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1、学号2 Q Q 窆2 Q 2 Q 2 2南素蔑鼍戈学博士学位论文黑腹果蝇对甲醇的解毒代谢及行为反应王书平答辩E l 期三Q 二三生盍旦1 Y 2 3 6 0 6 8 8 T H ED E T O X I F I C A T I O N O FA N DB E H A V I O R A LR E S P O N S E ST OM E T H A N O LI ND R O S O P H I L A凇乙4 D G 么S 死豫AD i s s e r t a t i o nS u b m i t t e dt oN a n ji n gA g r i c u l t u r a lU n i
2、v e r s i t yI nP a r t i a lF u l f i l l m e n to ft h eR e q u i r e m e n t sF o rt h eD o c t o r a lD e g r e eo fA g r i c u l t u r eS c i e n c eS u p e r v i s e db yD e p a r t m e n to fE n t o m o l o g yC o l l e g eo fP l a n tP r o t e c t i o nN a n ji n gA g r i c u l t u r a lU n
3、i v e r s i t y ，N a n j i n g2 1 0 0 9 5 ，P R C h i n aJ u n e2 0 1 2原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者( 需亲笔) 签名：王军如7 埤多月么日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的
4、复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密口，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。( 请在以上方框内打“”)学位论文作者( 需亲笔) 签名：至平洳f 埠2 ；月厶日导师( 需亲笔) 签名：翩嗝加胁年多月苫日目录目录E jj j 乏i摘要IA B S T R A C T V缩略词中英文对照第一章文献综述11 自然界甲醇的来源11 1 植物产生和释放大量甲醇11 2 植物腐烂产生和释放大量甲醇2 2 甲醇对昆虫的潜在毒害23 短碳链醇在果蝇体内的氧化代谢33
5、 1 果蝇幼虫A D H 的活性43 2 果蝇成虫A D H 的活性53 3 其它脱氢酶的活性及诱导表达73 4A D H 遗传学、分子生物学及纬度对基因频率的影响83 5 乙醛在果蝇体内的代谢93 6 乙酸在果蝇体内的代谢1 03 7 短碳链醇氧化途径多种酶之间的协同114 短碳链醇在果蝇体内的非氧化代谢1 24 1 乙醇分子与细胞膜的相互作用1 24 2 乙醇分子对脂相关信号途径的干扰1 34 3 膜脂的流动性与对乙醇的耐受性1 35 乙醇对黑腹果蝇行为的影响。155 1 乙醇诱导的行为种类155 2 介导乙醇行为学效应的信号途径1 85 3 乙醇行为学效应的细胞学机制2 05 4 突触功
6、能与神经元兴奋2 15 5 神经回路2 36 乙醇与黑腹果蝇的性行为。2 46 1 性剥夺导致雄性果蝇滥用乙醇2 46 2 重复接触乙醇增强同性求偶行为2 56 3 重复接触乙醇影响雄蝇对雌蝇的性行为2 87 黑腹果蝇神经营养信号转导途径2 97 1 哺乳动物神经营养信号2 97 2 黑腹果蝇细胞的程序化与随机死亡3 07 3 依赖于胶细胞的神经营养供给317 4 黑腹果蝇的神经营养因子3 27 5 多巴胺的神经营养作用3 4黑腹果蝇对甲醇的解毒代谢机制及行为反应7 6 神经胶细胞数量的调节3 48 本文研究目的3 6第二章细胞色素P 4 5 0 单加氧酶参与幼虫对甲醇的解毒代谢。3 71 材
7、料与方法3 81 1 供试果蝇及培养3 81 2 主要试剂与仪器3 91 3 甲醇耐受性及酶抑制剂增效作用测定3 91 4 多功能氧化酶活力测定4 11 5 总R N A 的提取4 21 6e D N A 第一链的合成一4 21 7C Y P 编码基因表达量的检测4 32 结果与分析。4 52 1 甲醇、甲醛及酶抑制剂对黑腹果蝇2 龄幼虫的毒力4 52 2 甲醇、甲醛与酶抑制剂混用的联合作用4 72 3 不同浓度甲醇处理果蝇幼虫多功能氧化酶活力的测定4 82 4 甲醇诱导果蝇幼虫c y p 基因的表达4 83 讨论4 9第三章成虫对甲醇的解毒代谢5 3 1 材料与方法一5 41 1 供试果蝇的
8、培养及筛选5 41 2 主要试剂与仪器5 41 3 成虫毒力测定方法5 41 4 多功能氧化酶活力测定5 51 5 总R N A 提取及c D N A 第一条链的合成5 51 6 果蝇成虫甲醇代谢中的代谢酶基因表达量检测5 51 7 转基因品系的选择和实验验证5 61 8 数据统计与分析5 62 结果与分析5 72 1 甲醇及5 种酶对黑腹果蝇雌雄成虫的毒力5 72 2 果蝇雄雌虫甲醇及5 种酶抑制剂混用时的毒力6 02 3 甲醇与酶抑制剂混用对果蝇雌雄虫的联合作用6 22 。4 果蝇雌雄虫经甲醇处理后多功能氧化酶比活力上升6 32 5 甲醇诱导黑腹果蝇雌雄虫c y p 基因的表达6 4 2
9、6 突变品系的选择6 62 7 突变品系的实验验证6 63 讨论6 8第四章甲醇多代筛选对黑腹果蝇的影响7 11 材料与方法7 l1 1 供试果蝇的培养及筛选7 11 2 主要试剂与仪器7 21 3 毒力测定方法7 21 4 各发育阶段历期的观察和记录7 2目录1 5 现实遗传率( h 2 ) 的计算7 21 6 多功能氧化酶活力测定7 31 7 总R N A 的提取及e D N A 第一条链的合成7 31 8 果蝇成虫代谢酶基因的表达量检测7 31 9 数据统计与分析7 42 结果与分析。7 42 1 甲醇的筛选提高黑腹果蝇幼虫的耐受性7 42 2 取食甲醇对黑腹果蝇发育历期的影响7 52 3 甲醇耐受品系酯酶和多功能氧化酶活力
