科华核酸血筛系统介绍

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1、科华核酸血筛系统介绍科华核酸血筛系统介绍采供血部副经理曹玉峰上 海 科 华 生 物 工 程 股 份 有 限 公 司上海科华生物工程股份有限公司简介创立于1981年，拥有近30年诊断产品生产经验国内规模最大的体外诊断试剂生产厂家。2004年在深交所上市，证劵代码002022。产业涉及诊断试剂、临床检验仪器、真空采血系统、医用信息软件等主要用户：血站、临床医院、血制品厂、疾病控制中心等，为阻断疾病传播作出了重要贡献。为中国采供血系统客户选用诊断试剂的第一品牌，最了解和熟悉中国采供血系统客户的情况和需求科华核酸血筛系统的建立2003年立项总投资7000万元2005年上海市科技兴市项目支持1500万元

2、列入国家“十一五”重大科技专项项目2005年开始临床应用北京301医院输血科、深圳市血液中心、青岛市中心血站、华 兰生物工程股份有限公司2007年试剂临床考核二家血制品公司、三家中心血站、国家CDC、中国军科院、卫 生部临检中心、中国生检所科华核酸血筛系统组成KHB全自动核酸工作站全自动核酸工作站 （HAMILTON-磁模块组合磁模块组合） 自动化完成样品汇集、磁珠法核 酸提取和PCR反应液准备全过程ABI 7500实时荧光定量实时荧光定量 PCR全自动分析系统全自动分析系统 同步完成核酸扩增和检测乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病人类免疫缺陷病 毒毒1型核酸检

3、测试剂盒型核酸检测试剂盒+信息管理服务器信息管理服务器 样品信息、系统运行过程和 检测结果管理 样本检测结果管理和传输科华核酸血筛检测方案ELISA 阴性样本混集 POOLING核酸提取扩增检测拆分确认核酸血筛检测试剂盒方法学核酸提取磁珠法全自动核酸提取扩增检测实时荧光PCR汇集检测血站8份汇集质控设计阴性对照、阳性对照即起到质控作用，又减少工作量，降低成本，增加了检测通量内对照质控参与核酸提取、扩增检测，对核酸检测全过程进 行质量控制，有效避免假阴性检测结果灵敏度HBV DNA 5 IU/mlHCV RNA 50 IU/mlHIV RNA 50 IU/ml科华核酸血筛全自动工作平台科华全自动

4、核酸工作平台全自动工作平台汇集汇集8 8份待测样品份待测样品汇集样品汇集样品全自动工作平台汇集8样本混合检测方案汇集后样本总体积180l8=1.44ml单批可完成752份标本的汇集、提取、扩增检 测全部过程全自动工作站提取、扩增反应液制备纯净模板洗脱洗脱洗涤洗涤吸附裂解裂解第一步：细胞的裂解：破碎细胞， 并向溶液中加入磁珠第二步：结合核酸：pH较低，在高 盐环境下，硅胶磁珠带正电荷，选 择性的与优化试剂中的核酸结合第三步：洗涤：用洗涤液将非核 酸成分冲洗分离（为清洗干净该 步骤可以重复多次）第四步：核酸的洗脱：pH升高， 在低盐环境下，核酸被洗脱下来磁珠法核酸提取原理核酸血筛全自动工作平台实验

5、操作自动化样本汇集、核酸提取、核酸扩增检测样本汇集过程、样本核酸提取过程（从待处理的汇集或单份标本到纯化出核酸模板）实现全程无间断自动化工作流程独立的核酸扩增完全符合卫生部临检中心的对实验室分区的要求维护保养简单核酸血筛扩增检测系统病毒核酸扩增检测系统ABI 7500荧光PCR仪实时荧光聚合酶链反应同步完成扩增和检测核酸血筛扩增检测系统实验数据直观，并且直接 显示项目结果可直观观察数据的扩增情况检测结果能直接显示项目结果（HBV、HCV、HIV中哪个为阳性结果）一步拆分信息管理服务器系统记录汇集标本及单检标本向上级lis系统提交实验结果指定阴阳性对照和质控下达核酸提取、拆分和PCR扩增指令记录

6、并判断PCR扩增结果储存所有运行记录和结果文件信k息系z统核酸血筛检测流程样本离心样本汇集核酸提取纯化结果检测与分析数据结果导出，即出具报告假阳性问题方法学：PCR是特异性非常高的检测方法 PCR引物决定了特异性靶基因序列的特异性、引物错配、非特异性扩增实时荧光（Real-time）：引物与探针同时控制污染问题由于PCR检测的高灵敏度，使得极其轻微污染也能被检出。 分析标本发生污染的来源可分为以下两类：样本污染产物污染污染来源样本污染标本采集、运输、保存过程发生标本间的污染。标本开盖过程发生标本间污染。针对污染可能的形式来指导防止污染发生的措施 ，制 定相应的SOP指导日常操作，将污染发生降低

7、到最低限 度。PCR扩增产物污染PCR扩增产物具有极高浓度，如果发生扩增产物泄 漏容易造成严重污染。使用UNG技术原理：UNG酶是一种限制性水解酶，会将dUTP降解。在 PCR体系中以dUTP代替dTTP，这样合成的产物就含 有U，而模板只含T不含U，如果出现产物污染， UNG酶会降解掉产物，而对模板无影响。假阴性预防试剂监控假阴性内标检测每孔内反应体系各项阳性对照监测本批试剂反应体系和对应引物及 探针 仪器因素仪器故障由阳性对照监控孔间因素使用内对照监控 标本因素使用合理的采血系统使用内对照监控单份标本内地抑制因素科华核酸血筛系统维护实验环境的保持系统设备维护核酸血筛全自动工作平台维护ABI

8、7500扩增仪维护实验环境的清洁按相应SOP要求清洁实验台面、地面及相应的辅助设备清洁核酸血筛全自动工作平台上样本载架等配件及时通风核酸血筛全自动工作平台维护日维护、周维护维护内容用70%乙醇清洁仪器表面（除塑料板面）用无纺布蘸70%乙醇清洁载板台面及载具检查载具状态检查吸液通道的紧密性检查cLLD功能是否正常清洁盖子和自动加载保护带核酸血筛全自动工作平台维护维护周期：半年，由工程师完成维护内容：检查吸液头终止盘和O型环，并清洁吸头终止盘、O形环及吸液通道外面部分仪器水平位置的检查X/Y/Z轴位置的校正检查AOTOLOAD服务器及配套电脑系统的检查及数据整理核酸血筛扩增检测系统维护维护周期：半年，由工程师完成维护内容仪器灯泡的检查仪器功能的验证ROI校正背景荧光校正纯荧光校正科华核酸血液筛查试剂盒科华全自动核酸工作平台感谢您的关注！感谢您的关注！