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1、1安痛藤对大鼠佐剂性关节炎的实验研究作者：黄丽萍， 谢一辉， 肖百全， 张叶青 【关键词】 安痛藤；, 类风湿性关节炎；, 镇痛摘要：目的研究安痛藤对类风湿性关节炎大鼠的影响，观察其镇痛作用。方法建立福氏佐剂诱导大鼠类风湿性关节炎模型；口服安痛藤水煎液，观察药物对实验性大鼠足肿胀的抑制作用；采用化学刺激致小鼠扭体观察安痛藤的镇痛作用。结果与模型组比较，安痛藤水煎液（2.4 g 生药/kg ，4.8 g 生药/kg）其有明显的镇痛作用，能明显地改善 AA 大鼠原发性炎症和继发性炎症，能明显在减轻 AA 大鼠的关节肿胀，降低多发性关节炎指数（P0.01） 。结论安痛藤有抗大鼠佐剂性关节炎的作用。关
2、键词：安痛藤； 类风湿性关节炎； 镇痛The Effects of Cissus assamica on Adjuvant Arthritis in RatsAbstract：ObjectiveTo study the effect of Cissus assamica on adjuvant arthritis in rats ,as well as its effect on 2relieving pain.MethodsThe model of adjavant arthritio in rat was induced by intradermal injection of CFA.Th
3、e parameter of ankle joint was measured at different time points.The inhibitory effects on paw edema of Cissus assamica were observed,and the effects of relieving pain were measured with writhing experiment on mice.ResultsCompared with models,Cissus assamica relieved pain on mice and inhibited paw e
4、dema on rats significantly.Primarily and succeeding inflammation were ameliorated.Polyarticular arthritis index decreased.ConclusionCissus assamica has curative effect on AA rats.Key words：Cissus assamica; Rheumatoid arthritis; Relieve pain安痛藤为葡萄科白粉藤属植物毛叶白粉藤 Cissus assamica(Laws.) Craib 的藤茎，味辛，性平。主要
5、分布在江西、福建、湖南、四川、贵州、云南、西藏、广东及广西，生于海拔2001 600 m 山谷、林下、林缘或山坡。全年均可采收，资源较丰富。为我省地方习用药材。安痛藤又名左爬藤、葫芦叶、左边藤、粗壳藤、红背丝绸、白背丝绸。具有祛风除湿、散寒、拔毒作用，民间用于治疗风湿痹痛、跌打扭伤、痈疽肿毒等，临床上有人用其3治疗类风湿性关节炎，取得了良好的效果。关于安痛藤对类风湿性关节炎的实验研究，目前国内尚未有人进行报道。本文对安痛藤抗类风湿性关节炎进行实验研究，以期为安痛藤用于治疗类风湿性关节炎提供实验依据。1 材料1.1 药材安痛藤采于江西省赣南山区，经鉴定为葡萄科白粉藤属植物毛叶白粉藤 Cissus
6、 assamica (Laws.) Craib 的藤茎，采用洗净，晒干，打成粗粉。1.2 动物 SD 雄性大鼠，重 170200 g，购自江西医学院实验动物中心。许可证号：赣动许字（1996）第 02 号。1.3 试剂自制 FreundS 完全佐剂1 。液体石蜡，广东汕头西陇化工厂，CP，批号 0309302；羊毛脂，中国医药集团上海化学试剂公司，批号 0030618。卡介苗冻干粉，武汉生物制品研究所，批号 20030605。无水羊毛脂加热溶化后取 1 份置于研钵中，稍冷却，边研磨边加入液体石蜡 2 份。研磨 30 min 后，共热 7010 min。然后用高压灭菌 1 h。取出后按每毫升加入
7、卡介苗 7.5 mg，研磨均匀，置 4 冰箱保存备用。使用前需混匀。泼尼松片，5 mg/片，浙江仙居制药有限公司生产，批号 020502。阿司匹林，4由无锡阿斯利康制药有限公司生产，0.5 g/片，批号 200307002。2 方法2.1 药物制备安痛藤药材粗粉用蒸馏水煎煮，硅藻土过滤，滤液浓缩至相当于原药材 1.71 g/ml 的浓度，备用。2.2 大鼠 AA 模型的制备与原发性炎症检测2除正常对照组外每只大鼠右足跖皮内注 0.1 ml 佐剂致炎，正常对照组注射等量生理盐水。致炎前先用软尺测量每鼠左、右踝关节周长作为基础值，分别在致炎后第 24，48 h 及 11，15，19 ，23 d 测
8、量致炎对侧踝关节周长，以致炎后周长减去致炎前周长作为肿胀值，以观察 AA 鼠原发及继发炎症的变化情况。2.3 AA 大鼠模型多发性关节炎指数检测3记录全身关节病变程度，按 5 级评分法评价，根据未注射佐剂的其余 3 个肢体的病变程度累计积分，计算出关节炎指数（AI） 。0 分：无红肿；1 分：趾关节红肿；2 分：趾关节和足跖肿胀； 3 分：踝关节以下的足爪肿胀；4 分：包括踝关节在内的全部足爪肿胀。2.4 动物的分组与给药方案大鼠随机分成 5 组，即安痛藤低剂量组成、安痛藤中剂量组、安痛藤高剂量组、阳性药（泼尼松）5组、模型组，每组 10 只。各组分别灌胃安痛藤 1.2，2.4，4.8 g 生
9、药/kg，泼尼松水溶液 30 mg/kg 及等量蒸馏水溶液，1 次/d （1 ml/100 g） ，致炎前 2 d 开始给药，连续给药至致炎后第 23 天。2.5 对小鼠镇痛作用的影响4 动物随机分为 6 组，每组10 只，即安痛藤低、中、高剂量组，阿司匹林组、模型组和对照组。模型组和对照组给予蒸馏水，其他各组均灌胃给予相应药物 20 ml/kg，连续给药 7 d，末次给药 60 min 后，除对照组腹腔注射生理盐水，各鼠均腹腔注射 0.6%醋酸 0.2 ml，观察 10 min 内各组出现扭体反应（腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高）小鼠只数，自注射醋酸后至小鼠出现第 1 次扭体反应（腹部内凹、伸
10、展后肢、臀部抬高）小鼠只数，自注射醋酸后到小鼠出现第 1 次扭体的时间（潜伏期，如果 10 min 未出现按 600 s 算） ，每只小鼠扭体反应次数。2.6 统计处理结果以 s 表示，采用 SPSS10.0 统计软件进行统计处理，方差齐同用 LSD 检验，不齐用 Dunnett T3 检验。3 结果3.1 对 AA 大鼠踝关节原发性炎症的影响结果见表 1。注射佐剂侧（右后肢）足爪从第 1 天起持续肿胀 5 d 左右，而后肿胀逐渐消退，于第 8 天左右再次持续肿胀，安痛藤中、高剂量组可明显减轻 AA 大鼠踝关节原发炎症，使肿胀度明显下降，其中高剂量组6自致炎后 24 h 开始起效，中剂量自致炎
11、后 48 h 开始起效。表 1 安痛藤对 AA 大鼠踝关节原发性炎症的影响（略）()内数据为关节肿胀抑制率 (%)；与模型组比较，P 0.05，P0.01，P0.001，n=10表 2 安痛藤对 AA 大鼠踝关节继发性炎症的影响（略）( )内数据为关节肿胀抑制率；与模型组比较，P 0.05，P0.01，P0.001，n=10表 3 安痛藤对 AA 大鼠多发性关节炎指数的影响（略）与模型组比较，P0.05，P0.01，P 0.001，n=10表 4 安痛藤对大鼠镇痛作用的影响（略）与对照组比较，P0.001 ；与模型组比较，P 0.05，P0.01，P0.001，n=1073.2 对 AA 大鼠
12、踝关节继发性炎症的影响结果见表 2。继发性反应大都第 11 天左右发生，表现为注射佐剂对侧（左后肢） ，尾部、耳部及前脚关节也有不同程度的肿胀。安痛藤中、高剂量组可明显减轻 AA 大鼠踝关节继发炎症，使肿胀度明显下降。3.3 对 AA 大鼠多发性关节炎指数的影响结果见表 3。继发性反应大都第 11 天左右发生，表现为注射佐剂对侧（左后肢）足肿胀，尾部、耳部及前脚关节也有不同程度的肿胀。安痛藤中、高剂量组可明显减轻 AA 大鼠踝关节继发炎症，使肿胀度明显下降。3.4 对小鼠镇痛作用的影响从表 4 可以看出，腹腔注射 0.6%冰醋酸可致小鼠出现疼痛反应。模型组小鼠全部出现扭体反应，次数明显增多，说
13、明造模是成功的，安痛藤低、中、高剂量均能明显减少小鼠扭体反应次数，中、高剂量可延长潜伏期，高剂量能减少扭体反应的鼠数，说明其有一定的镇痛效应，高剂量组作用效果与阿司匹林相近。4 讨论类风湿性关节炎是一种进行性、多关节炎症为主要表现的全身性自身免疫性疾病，主要表现为滑膜炎性增生、单核细胞浸润和新生血管形成。目前尚无根治本病的方案和预防措施，临床上主要8治疗药物包括非甾体抗炎药、慢作用抗风湿药和肾上腺皮质激素等5 。由于药物的副作用严重，引起的肝肾损害、肺纤维化等使病人难以坚持长期服药。寻求一种有效、安全的治疗药物是我们的目的。安痛藤为我省习用的治疗风湿痹痛的药材，我们的实验证实其有明显的镇痛作用
14、，能明显地改善 AA 大鼠原发性炎症和继发性炎症，能明显减轻 AA 大鼠的关节肿胀，降低多发性关节炎指数，提示安痛藤中具有抗类风湿性关节炎的有效成分，但具体是哪一种物质起作用还有待进一步研究确定。参考文献：1 马来东，李 俊，陈敏珠，等 .大鼠佐剂性关节炎的诱导及其免疫异常的研究J.中国实验临床免疫学杂志，1995，7（3）：13.2 王丽新，陈纪藩，肖力强，等.制作大鼠关节炎模型的比较实验J.中药新药与临床药理，1996，7（2 ）：96.3 戴 敏，魏 伟，汪倪萍，等 .木瓜苷对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用J.中国药理学通报，2003，19（3）：340.4 徐叔云 .药理实验研究方法学，第 2 版M.北京：9人民卫生出版社，1994：700.5 Binning M.Modem drug treatment options for rheumatoid arthritisJ.Aust Nurs,2001,8(9)：1.
