流式细胞仪分选在细胞治疗的应用

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1、流式细胞仪分选在细胞治疗的应用流式细胞仪分选在细胞治疗的应用高免疫活性、长期体内存活效应细胞的获取与高效富集是肿瘤 ATC 成功的关键。单克隆抗体的特 异性和多样性是利用不同抗体的合理组合分离不同类型的细胞成为可能。流式细胞分选技术能够对 细 胞进行分离以确保纯度、细胞活力。分选造血干细胞临床上白血病的成功治疗归功于对造血干细胞的深入研究和认识，尤其是成功鉴定造血干细胞的表型后，富集纯化造 血干细胞用于各种基础研究和临床应用。流式分选是目前富集纯化造血干细胞最重要的方法。目前认为人的造血干细胞 的 标志为 Lin-CD34+CD38-，人的 Lin 标记主要包括 CD3，CD19，CD20，C

2、D16，CD14，CD11b 和 CD15 等。人造血干细 胞 的分离纯化可以选择骨髓，胚胎和脐带血的单细胞悬液。分选侧群干细胞SP 细胞的研究增加了对干细胞增殖，纯化及发育调控机制的理解，同时还提供了一种从不同组织中分离纯化和利用多 能干细胞的新策略，为组织工程和细胞治疗提供了新的干细胞材料来源。Hoechst33342 是一种亲脂性 DNA 荧光染料，可以自由通过活细胞的细胞膜进入细胞内，与 DNA 结合，所以可以直接 标记活细胞的 DNA。干细胞能够通过 ABC 运输蛋白 Bcrp1/ABCG2 将细胞内的 Hoechst33342 泵出细胞外，而其他细胞没有 这种能力，所以用该染料标记

3、时，干细胞染色较低，在流式图上能够明显区分与其他细胞。分选肿瘤干细胞肿瘤干细胞的概念于 20 世纪 80 年代末被首次提出，肿瘤干细胞最早在白血病肿瘤细胞中发现，后来在实体肿瘤中 也 发现肿瘤干细胞。鉴定分选肿瘤干细胞主要有两种方法：1、肿瘤干细胞本质上是一种干细胞，可以用 Hoechst33342 染 色肿 瘤细胞后，流式分选侧群干细胞，分选得到的侧群干细胞可能就是富集的肿瘤干细胞。2、根据表型标记分选肿瘤干 细胞。 但鉴定出的每一种肿瘤干细胞的表型都不同，如乳腺癌的肿瘤干细胞为 CD44+CD24-/lo, 脑肿瘤和结肠癌的肿瘤干 细胞为 CD133+。文章：1. Nigericin se

4、lectively targets cancer stem cells innasopharyngeal carcinoma Cheng-Cheng Deng,el The International Journal of Biochemistry & Cell Biology 45 (2013) 1997 2006鼻咽癌（NPC）在中国南方，北非和阿拉斯加是非常普 遍的癌症。NPC 病人的预后在早期还是不错，但是在晚 期 很差。肿瘤干细胞（CSC）被认为与肿瘤的发生、再发 和转 移都有关系，较差的预后性可能由于治疗之后残留的 CSC。 本论文旨在研究靶向治疗鼻咽癌中 CSC, 我们使用 高含

5、量或 者低含量的 CSC 的 NPC 细胞系， 研究抗生素 Nigericin 对 CSC 的影响。 本文使用 MoFlo XDP 分选 SP 干 细胞，发现 Nigericin 可以选择性的以 CSC 作为靶向目标， 同时对于广泛 使用临床药物 cisplatin 治疗的 NPC 更为敏感 。而且 polycomb group 蛋白 Bmi-1 的下调也会导致 Nigericin 对 CSC 的抑 制效 应 。 通 过 NPC 细 胞 系 的 研 究 发 现 Nigericin 显著的降低肿瘤 的迁移和入侵的能力，这也与 CSC 相关。综合以上，我们认 为在鼻咽癌中 Nigericin 选择 性以 CSC 为靶向目标，可作为 临床诊断的肿瘤干细胞靶 向药物。