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1、萧县郝集中学萧县郝集中学 课题目标 说明植物组织培养的基本原理。 学习植物组织培养的基本技术,进行 菊花或其他植物的组织培养。 课题重点与难点 课题重点:植物组织培养过程中使用 的无菌技术。 课题难点:植物组织培养过程中使用 的无菌技术。萧县郝集中学 快速繁殖。 生产药物、食品添加剂、香料、色 素、和杀虫剂等。例如:紫杉醇,生 物碱、紫草素等。 转基因植物的培育。 培养无病毒植株。一、植物组织培养的意义:萧县郝集中学二、细胞的分化与全能性1.细胞分化:个体发育中,细胞在形态 、结构和生理功能上出现稳定性差异的 过程。 2.细胞全能性:具有某种生物全套遗传 信息的任何一个活细胞,都具有发育成 完
2、整个体的能力,即每个生物细胞都具 有全能性。 萧县郝集中学1、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来,将单个细 胞放在特定的培养基中培养,获得了许多完整的植株,这些 植株的特点是( ) .彼此性状极为相似.都是单倍体植株 .植株的变异频率较高.都是纯合体植株2、根据分裂潜能,干细胞可分为全能干细胞(可发育成 完整的个体)、多能干细胞(可发育成多种组织和器官)和 专能干细胞(发育成专门的组织和器官),则这些细胞在个 体发育中的分化顺序是( ) .全能专能多能 .全能多能专能 .多能全能专能 .专能全能多能练 习:萧县郝集中学三、植物组织培养的基本过程萧县郝集中学 什么叫脱(去)分化、再分化? 愈伤
3、组织的细胞有什么特点? 如何控制细胞的脱分化与去分化?思考题:萧县郝集中学四、影响植物组织培养的因素: 1、外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等萧县郝集中学3、不同植物激素使用顺序和使用量使用顺序 实验结 果 先生长素, 后细胞分裂 素 有利于分裂但 不分化 先细胞分裂 素, 后生长素 细胞既分裂 也分化 同时使用 分化频率提 高 生长素细 胞分裂素比
4、值结果 比值高时 促根分化, 抑芽形成 比值低时 促芽分化, 抑根形成 比值适中 促进愈伤 组织生长 萧县郝集中学3、不同植物激素使用顺序和使用量生长素细胞分裂素比 值结果 比值高时 促根分化, 抑芽形成 比值低时 促芽分化, 抑根形成 比值适中 促进愈伤组织 生长 萧县郝集中学4、消毒在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境原因:5、pH、温度、光照菊花: pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h萧县郝集中学制备MS固体 培养基外植体消毒 接种培 养栽 培四、实验操作移 栽冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌 水冲洗至少三次之上萧县郝集中学此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境 为液体
5、有机物营养环境,而不是能体现其整个植物 体的光能自养在培养过程中,是脱分化、再分化的过程,随着芽 和根的形成,就具有了自养的能力,是由细胞到一 个个体的演变过程1、高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组 织培养过程中还需要提供有机物培养基?2、培养过程中为什么需要进行光照思 考萧县郝集中学1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌 )2、外植体的消毒(酒精、氯化汞 )3、接种的无菌操作(酒精、酒精 灯灼烧)4、无菌箱中的培养;5、移栽到消过毒的环境中生存一 段时间。3、在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的?萧县郝集中学结果分析与评价(一)对接种操作中污染情况的分析 (二)是否完成了对植物组织的脱分化
6、和再 分化 (三)是否进行了统计、对照与记录 (四)生根苗的移栽是否合格萧县郝集中学课题延伸(略) 练习 1.答:植物组织培养所利用的植物材料体积 小、抗性差,对培养条件的要求较高。用 于植物组织培养的培养基同样适合于某些 微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生 长。而培养物一旦受到微生物的污染,就 会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的 无菌操作。 2.答:外植体的生理状态是成功进行组织培 养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理 状况好,容易诱导脱分化和再分化。萧县郝集中学方法:酶解 法 在温和条件 下,用纤维 素酶、果胶 酶分解物理法:离心、振动、 电刺激等 化学法:用聚乙二醇( PEG)等试剂
7、作为诱导 剂 包括膜融合和核融合形成多种杂种细胞 AA、AB、BB等植物组织培养的过程萧县郝集中学右图为植物体细胞杂交过程示意图。据 图回答:(1)步骤是 ,最 常用的方法是 。(2)步骤一般常用的化学试剂是 ,目的是 。 (3)在利用杂种细胞培育成为杂种植 株的过程中,运用的技术手段是 ,其中步骤相当于 ,步骤相当于 。 (4)植物体细胞杂交的目的是获得新 的杂种植株。使 能够在新的 植物体上有所表现,其根本原因是 。去掉细胞壁,分离原生质体 酶解法聚乙二醇(PEG)诱导植物原生质体融合植物组织培养脱分化再分化远缘杂交亲本 的遗传特征杂种植株获得双亲的遗传物质萧县郝集中学(5)若远源杂交亲本A和B都是二倍体,则 杂种植株为 倍体。(6)从理论上讲,杂种植株的育性 。 若运用传统有性杂交方法能否实现? 。 并说明现由 。 因此,这项研究对于培养作物新品种方面的重 大意义在于 。(7)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新 品种过程中,遗传物质的传递是否遵循孟德尔 的遗传规律?为什么? 。 四 可育不能 因为不同种生物之间存在生殖隔离克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围不遵循。因为在生物进行有性生殖的过程中,才遵循孟德尔的遗传规律,而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖