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1、重庆医科大学硕士学位论文雷公藤多甙对大鼠慢性非细菌性前列腺炎治疗作用的实验研究姓名：杨镒魟申请学位级别：硕士专业：外科学（泌尿外）指导教师：张唯力20070501重庆医科大学硕士研究生学位论文英文缩写英文全称英汉缩略语名词对照中文全称C N PC h r o m cn o n b a c t e r i a lp r o s t a t i t i s慢性非细菌性前列腺炎I C A M 1N F - d B玳O SS PD A BP B SE D T At r i p t e r g i u mw i l f o r d i ip o l y g l y c o s i d i 雷公藤多甙 U
2、 mE s t r a d i o l雌二醇天小时h a e m a t i n ea n de o s i ns t a i n i n g苏木精伊红染色i m m u n o h i s t o c h e m i s t r y免疫组化周t u m o rn e c r o s i sf a c t o r - R肿瘤坏死因子I n t c r c c l l u l a r a d h e s i o n m o l e c u l e I细胞间粘附分子一1N u c l e a rf a c t o r - r B核因子KBi n d u c i b l en i t r i co
3、x i d es y n t h a s e诱导型一氧化氮合酶s l x e p t a v i d i n - p e r o x i d a s ec o n j u g a t e d m e t h o dd i a m i n o b e n z i d i n e链霉菌抗生物素蛋白一过氧化 物酶结合法 二氨基联苯胺p h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n e磷酸盐缓冲液e t h y l e n e d i a m i n et e t r a a c e t i ca c i d乙二胺四乙酸P乙E，陋| 三Edh| i |mw刑重庆医科大
4、学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任学位论文作者签名j 燃I学位论文版权使用授权书本入完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期问论文工作的知识产权单位属重庆医科大学本人保证毕业高校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医
5、科大学学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，可以采用影印，缩印或其他手段保存论文论文作者签名：指导教师签名：日期：重庆医科大学硕士研究生学位论文雷公藤多甙对大鼠慢性非细菌性前列腺炎 治疗作用的实验研究摘要第一部分大鼠慢性非细菌性前列腺炎炎性因子的表达目的：利用大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型，探究T N F Q ，I C A M - I ，N F - KB ，i N O S 在慢性非细菌性前列腺炎中的表达情况，并探讨其在慢性非细菌性前列腺炎发病机制中的作用。方法：选取1 周岁S D 大鼠3 0 只，随
6、机分为正常对照组和建模组。正常对照组不做任何处理正常喂养。建模组经去势后每日用苯甲酸雌二醇0 2 5m g k g 皮下注射，连续注射三十天后取两组前列腺组织，测定前列腺内白细胞总数及卵磷脂小体密度，H E 染色、光镜下观察两组前列腺组织的病理学表现，免疫组化法检测T N F Q ，I C A M - I ，N F KB ，i N O S 在两组中的表达情况。结果：对照组前列腺组织无炎症反应，模型组表现为明显的炎症反应。正常组前列腺组织中T N F Q ，I C A M - I ，N F KB ，i N O S 均为阴性表达，建模组前列腺组织中T N F a ，I C A M - I ，N F
7、 KB ，i N O S 均为强阳性表达。光密度和面密度定量分析结果表明两组有显著性差异( P 0 0 5 ) ，而其前列腺湿重以及湿重体重比明显大于雷公藤治疗组( P 均 0 0 5 ) 。由此认为：广6 可能在慢性前列腺炎的发病中起重要作用，是慢性前列腺炎较有价值的指标。J o h n 掣埽】报告，非炎性慢性盆腔疼痛综合征中，血清和E P S 中I L 6水平在初期并不升高，1 个月后则显著升高，反映了炎症的基本过程。I L - 8 亦称中性粒细胞激活蛋白l f N A V 1 ) 、趋化因子，为趋化因子家族中第一个被报道的成员，它是中性粒细胞的趋化因子，并能激活中性粒细胞的其他功能，如粘
8、附和杀菌，对活化的T 淋巴细胞亦有趋化活性。正常情况下I L 8 是相对分子质量为1 40 0 0 的同源二聚体，在炎症刺激后由巨噬细胞、内皮细胞和其他细胞大量产生。它和E N A - 7 8 同属于低炎症细胞趋化因子也8 超家族的a 亚家族，又称C X C 亚家族他们最主要的特点是帮助募集中性粒细胞和单核细胞进入炎症部位和调节白细胞粘附分子的表达，对于上述细胞离开血液循环并渗透入组织是必需的f l9 】。因而，趋化性细胞因子产生和释放的增多对于募集白细胞以应对损伤或感染是一种重要机制。前列腺炎组织局部的中性粒细胞增多进一步引起组织炎症和损伤。H o c h r e i 埘删等研究认为儿8 和
9、E N A 7 8 在E P S 白细胞1 0 H P 的病人中的水平要比在E P S 白细胞1 0 H P 的病人中的水平要高得多。这两种细胞因子均与E P S 白细胞计数相关，但未提及其对诊断的价值。I 型、I I I A 型、型前列腺炎患者组的I L - 8 水平明显高于对照组、B P H 组和I I I B 型前列腺炎组。I 型、I I I A型、型前列腺炎患者组的E N A 7 8 高于对照组、B P H 组和I I I B 型前列腺炎组，但并没有明显的统计学意义。这主要是因为患者体内E N A 7 8 的高变异性。P a u l i s等1 2 I J 在对2 0 7 例慢性前列腺
10、炎患者前列腺分泌物及精浆中细胞因子水平的研究中5 5重庆医科大学硕士研究生学位论文发现，I L 6 、I L 8 在C B P 及I l i A 型前列腺炎患者中水平升高，而在I I I B 型前列腺炎患者及健康对照组中不升高并认为I L 6 、I L 8 是诊断和评价C B P 治疗效果的较佳指标。李宏军等【2 2 1 也得出了相同的结论。同时，叶海云等1 2 3 还证实：E P SI L 8水平与E P S 白细胞计数呈正相关，这与几8 趋化性能相符。I L 1 0 是由T 细胞特别是T h 2 细胞产生的细胞因子，单个核吞噬细胞、活化的B 细胞及其他细胞也能产生，是人类免疫应答中已发现的
11、最重要的抗炎症因子，它是一种多效应的细胞因子，作用于不同细胞上可以出现免疫抑制、免疫刺激和抗炎效应。它抑制巨噬细胞分泌T N F 、I L 1 、I L 6 和趋化因子，抑制巨噬细胞对T细胞的辅助作用。在C P P S 患者的精浆中几1 0 的水平明显升高，并且与m 8 的水平呈负相关。随着I L - 1 0 水平的升高，病人的疼痛程度加重，对家庭生活、性功能及社会活动力的影响加型1 6 1 。李宏军等田】用双抗夹心E L I S A 法定量分析了2 9 例慢性前列腺炎患者按摩前列腺后获取的前段尿液内的m 1 0 水平。研究显示：具有临床症状的C P P S 患者E P S 中皿1 0 水平明
12、显高于无症状的前列腺炎和无前列腺炎的健康男性，表明I L - 1 0 可能直接参与了C P P S 患者的临床症状，认为I L - 1 0 水平的增高与C P P S 患者疼痛症状和生活质量呈正相关。进一步的研究证实，慢性前列腺炎患者存在某些细胞因子基因的多态性，并可能参与了前列腺炎的发病机制，如见I L - 1 0 的基因多态性。S h o s k e s 等阱l 对3 6 例C A P C P P S 和2 5 2 例对照组精液中细胞因子的基因多态性研究中发现，慢性前列腺炎患者中1 0 的基因多态性可能参与了慢性前列腺炎的发病机制，间接提示自身免疫是C A P C P P S 发病的机制之
13、一，也可解释一部分C A P C P P S 无炎症的原因。段志国等【2 5 】用双抗夹心E L I S A法检测了3 1 例慢性前列腺炎患者E P S 中几8 、I L 1 0 水平，研究发现：E P S 中，8含量显著上升( P o 0 5 ) ，l L 1 0 含量显著降低( P 0 0 5 ) ，即E P S 中I L - 8 和I L - 1 0 水平呈负相关，提示此时前列腺局部免疫反应以组织细胞损伤为主导，皿8 可能在慢性前列腺炎早期发挥作用，而儿1 0 则在慢性前列腺炎中、后期增加。尽管目前在慢性前列腺炎疾病中前列腺免疫学变化的原因仍不是十分明了，但是在此疾病的发病机理中，免疫系
14、统仍然起着一种非常重要的作用，而这种作用是以细胞因子为中介的，细胞因子及相关因子在其发生发展中所起的作用成为研究的热点，由于细胞因子都具有多种生物活性，因此不能精确定义它们在前列腺炎中所起的作用，以细胞因子水平作为判定C A P C P P S 活动性指标，对拟订适重庆医科大学硕士研究生学位论文宣的治疗方案具有参考意义，并可防止滥用抗生素。综合研究C A P C P P S 的病因和发病机制有助于更深刻地理解C A P C P P S 。对此系统的研究将会进一步了解C P C P P S 的病因，而且可能将开拓前列腺炎治疗学的新领域。参考文献【1 】R o b e r t sR O ，L i
15、e b e rMM ，B o s t w i c kD G ，e ta 1 Ar e v i e wo fc l i n i cp a n l o l o g j c a lp r o s t a t i t i ss y n d r o m e 阴U r o l o g y ，1 9 9 7 ，4 9 ( 6 ) ：8 0 9 - 8 1 3【2 】J o h nH ，B a r g h o mA ，F m l k eG ，c ta 1 N o n i n f l a m m a t o r yc h r o n i cp e l v i cp a i ns y n d r o m e ：自
16、m m u n o l o g i c a ls t u d yi nb l o o d ，e j u c u l a t ea n dp r o s t a t et i s s u e 们E u rU r o l ，2 0 0 1 ，3 9 ( 1 ) ：7 2 7 5【3 】M i l l e rL J ，F i s c h e rK A ，G o r a i n i c kS J ，c ta 1 N e r v eg r o w t hf a c t o ra n dc h r o n i cp r o s t a f i t i s c h r o n i cp e l v i cp a i ns y n d r o m e J U r o l o g y , 2 0 0 2 ，5 9 ( 4 ) ：6 0 3 - 6 0 6 4 1N a d l e r R B ，K o c h A E ，
