/3,用眼科剪剪碎,倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3生理盐水冲洗残留组织,用匀浆器研磨。上述过程在冰水浴中进行。离心15 min(4, 4 500 r/ min) ,取上清液。分别采用硫代巴比妥酸法与黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性及MDA含量。测定方法按试剂盒说明。113 统计学方法 所得数据以xs表示。用统计软件SPSSforwindows1115进行统计学处理,组间数据比较用单因素方差分析(One2wayANOVA)。2 结 果211 定位航行试验结果 造模后假手术组大鼠的逃避潜伏期明显小于其他各造模组(P0105) ,表明血管性

14、痴呆模型成功;模型组、 首乌益智灵组、 脑复康组间大鼠的逃避潜伏期无统计学差异。用药后首乌益智灵组大鼠的逃避潜伏期明显小于脑复康组和模型组(P0105,P0101) (表1)。表1 各组逃避潜伏期( s,xs)组别n造模后用药后假手术组1041402110210501555)模型组10716321271)511001793)首乌益智灵组10715321691)21800142脑复康组10715821541)315801722) 3) 4)与假手术组相比: 1)P0105;与首乌益智灵组比较: 2)P0105, 3)P0101;与模型组比较4)P0105, 5)P0101,下表同212 空间探索

15、试验测试结果 用药后,首乌益智灵组大鼠在原平台所在象限内的循行路径和停留时间均长于模型组和脑复康组,在原平台象限外的循行路径和停留时间均短于模型组和脑复康组,首乌益智灵组大鼠的跨越原平台位置次数明显多于脑复康组和模型组(P0105,P0101) (表2、 表3)。表2 各组跨越原平台位置次数比较(xs)组别n跨越原平台次数假手术组10618011815)模型组1031101120首乌益智灵组10614011585)脑复康组10419011452) 4)213 各组大鼠用药后脑组织SOD活性、MDA含量测定结果 首乌益智灵组大鼠脑组织SOD活性显著提高,与模型组与脑4671中国老年学杂志2007

16、年9月第27卷表3 各组空间探索成绩(xs)组别n平台象限游泳距离(m )非平台象限游泳距离(m )平台象限游泳时间(s)非平台象限游泳时间(s)假手术组10216201505)115001615)3814861614)2115261604)模型组101133013521900184201246160391766160首乌益智灵组10210001415)119301434)3114551425)2815551425)脑复康组10115601502)4)215901543)4)2213051243)5)3717051243)5)复康组相比有显著性差异(P 0105,P 0101)。首乌益智灵组大鼠脑组织脂质过氧化物MDA显著降低,与模型组和脑复康组相比有明显差异(P 0105,P 0101) (表4)。表4 脑组

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