伪狂犬的净化策略-辉瑞王科文

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1、1wkw欢迎各位专家、朋友光临王科文辉瑞动保技术服务部wkw主 题?国内猪伪狂犬病流行特点?猪伪狂犬病免疫研究进展?猪场伪狂犬病清除路线wkw伪狂犬病简述?疱疹病毒引起。?感染多种哺乳动物。?猪 种猪繁殖障碍。 仔猪神经症状、腹泻、死亡。 生长肥猪呼吸道重要原发病、生长缓慢。 和其它病互作:猪瘟1(致死性感染)、喘气病2 (加重)、副猪嗜血杆菌3、蓝耳病等。1、S.Suradhat ,Vet. Microbiology 119 (2007) 19;2、J. Vet. Med. Sci. 60(30):295-300,1998;3、J. Cornp. Path. 1994 Vol. 110, 3

2、29-339.wkw国内猪群伪狂犬病流行特点gE-ELISA流行病学调查 2005.4-2007.4wkw国内猪伪狂犬病流行特点?猪场伪狂犬病阳性状况?猪伪狂犬病阳性猪群感染特点wkw33.06%28.53%1639.5574687.25%1389102总计23.80%20.91%332.5159092.00%22325华南区20.07%18.35%136.574492.86%11314华中区35.26%28.95%562194182.86%62935华东区47.24%41.37%608.5147185.71%42428华北、东北区阳性场的平 均阳性率%平均阳 性率%样本阳 性数总样 本数阳性

3、场 百分率%阴性 场数阳性 场数检测猪 场数各区域gE抗体阳性率总体状况差异性:华北、东北地区和华中区、华东区、华南区的阳性 状况差异显著,P值分别是0.034、0.044、0.0152wkw0510152025303540455020%以下20-40%40-60%60-80%80%以上不同阳性率类别所占比例 (%)不同阳性率类别猪场所占比例wkw猪场伪狂犬病阳性状况?阳性场普遍存在?猪场间阳性状况差异显著?许多场采取了有效措施?区域间阳性场阳性率差异显著wkw国内猪伪狂犬病流行特点?猪场伪狂犬病阳性状况?猪伪狂犬病阳性猪群感染特点wkw010203040506070公猪1-3胎4-8胎6周9

4、周12周15周18周20周后备母不同生产阶段阳性率(%)各生产阶段gE抗体阳性率分布wkw10.460.450.360.560.57后备母猪10.120.120.290.3120周10.360.360.3012周10.530.466周10.63母猪1公猪后备母猪20周12周6周母猪公猪各生产阶段阳性率相关系数wkw母猪群阳性率?特点 高阳性率 随着胎次上升,阳性率仍上升?主要原因 潜伏感染。 影响免疫力因素复杂,生命周期长。 公猪高阳性率。 后备没有确保阴性。 管理因素导致免疫抑制。3wkw生长育肥猪群阳性率?特点 12周之前,阳性率下降。 12周龄以后,阳性率升高。?原因 母源抗体影响。 疫

5、苗质量、免疫程序等影响免疫效果。 感染规律。 生产方式。wkw国内猪伪狂犬病流行特点?猪场伪狂犬病阳性状况?猪伪狂犬病阳性猪群感染特点wkw主 题?国内猪伪狂犬病流行特点?猪伪狂犬病免疫研究进展?猪场伪狂犬病清除路线wkw猪伪狂犬病免疫研究进展?个体免疫?群体免疫?免疫减少潜伏感染?免疫程序的影响?“清伪灵”疫苗及免疫wkw个体免疫的认识?感染所需的病毒量和猪龄、毒株及免疫有关。?免疫减少临床表现(Wittmann et al., 1982; De Smet et al.,1992)。?免疫提高感染的阈值(Nico,1997,100-1000倍)。?免疫降低攻毒后排毒量和排毒持续时间 (Vis

6、ser,1997,1000-10000倍)。wkw个体免疫的认识?免疫降低潜伏感染带来的风险。?免疫的潜伏感染猪只如果激活,排病毒量显著 少于非免疫猪(Schoenbaum 等,1990)。?免疫常常不能完全阻止病毒的增殖和感染的发 生(Zuffa et al., 1982; De Leeuw and Van Oirschot, 1985;Pensaert et al., 1990; Vannier et al., 1991)。4wkw个体免疫的认识?主动免疫主动免疫。?免疫后的抗体可以保护猪只免受PRV攻击后死亡。?抗体水平与感染后减少病毒早期复制相关性较差(Martin and Wardl

7、ey, 1987; Marchioli et al., 1988; Kimman et al., 1992)。?细胞介导免疫(CMI)和抗体反应在保护PRV早期感染 中相当重要(Rooij3,2004)。?攻毒后排毒量和抗体水平无明显相关,T细胞免疫对于 有效减少病毒排出和潜伏感染是必要的(Rooij3,2004)。?弱毒疫苗减少临床表现和病毒排出等方面效率要高得 多(De Leeuw and Van Oirschot, 1985; Vannier, 1986; Pensaert et al., 1990)。wkw个体免疫的认识?被动免疫(Kritas,1997) 。?高滴度SN抗体(272-

8、354) 几乎可以完全保护新生仔猪。 抑制PR病毒(Ka毒株)入侵和扩散。?低滴度的SN抗体 不能免受PRV入侵神经和扩散,特别是通过嗅神经 的侵入。 和无母源抗体的对照组相比,在三叉神经节中的病 毒滴度显著低。wkw个体免疫的认识?被动免疫(Visser,1997; Monte ,1997)?高滴度的母源抗体( 9 log2) 能够保护仔猪不出现临床表现和死亡。 而不能完全避免不感染和病毒的复制。?提出潜伏感染可能性可能和年龄呈负相关。?不同结论可能和PRV毒株不一样有关。wkw群体免疫的认识?免疫引导群体产生免疫力而阻止感染在猪群内 和间的传播(Halloran et al.,1991)。

9、?Diekmann等用R值量化群体传播率(1990)。 猪群R值小于1,传染性将衰减。 如果R值大于1,感染将扩散和传播。wkw群体免疫的认识?母猪群(99个,Nes,1997等),1次/4月,gE-弱毒苗 R值为0.66。 除了疫苗有效外,还和限制母猪的相互接触有关。?生长猪群(Stegeman,1994等),免疫1次、2次 免疫1次R值分别是3.4。 免疫2次R值1.5。 日增重两次免疫也明显优于一次免疫。wkw群体免疫的认识?不同毒株苗对SPF猪的影响(Bouma,1997) 高的,0.98。 低的,0。?不同健康状况猪群的差异(Nes,2001) 常规猪群,2.5。 SPF猪群,和0。

10、常规猪群存在母源抗体(MDA)干扰、亚临床感染和遗传因 素以外,还会和猪的易感性、传染性、易感猪和感染猪的接触 率的复杂互作有关。5wkw群体免疫的认识?Bouma (2005)等研究了基因缺失疫苗在实验室和田间 的效率,结果田间试验R值仍然大于1,但是通过进一 步的减少猪只相互接触,R值被降到了1以下。?在常规猪群单纯通过疫苗来净化伪狂犬病是不可能 的,其它例如疫苗质量、气候和其它疾病等风险因素 影响其效果。?Nes(2001)等运用数学模型评估出运用gE基因缺失弱 毒疫苗结合像减少猪群内接触等管理措施,能够导致R 值小于1。wkw免疫减少潜伏感染?潜伏感染(Thawley et al.,

11、1984) 是伪狂犬病病毒感染后的一大特点。 可在应激和免疫抑制的情况下重新激活并散毒。 也会减弱免疫反应。wkw免疫减少潜伏感染?提前定植理论(Vilnis,1998) 不同疫苗毒株 途径对攻毒后潜伏感染的差异 ?细胞免疫因子影响(Lekstrom-Himes et al., 2000; Liu et al., 2000) IFN-r ?Yoon1(2007)发现 T细胞免疫,减少PRV潜伏量扮演重要角色 Th1细胞(辅助T细胞)参与了PRV野毒潜伏感染水 平的调理。 滴鼻途径免疫的实验鼠没有发生潜伏感染。潜伏感染的发生和攻毒途径、攻毒毒株有关,干预 措施多依赖良好的弱毒和佐剂疫苗。wkw免

12、疫程序的影响?接种途径 肌肉注射,有效而标准的途径。 滴鼻,有利于回避母源抗体(MDA)的干扰(De Leeuwet al. 1982; De Leeuw and Van Oirschot, 1985),研究 结果并不一致(De Leeuw,1985;McCaw,1993)。 试验动物的研究证实滴鼻接种可减少潜伏感染 (Yoon13,2007)。wkw免疫程序的影响?母源抗体和免疫次数(Bouma,1997) 没有免疫仔猪 ? 有母源抗体,R值, 0.2。 ? 无母源抗体,R值,6.3。 免疫1次仔猪 ? 有母源抗体,R值,23。 ? 无母源抗体,R值,0.6。 免疫2次仔猪 ? 有母源抗体,

13、R值,0.6。 ? 无母源抗体,R值,0.3。wkw免疫程序的影响?母源抗体和免疫次数(Magorzata,2010) 细胞免疫 ? 弱毒苗对T细胞早期活化是成功的,但是,要获 得长期的细胞免疫,至少需要加强一次。 ? 太早免疫(1周),甚至8周龄或12周龄加强 后,T细胞免疫力还是不能持续整个育肥期。 体液免疫。 ? 免疫时间早,免疫效果都不好母源gB抗体S/N值 0.35,gE-弱毒苗免疫仔猪能够受到被 动免疫的保护,又能够发展长期的细胞免疫和体液免疫。6wkw免疫程序的影响?1989-1994,荷兰96km1989-1994,荷兰96km2 2田间试验证明(田间试验证明(320个猪群得出

14、结论,头两年)?母猪每年3次,肥猪2次接种 种猪阳性率:69%33%。 肥猪阳性率:49% 5%。?其他地区 肥猪阳性率没变:40%。John Mcinereny,1997wkw“清伪灵”疫苗及免疫?经典的Barther-61毒株?特色、人性化的安全指示剂?具备优秀伪狂犬病疫苗的所有优点wkw“清伪灵”免疫和免疫程序Fattening Pigs Rearing GiltsSowsProtectionGestationGestationEradicationDifferent Stages of production控制净化育肥猪后备种猪母猪妊娠 妊娠生产不同阶段wkw“清伪灵”免疫后攻毒排毒l

15、og 10 GMT (TCID50/ml)012345123456789 10 11 12 12 14 15Days Post-Challengelogs of virusControls Vaccine?攻毒后免疫组排毒时间和排毒量显著减少wkw“清伪灵”免疫后攻毒增重47.577.1760.6754.5682.862.4301020304050607080900 Days14 DaysPoundsVac/Chal Nonvac/Chal Nonvac/Nonchal?攻毒后免疫组增重显著高于对照组wkw欧洲净化关键时期的主要疫苗份额欧洲在净化关键时期的富道疫苗份额0%10%20%30%40

16、%50%92年93年94年富道 英特威7wkw主 题?国内猪伪狂犬病流行特点?猪伪狂犬病免疫研究进展?猪场伪狂犬病清除路线wkw猪场伪狂犬病清除路线?国内、外伪狂犬病净化概况?常见清除方法比较?推荐清除猪场伪狂犬病技术路线wkw国内、外伪狂犬病净化概况?芬兰、挪威、瑞典、丹麦、英国。?奥地利、澳大利亚、法国、德国(2003)、荷兰(2007)。?加拿大、美(1989-2004)。?。wkw常见清除方法比较?清群、减群适合低流行率和低密度的地区 英国、丹麦,法国和德国的部分地区运用?检测淘汰 当病毒没有循环时使用 常常结合其它方法 不会迅速清除病毒?免疫后检测淘汰法 结合免疫、检测、淘汰、更新后备、管理等措施wkw110.790.43累计减少0000600.0100500.050040.020.240.090.0330.180.230.230.1820.80.470.4

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