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1、全血细胞分析（五分类）大纲 血常规的发明人 历史与进展 血常规的用途 血常标本的采集 血常规标本的测定 血常规标本的结果评价 血常规与临床的结合 C反应蛋白什么是血常规？发明人谈到血细胞计数仪的发展史，不得不 提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城 的人W.H. Coulter，最初是一位广播电 台的电器工程师，后来做过X光机的 销售员和维修工程师，在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他 在芝加哥一家公司工作时，在一间地 下室建立了自己的实验室，他发现了 微小粒子通过特殊的小孔时可产生电 阻变化这一现象，并根据这种电阻变 化特点将其应用于微小粒子的粒度
2、测 量和计数上。科技界为表彰他的发明，将其称为库尔特原理（Coulter principle ），Coulter 先生将这个原理 引入到血液细胞计数上，在1953 年获 得美国发明专利，同年和他的兄弟约瑟夫（Joseph ）开创了自己的公司， 并成功的设计和制造出了可以计数血 细胞的专用仪器，然后开始了在这一 领域的商业运作。历史1947年美国科学家库尔特（ W.H.Coulter）发明了用电阻法计数粒 子的专利技术。1956年他又将这一技 术应用于血细胞计数获得成功，其原 理是根据血细胞非传导的性质，以电 解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小 孔时引起的电阻变化进行检测为基础 ，进行血细胞计数和
3、体积测定，这种方法称为电阻法或库尔特原理。1962 年，我国第一台血细胞计数仪在上海研制成功。到了60年代未血细胞分析 仪除可进行血细胞计数外，还可以同时测定HGB血红蛋白。70年代，血小 板计数仪问世。80年代，开发了白细 胞分类（3分类及5分类）。90年代， 开发出了可对网状红细胞进行计数的血细胞分析仪，同时5分类及幼稚细 胞检测更成熟，并发展成为血细胞分 析流水线。进展血常规的用途、意义 血常规检查在全身体检中是基本的体检项目 ，它的意义在于可以发现许多全身性疾病的早 期迹象，诊断是否贫血，是否有血液系统疾病 ，反应骨髓的造血功能等。 例如：通常感染性疾病会使白细胞的数值 和分类发生变化
4、；贫血时血红蛋白或红细胞的 检验值会降低；而血小板的减少会导致容易出 血或出血后不容易止住，而血小板增多会增多 血栓发生的可能；另外，有些肿瘤、变化反映 性疾病也可以引起血常规检查部分数值的变化 。标本采集的注意事项末梢血主要有耳垂取血和指尖取血两个部位，婴儿可在脚后跟 取血。耳垂取血痛感较轻，但取血量较少，特别是耳垂较小的 人比较难于取血。（现已淘汰）指尖取血痛感较明显，但采血 量较多，特别是对于血常规化验，可得到较为稳定的测定结果 。 采血前应将皮肤清洗干净。在冬季寒冷的室外进到室内后 不要立即取血，应使身体暖和以后，特别是应使采血的耳垂和 手暖和起来。在采指血前不要用热水烫手，保持手指干
5、燥，如 指尖有伤口、甲沟炎、红肿或皮肤病应避开使用此手指。指尖 采血一般用无名指，因无名指刺破后不会影响手的日常生活功 能，当然也可用中指或食指，无特殊区别。采耳垂血时应将耳 垂上的耳环等挂饰物取下，采血后不要立即挂上。 采血后应用消毒棉块或其他消毒止血物品压紧针刺破处， 不要触及脏物，不要立即浸水洗手。 末梢血采血分为预稀释和全血两种。标本的采集-静脉血标本的采集-末梢血预稀释全血采血前被检查者应处于平静状态，剧烈运动后应静息30分钟后采血。 抗凝剂：使用K2-EDTA，含量为1.5 2.2mg/ml。* 特殊标本用特殊抗凝剂 。 容器：采用密封式的塑料炮弹或经硅 化的玻璃容器 采血过程顺利
6、，然后将血液徐徐注入 抗凝管中，指弹混匀。 采血后放置5分钟待血液与抗凝剂混 匀，800i测试一次约20l，但操作中 可能存在复查，复片等情况，为了减 少患者重复采血故旺旺采血量要比实际测定所需要多，一般为60l，标本 在放置24小时内PLT、WBC、Hb、HCT 、RBC保持稳定。标本的测定库尔特原理库尔特原理(亦称：电阻法、电 脉冲法与电感应区技术)：悬浮在电 解液中的颗粒随电解液通过小孔管 时，取代相同体积的电解液，在恒 电流设计的电路中导致小孔管内外 两电极间电阻发生瞬时变化，产生 电位脉冲。脉冲信号的大小和次数 与颗粒的大小 和数目成正比。 用于 血细胞计数。 因其属于对颗粒个体的测
7、量和三维 的测量，不但能准确测量物料的粒 径分布，更能作粒子绝对数目和浓 度的测量。其所测粒径更接近真实 ，而且不象激光衍射散射原理受物 料的颜色和浓度的影响。三分类血球仪19项检测结果及RBC、PLT、WBC直方图 KX-21N采用全血和末梢血预稀释两种检测模式，均可取得精确 的19项血液参数： CBC (WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC, PLT) ；白细胞三分群结果 (Lymph %, #; Neut %, #; Mixed %,#)；以 及RDW-SD, RDW-CV, PDW, MPV, P-LCR. 全中文显示界面，操作异常方便 KX-21N的检
8、测结果均可在LCD屏显示，并可通过内置热敏打印机 输出。仪器具有状态监控和异常报警功能，每日保养非常方便。机内存储为300个检测结果（含直方图），并有X-bar 和 L-J两 种质控文件。SRV旋转阀技术保证定量精确 在样品分血阶段，KX-21N采用SYSMEX所有五分类产品采用的高 精度陶瓷旋转阀，其三片分离式设计和中段取血在保证分血精 确以外还可排除样品气泡等因素的干扰。另外，在检测部定量方面，KX-21N采用两种定量技术结合的方法：隔膜泵定容和时 间流速监测。操作安全、环保 在安全方面，KX-21N采用进样针内外壁自动冲洗功能。另外， 其血红蛋白检测原理采用了环保的季胺盐血红蛋白方法，不
9、含 氰化物的试剂对操作人员更加安全，对环境也更无害。数据输出与联网 KX-21N除内置热敏打印机打印结果以外，更可直接连接各种型 号的外置打印机。通过LAN接口（TCP/IP数据输出协议），KX- 21N还可以轻松地连接实验室网络实现数据输出和共享。*以SYSMEX KX-21N为例。五分类血球仪*以SYSMEX XS-800i为例。三大亮点： 敏锐的DNA染色方法学筛出幼稚细 胞，保证灵敏度 RNA染色技术有效监控血小板聚集, 保证准确性 检测模式齐全的20微升微量五分类 检测，最大便利性 有效识别末梢血采集中抗凝和摇匀 不良带来的血块凝集对细胞计数的 干扰血液分析仪采 血和应用建议 末梢全
10、血检测的优点是什么? 没有预稀释液的加入及相应人工误差环节 , 因为预稀释无论精密度还是准确度都不 如末梢全血模式.故使用血液分析仪,除了 静脉采血外,我们优先推荐末梢全血.不得 已才用预稀释模式。 怎样操作恰当? 用60ul的毛细管采血约60ul加入备有抗凝 剂的小炮弹，用手指弹试管底部混匀；混 匀后的标本放置5分钟即可进行血液常规 检测；无论是末梢全血标本还是预稀释标 本，都要求在标本混匀抗凝后放置5分钟 使其充分抗凝，然后再混匀上机检测 ,因 为抗凝充分些较好。结果及评价三分类 *以SYSMEX KX-21N为例 (WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC,
11、PLT) ；白细胞 三分群结果 (Lymph %, #; Neut %, #; Mixed %,#)；以 及RDW-SD, RDW-CV, PDW, MPV, P-LCR.五分类 *以SYSMEX KX-21N为例 WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT NEUT % LYMPH % MONO % EO % BASO % NEUT # LYMPH # MONO # EO # BASO # RDW-SD RDW-CV PDW* MPV PCT* P-LCR* 研究参数：IG %，IG #, OTHER %，OTHER #直方图WBC正常白细胞直方图特征 白细胞分类及正常
12、参考值右 表1，主要有6个部分，分别 如图1所示。其中：(1) (2) 表 示滴入溶血剂后的小白细胞 个数比率和个数，相当于淋 巴细胞；(3) (4) 表示滴入溶 血剂后的中细胞个数比率和 个数，相当于单核细胞，嗜 酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞 。(5) (6) 表示滴入溶血剂后 的大白细胞个数比率和个数 ，相当于嗜中性粒细胞。图1表1直方图RBC正常红细胞直方图特征 红细胞分类及正常参考值 见表2，图2是正常红细胞 直方图的分布特征，（7） 表示RDW-SD，即红细胞分 布宽度SD，它是将直方 图顶点的高度定位100%， 自下而上高度为20%时红 细胞分布宽度，是反映红 细胞体积异质性改变的参
13、数，能客观地反映红细胞 大小不等的程度。主要用 途是缺铁性贫血的诊断 和疗效观察；缺铁性贫 血和地中海贫血的鉴别诊 断；有助于贫血的病因 学分类。表2图2直方图PLT血小板分类及正常参考值见 表3，图3是正常血小板直方 图的分布特征。（8）PDW ：血小板分布宽度，将直方 图顶点的高度定位100%，自 下而上高度为20%时血小板 分布宽度，对检测血小板凝 集，与红细胞的重叠等有意 义。（9）MPV：平均血小 板容积，低鉴别线和高鉴别 线之间的血小板平均容积， 被认为可以提供血小板早血 功能，体内血小板动态等有 用信息。（10）P-LCR：大血 小板比率，12fl与高鉴别线 之间的血小板比率，对
14、检测 血小板凝集，与红细胞的重 叠以及监测血小板造血功能 等有意义。表3图3结果分析WBC（1）嗜中性粒细胞增高，核左 移 ，如图4所示，中性粒细胞比 例增高或淋巴细胞比例减低时 ，白细胞直方图表现为粒细胞 峰明显变大,淋巴细胞峰明显变 小。严重细菌感染时，如果中 性粒细胞发生中毒性改变，粒 细胞峰可向左移动或向右延伸 。 （2）单核细胞比例增高，(图5) 白细胞直方图表现为在单核细 胞区出现一个明显的峰,其大小 与单核细胞比例增高的程度有 关，常显示“R3”报警提示。值得 注意的是，仪器显示的“MO”或 “MID”增高仅表示可能是单核细 胞增高，也可能是嗜酸性粒细 胞或幼稚细胞等，因此，必须
15、 涂片染色后经显微镜确认。结果分析WBC（3）淋巴细胞减少（图6） （4）酸性粒细胞比例增高(图7) 白细胞直方图上也在单个核细 胞区出现一个明显的峰,其大小 也与嗜酸性粒细胞增高的程度 有关,注意事项与单核细胞比例 增高相同。 (5) 红细胞溶解不全，白细胞凝 集等的直方图特征分别见图8和 9。值得注意的是，异常的直方 图仅提示检查者粗略判断各类 白细胞细胞比例变化或有无明 显异常细胞出现，提示在显微 镜复检时应注意这些变化的真 正病理意义，或在正常人体检 中筛选是否需要进一步血涂片 检查，仅根据白细胞直方图的 变化来进行临床诊断的说法是 不正确的。结果分析RBC（1）小细胞贫血时，RDW正
16、常，红细 胞主群左移，分布在0-100fl，峰顶在 75fl处。主要是“小细胞低色素”RDW轻 度增高，红细胞主群左移，分布在50 100fl，峰顶在65fl处，主要见于“小细胞 低色素和不均一性。RDW明显增高，直 方图表现为有两个细胞峰，小细胞峰左移，峰顶在50fl处，大细胞峰封顶在 90fl处，“小细胞低色素和不均一性”。 （2）大细胞性贫血（图10，11）时， 主要有以下几种情况： RDW正常， 红细胞主群右移，分布在75130fl，峰 顶在100fl处，即“大细胞性”。RDW 轻度增高，红细胞主群明显右移，分布在75150fl，峰顶在105fl处，RDW轻 度增高，“大细胞、均一性”。RDW 明显增高，红细胞峰明显右移，有两个细胞峰，峰顶在100fl处为主，“大细胞 、不均一性”。 （3）正常细胞性贫血： RDW正常 ，红细胞主群分布在55110fl，峰顶在 88
